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银杏酚酸的分离纯化及其生物活性研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
第一章 前言第15-24页
 1 银杏酚酸的研究概况第15-20页
 2 研究的目的和意义第20-24页
第二章 银杏酚酸的反相高效液相色谱测定方法研究第24-36页
 第一节 引言第24-25页
 第二节 实验部分第25页
   ·实验材料第25页
     ·材料和试剂第25页
     ·主要仪器第25页
   ·实验方法第25页
     ·样品的制备第25页
     ·银杏酚酸的反相高效液相色谱分析第25页
 第三节 结果与分析第25-34页
   ·银杏酚酸的RP-HPLC分离系统研究第25-31页
     ·检测波长的选择第25-26页
     ·流动相组成对银杏酚酸保留值的影响第26-27页
     ·pH值对银杏酚酸在色谱柱中保留行为的影响第27-29页
     ·温度对分离银杏酚酸的影响第29-31页
   ·银杏酚酸定量分析的研究第31-34页
     ·银杏酚酸色谱峰紫外可见光谱的一致性第31页
     ·线性关系第31-33页
     ·精密度的测定第33页
     ·银杏酚酸含量的回收率试验第33-34页
     ·样品测定第34页
 第四节 讨论第34-36页
第三章 银杏酚酸的提取工艺、纯化和结构鉴定第36-54页
 第一节 引言第36页
 第二节 实验部分第36-38页
   ·实验材料第36-37页
     ·材料第36页
     ·主要试剂第36-37页
     ·主要仪器第37页
   ·实验方法第37-38页
     ·银杏酚酸提取的工艺流程第37页
     ·树脂的预处理第37页
     ·树脂的筛选第37页
     ·计算不同吸附流速下的泄漏率第37页
     ·测定不同浓度洗脱剂的洗脱流出液的银杏酚酸含量第37-38页
     ·萃取条件的选择第38页
     ·银杏酚酸测定方法第38页
     ·银杏酚酸的紫外光谱分析第38页
     ·银杏酚酸的红外光谱分析第38页
     ·银杏酚酸的液相色谱-质谱分析第38页
 第三节 结果与分析第38-52页
   ·提取条件的优化第38-43页
     ·浸提溶剂的选择第39页
     ·溶剂浓度的选择第39页
     ·浸提条件的选择第39-43页
       ·提取温度的影响第39页
       ·提取时间的影响第39-40页
       ·溶剂用量的影响第40页
       ·提取次数的影响第40-43页
   ·银杏酚酸的分离纯化第43-47页
     ·树脂的筛选第43-44页
       ·吸附填料的选择第43页
       ·大孔吸附树脂型号的选择第43-44页
     ·吸附流速对吸附效果的影响第44-45页
     ·乙醇浓度对树脂洗脱性能的影响第45-46页
     ·原液重复过柱对树脂吸附率的影响第46页
     ·萃取溶剂的选择第46-47页
   ·银杏酚酸的结构鉴定第47-52页
     ·银杏酚酸乙醇溶液pH值第47页
     ·三氯化铁反应第47页
     ·银杏酚酸的紫外光谱分析第47-48页
     ·银杏酚酸的红外光谱解析第48-49页
     ·银杏酚酸的LC/(一)ESI/MS分析与鉴定第49-52页
 第四节 讨论第52-54页
第四章 银杏酚酸的抑菌活性研究第54-59页
 第一节 引言第54页
 第二节 实验部分第54-56页
   ·实验材料第54-55页
     ·菌种和试剂第55页
     ·培养基第55页
   ·实验方法第55-56页
     ·样品制备第55页
     ·菌悬液的制备第55-56页
     ·抑菌活性测定第56页
 第三节 结果与分析第56-58页
   ·银杏酚酸对细菌的抑制活性第56-57页
   ·银杏酚酸对真菌的抑制活性第57-58页
 第四节 讨论第58-59页
第五章 银杏酚酸抗肿瘤作用及机理研究第59-69页
 第一节 引言第59页
 第二节 实验部分第59-62页
   ·实验材料第59-60页
     ·药物第59-60页
     ·实验动物第60页
     ·细胞株第60页
   ·主要试剂第60页
   ·主要仪器第60页
   ·实验方法第60-62页
     ·接种方法第60-61页
     ·动物分组及处理第61页
     ·抗肿瘤实验第61页
     ·过氧化氢酶(CAT)活力的测定第61页
     ·乳酸脱氢酶(LDH)活力的测定第61页
     ·迟发型超敏反应(DTH)第61-62页
     ·脾细胞抗体形成实验第62页
     ·血清溶血素含量测定第62页
 第三节 结果与分析第62-67页
   ·银杏酚酸对S_(180)的抑瘤率第62-63页
   ·银杏酚酸对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响第63-64页
   ·银杏酚酸对荷瘤小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)活力的影响第64页
   ·银杏酚酸对荷瘤小鼠红细胞过氧化氢酶(CAT)活力的影响第64-65页
   ·银杏酚酸对荷瘤小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响第65-66页
   ·银杏酚酸对荷瘤小鼠脾细胞抗体形成的影响第66-67页
   ·银杏酚酸对荷瘤小鼠血清溶血素含量的影响第67页
 第四节 讨论第67-69页
第六章 银杏酚酸诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的研究第69-85页
 第一节 引言第69-70页
 第二节 实验部分第70-75页
   ·实验材料第70-71页
     ·实验样品第70页
     ·主要试剂第70页
     ·主要仪器第70-71页
   ·实验方法第71-75页
     ·样品制备第71页
     ·细胞培养第71页
     ·细胞生长抑制实验(MTT法)第71页
     ·细胞凋亡在可见光下的形态学观察第71页
     ·细胞凋亡在荧光下的形态学观察第71-72页
     ·单细胞电泳检测银杏酚酸对hela细胞DNA的损伤作用第72-73页
       ·试剂与配制第72页
       ·细胞处理第72-73页
       ·制片第73页
       ·电泳和镜检第73页
     ·凋亡细胞DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测第73页
     ·原位(缺口)末端标记法(TUNEL)检测Hela细胞凋亡第73页
     ·流式细胞仪定量分析细胞凋亡峰第73-74页
       ·试剂与配制第74页
       ·细胞收集第74页
       ·样品处理第74页
     ·RT-PCR检测银杏酚酸对hela细胞的Bcl-2基因表达的影响第74-75页
 第三节 结果与分析第75-83页
   ·银杏酚酸对hela细胞增殖的抑制作用第75页
   ·银杏酚酸诱导hela细胞凋亡时的形态学变化第75-77页
     ·细胞凋亡在可见光下的形态学观察第75-76页
     ·细胞凋亡在荧光下的形态学观察第76-77页
   ·凋亡细胞DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测第77-78页
   ·单细胞电泳检测银杏酚酸对hela细胞DNA的损伤作用第78-80页
   ·原位末端标记检测细胞凋亡第80页
   ·流式细胞仪对细胞凋亡峰的定量分析第80-82页
   ·银杏酚酸对hela细胞Bcl-2基因表达的影响第82-83页
 第四节 讨论第83-85页
第七章 结论第85-87页
文献综述 细胞凋亡及其分子生物学基础第87-110页
参考文献第110-117页
致谢第117-118页
博士期间发表论文第118-119页

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