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甘蓝型油菜基因组文库的构建及筛选与硼高效基因相连锁的克隆

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
文献综述第7-16页
 1 植物基因组文库及基因的克隆第7-12页
   ·基因组文库的发展第7-8页
   ·植物基因的克隆第8页
   ·转座子标签法第8-9页
   ·图位克隆第9-12页
     ·图位克隆技术的原理第9页
     ·基因定位第9-10页
     ·物理图谱第10页
     ·目的基因的确定第10-11页
     ·图位克隆法在植物基因分离中的应用第11-12页
   ·展望第12页
 2 比较基因组第12-14页
   ·比较基因组第12-13页
   ·芸苔属作物的比较基因组研究第13-14页
 3 硼微量元素对油菜的影响第14页
 4 硼高效基因研究现状第14-15页
 5 目的和意义第15-16页
材料与方法第16-20页
 1 实验材料第16页
   ·植物材料第16页
   ·载体第16页
 2 实验方法第16-20页
   ·细胞核的分离第16-17页
   ·细胞核的包埋第17页
   ·载体的准备第17页
   ·植物总DNA的部分酶切第17页
   ·目的片段的回收第17页
   ·连接、转化和保存第17-18页
   ·BAC克隆片段大小的检测第18页
   ·BAC克隆稳定性检测第18页
   ·高密度文库膜的制备第18页
   ·探针的制备第18页
   ·探针标记及文库筛选第18-19页
   ·DNA酶切、转膜和阳性克隆的确证第19页
   ·BAC重叠群的构建第19页
   ·BAC亚克隆的获得第19页
   ·BAC亚克隆的测序第19页
   ·与拟南芥序列的比较第19-20页
结果与分析第20-26页
 1 甘蓝型油菜基因组文库的构建第20-22页
   ·植物总DNA部分酶切最佳条件的确定第20页
   ·文库的构建第20页
   ·片段检测第20-21页
   ·BAC克隆稳定性的检测第21-22页
 2 与硼高效基因连锁的克隆的筛选第22-25页
   ·文库筛选第22-23页
   ·克隆的进一步确认第23页
   ·与BE1相连锁克隆的筛选第23-24页
   ·重叠群的构建第24-25页
 3 与拟南芥序列的比较第25-26页
   ·BAC亚克隆的获得及测序第25页
   ·与拟南芥序列的比较第25页
   ·PA28、H3、H31、H32在拟南芥克隆F1M20上的定位分析第25-26页
讨论第26-29页
 1 载体的选择第26页
 2 高质量植物总DNA的提取第26页
 3 转化效率的影响因素第26-27页
 4 文库插入片段大小对文库筛选的影响第27页
 5 高密度文库膜的制备第27页
 6 探针的选择第27-28页
 7 比较基因组在甘蓝型油菜中的应用第28页
 8 BE1基因区的精细定位第28-29页
参考文献第29-38页
附录Ⅰ: 试剂和溶液的配方第38-40页
附录Ⅱ: 实验详细步骤第40-49页
致谢第49页

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