| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-16页 |
| 英文缩略表 | 第16-17页 |
| 1 引言 | 第17-39页 |
| ·逆境胁迫与细胞信号转导 | 第18-21页 |
| ·细胞信号转导系统 | 第18-19页 |
| ·植物细胞信号转导 | 第19-21页 |
| ·蛋白激酶 | 第21-26页 |
| ·蛋白激酶的结构、生化特性及其与信号转导的关系 | 第21-23页 |
| ·逆境胁迫诱导的植物蛋白激酶基因 | 第23-26页 |
| ·促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)与植物细胞信号转导 | 第26-38页 |
| ·MAPK的结构特点 | 第26-27页 |
| ·MAPK的级联系统 | 第27-30页 |
| ·MAPKs在植物细胞信号转导中的作用 | 第30-38页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-50页 |
| ·试验材料 | 第39-40页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·菌株 | 第39页 |
| ·酶及生化试剂 | 第39页 |
| ·PCR引物 | 第39-40页 |
| ·试验设计 | 第40页 |
| ·模拟干旱处理 | 第40页 |
| ·抑制剂处理 | 第40页 |
| ·试验方法 | 第40-50页 |
| ·酶活性及蛋白质浓度的测定 | 第40-41页 |
| ·SOD活性测定 | 第40页 |
| ·CAT活性测定 | 第40页 |
| ·POD活性测定 | 第40-41页 |
| ·用于蛋白激酶活性测定的蛋白质的提取 | 第41页 |
| ·蛋白激酶活性测定 | 第41页 |
| ·ABA含量测定 | 第41页 |
| ·RNA的提取及目的基因cDNA的扩增 | 第41-44页 |
| ·RNA的提取(CTAB法) | 第41-42页 |
| ·反转录cDNA第一条链的合成 | 第42页 |
| ·RT-PCR反应体系及条件 | 第42-43页 |
| ·目的片段的扩增 | 第43-44页 |
| ·特异片段的回收、克隆及鉴定 | 第44-47页 |
| ·特异片段的回收 | 第44页 |
| ·特异片段的克隆与鉴定 | 第44-45页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞(DH5α)的制备 | 第45页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第45页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第45-47页 |
| ·序列测定 | 第47页 |
| ·序列比较和系统发生树构建 | 第47页 |
| ·RNA的提取、转膜及Northern杂交 | 第47-48页 |
| ·RNA的提取(CTAB法) | 第47页 |
| ·转膜 | 第47页 |
| ·Northern杂交、压片和显影 | 第47-48页 |
| ·DNA的提取、转膜及Southern杂交 | 第48-50页 |
| ·DNA的提取(CTAB法) | 第48-49页 |
| ·转膜 | 第49页 |
| ·Southern杂交 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-82页 |
| ·苹果MaMAPK基因的克隆与序列分析 | 第50-56页 |
| ·苹果MaMAPK基因中间片段的分离 | 第50-51页 |
| ·苹果MaMAPK基因3′末端的分离 | 第51-52页 |
| ·苹果MaMAPK基因5′末端的分离 | 第52页 |
| ·苹果MaMAPK基因全长cDNA的克隆 | 第52页 |
| ·苹果MaMAPK基因全长cDNA序列及其推导的氨基酸序列分析 | 第52-54页 |
| ·五种植物促分裂原活化蛋白激酶基因的氨基酸序列比较 | 第54-55页 |
| ·MAPK序列系统发生分析 | 第55-56页 |
| ·MaMAPK基因在3种苹果基因组中存在情况及其表达特性 | 第56-66页 |
| ·MaMAPK的基因组Southern杂交分析 | 第56-61页 |
| ·MaMAPK在苹果基因组中的拷贝数 | 第56-60页 |
| ·MaMAPK在苹果基因组中的存在形式 | 第60-61页 |
| ·水分胁迫下MaMAPK在苹果中的表达特性 | 第61-66页 |
| ·MaMAPK在苹果根系中的表达特性 | 第61-62页 |
| ·MaMAPK在苹果叶片中的表达特性 | 第62-64页 |
| ·苹果根系和叶片MaMAPK基因表达特性的比较 | 第64页 |
| ·不同种间根系和叶片MaMAPK基因表达特性比较 | 第64-65页 |
| ·MaMAPK基因mRNA相对表达量与MAPK活性的关系 | 第65-66页 |
| ·水分胁迫下3种苹果蛋白激酶活性变化规律与信号转导作用 | 第66-82页 |
| ·可溶性蛋白磷酸化与去磷酸化反应时间曲线 | 第66-67页 |
| ·水分胁迫下苹果蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶活性变化规律 | 第67-71页 |
| ·总激酶活性的变化规律 | 第67-68页 |
| ·MAPK活性的变化规律 | 第68-69页 |
| ·总激酶活性与MAPK活性表达量分析 | 第69-70页 |
| ·水分胁迫下苹果蛋白磷酸酯酶活性变化规律 | 第70-71页 |
| ·水分胁迫下苹果ABA含量变化规律及与MAPK活性的关系 | 第71-73页 |
| ·苹果根系中ABA含量变化规律 | 第71-72页 |
| ·苹果叶片中ABA含量变化规律 | 第72页 |
| ·ABA含量与MAPK活性的关系 | 第72-73页 |
| ·水分胁迫下苹果抗氧化酶活性变化及与MAPK活性的关系 | 第73-77页 |
| ·水分胁迫下苹果根系中SOD活性变化规律 | 第73-74页 |
| ·水分胁迫下苹果根系中CAT活性变化规律 | 第74-75页 |
| ·水分胁迫下苹果根系中POD活性变化规律 | 第75页 |
| ·抗氧化酶活性变化与MAPK活性的关系 | 第75-77页 |
| ·水分胁迫下抑制剂对苹果蛋白激酶活性等的影响 | 第77-82页 |
| ·抑制剂对总激酶活性的影响 | 第77页 |
| ·抑制剂对MAPK活性的影响 | 第77-78页 |
| ·抑制剂对水分胁迫诱导的ABA合成的影响 | 第78-79页 |
| ·抑制剂对水分胁迫诱导的抗氧化酶活性的影响 | 第79-82页 |
| 4 讨论 | 第82-90页 |
| ·逆境胁迫与MAPK基因的表达调控 | 第82-84页 |
| ·水分胁迫下MAPK的信号转导作用 | 第84-90页 |
| ·MAPK的可逆磷酸化与水分胁迫下的信号转导 | 第84-85页 |
| ·水分胁迫下蛋白质可逆磷酸化与ABA合成的关系 | 第85-87页 |
| ·水分胁迫下蛋白质可逆磷酸化与抗氧化酶活性的关系 | 第87-90页 |
| 5 结论 | 第90-93页 |
| ·MaMAPK基因是MAPK基因的同源基因 | 第90页 |
| ·MaMAPK基因的表达受水分胁迫和蛋白质磷酸化的调控 | 第90页 |
| ·水分胁迫下MAPK的磷酸化启动了ABA的合成 | 第90-91页 |
| ·水分胁迫下MAPK的磷酸化激活了抗氧化酶类 | 第91页 |
| ·MAPK的可逆磷酸化同时介导水分胁迫、ABA和活性氧的信号转导 | 第91-93页 |
| 6 参考文献 | 第93-110页 |
| 7 附录 | 第110-112页 |
| 8 致谢 | 第112-113页 |
| 9 攻读学位期间发表论文情况 | 第113页 |
