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家蚕杆状病毒解旋酶基因启动子结构与功能分析及表达系统的应用

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-15页
第一章 文献综述第15-34页
 第一节 昆虫杆状病毒基因组分子结构研究进展第15-25页
  1. BmNPV基因组分析第16-17页
  2. BmNPV ORF与其它杆状病毒的比较第17-20页
   2.1 同源性第17-18页
   2.2 多样性第18-20页
    2.2.1 AcMNPV基因组中不存在的BmNPV ORF第18页
    2.2.2 与BmNPV基因组没有同源性的AcMNPV ORF第18-19页
    2.2.3 BmNPV缺少的其它杆状病毒的ORF第19-20页
  3. BmNPV编码的锌指序列或亮氨酸拉链序列第20-21页
  4. BmNPV和AcMNPV对应ORF的比较第21-25页
 第二节 杆状病毒DNA解旋酶的研究第25-34页
  1. 杆状病毒的分子生物学第25-27页
  2. DNA解旋酶的生物学特性第27-28页
  3. 杆状病毒解旋酶基因及其编码蛋白的分子结构第28-29页
  4. 杆状病毒DNA解旋酶的生物学功能第29-33页
   4.1 解旋酶对杆状病毒DNA复制的影响第29-30页
   4.2 杆状病毒解旋酶的酶学特性第30-31页
   4.3 解旋酶与杆状病毒的宿主域第31-32页
   4.4 杆状病毒解旋酶基因启动子功能第32-33页
  5. 结语第33-34页
第二章 材料和方法第34-49页
 第一节 材料第34-38页
 第二节 方法第38-49页
第三章 昆虫in vitro/in vivo瞬时表达体系的建立第49-61页
 第一节 材料和方法第50-51页
 第二节 结果第51-54页
  2.1 脂质体/DNA复合体的形成第51-52页
  2.2 转染条件的优化第52-53页
   2.2.1 DNA浓度第52页
   2.2.2 脂质体浓度第52-53页
  2.3 DDAB/DOPE脂质体与Lipofectin试剂对Sf-21细胞和家蚕幼虫的转染比较第53页
  2.4 DDAB/DOPE脂质体介导BmNPV DNA转移进Bm-5细胞第53-54页
 第三节 讨论第54-61页
第四章 家蚕核型多角体病毒解旋酶基因启动子的结构与功能第61-76页
 第一节 材料和方法第62-64页
  1.1 材料第62页
  1.2 方法第62-64页
 第二节 结果第64-67页
  2.1 BmNPV DNA解旋酶基因启动子的克隆与序列分析第64-65页
  2.2 BmNPV解旋酶基因启动子功能分析第65-67页
   2.2.1 功能质粒构建第65页
   2.2.2 BmNPV he1510启动子的基础活性第65-66页
   2.2.3 he1510启动子控制下的1uc基因表达时相第66页
   2.2.4 BmNPV解旋酶基因启动子区的缺失分析第66-67页
 第三节 讨论第67-76页
第五章 BmNPV同源区hr3增强子功能分析第76-88页
 第一节 材料和方法第78-79页
  1.1 材料第78页
  1.2 方法第78-79页
 第二节 结果第79-82页
  2.1 功能质粒的构建第79页
  2.2 hr3对BmNPV he1510启动子转录的增强作用第79-82页
   2.2.1 hr3对BmNPV he1510启动子在体外培养细胞中转录的增强作用第79-81页
   2.2.2 hr3对BmNPV he1510启动子在家蚕中体内瞬时表达的增强作用第81-82页
  2.3 hr3对he1510启动子控制下的荧光素酶基因表达时相的影响第82页
 第三节 讨论第82-88页
第六章 病毒因子对BmNPV解旋酶基因启动子的反式激活第88-97页
 第一节 材料和方法第89-90页
  1.1 材料第89-90页
  1.2 方法第90页
 第二节 结果第90-92页
  2.1 病毒因子对BmNPV he1510启动子的反式激活作用第90-91页
  2.2 病毒因子对BmNPV解旋酶基因启动子不同区段的激活作用第91页
  2.3 病毒因子对BmNPV极早期基因(ie-1)启动子没有激活作用第91-92页
 第三节 讨论第92-97页
第七章 杆状病毒宿主域决定的分子机理第97-116页
 第一节 材料和方法第99-100页
  1.1 材料第99页
  1.2 方法第99-100页
 第二节 结果第100-106页
  2.1 杂交病毒HyNPV的构建第100-101页
  2.2 病毒因子对BmNPV he1510启动子在体外培养细胞中转录的激活作用第101页
  2.3 BmNPV he1510启动子在家蚕幼虫中的瞬时表达第101-102页
  2.4 病毒因子对顺式连接hr3的解旋酶基因启动子的激活作用第102-104页
  2.5 杆状病毒宿主域决定的分子机理第104-106页
 第三节 讨论第106-116页
第八章 BmNPV在家蚕中经卵传递的研究第116-123页
 第一节 材料和方法第117-118页
 第二节 结果与讨论第118-123页
第九章 鸡贫血病毒Vp1和Vp2蛋白在家蚕中的联合表达第123-136页
 第一节 材料和方法第124-127页
  1.1 材料第124-125页
  1.2 方法第125-127页
 第二节 结果第127-129页
  2.1 含Vp1/Vp2基因的重组转移质粒的构建第127页
  2.2 重组杆状病毒的筛选和鉴定第127-128页
  2.3 免疫荧光反应显示在家蚕中表达的CAV Vp1和Vp2抗原第128页
  2.4 表达产物对鸡的安全性第128页
  2.5 表达产物对CAV感染鸡的保护性第128-129页
 第三节 讨论第129-136页
参考文献第136-155页
结论第155-157页
在学期间完成的论文第157-158页
致谢第158页

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