摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
文献综述 | 第7-16页 |
1 植物基因组文库及基因的克隆 | 第7-12页 |
·基因组文库的发展 | 第7-8页 |
·植物基因的克隆 | 第8页 |
·转座子标签法 | 第8-9页 |
·图位克隆 | 第9-12页 |
·图位克隆技术的原理 | 第9页 |
·基因定位 | 第9-10页 |
·物理图谱 | 第10页 |
·目的基因的确定 | 第10-11页 |
·图位克隆法在植物基因分离中的应用 | 第11-12页 |
·展望 | 第12页 |
2 比较基因组 | 第12-14页 |
·比较基因组 | 第12-13页 |
·芸苔属作物的比较基因组研究 | 第13-14页 |
3 硼微量元素对油菜的影响 | 第14页 |
4 硼高效基因研究现状 | 第14-15页 |
5 目的和意义 | 第15-16页 |
材料与方法 | 第16-20页 |
1 实验材料 | 第16页 |
·植物材料 | 第16页 |
·载体 | 第16页 |
2 实验方法 | 第16-20页 |
·细胞核的分离 | 第16-17页 |
·细胞核的包埋 | 第17页 |
·载体的准备 | 第17页 |
·植物总DNA的部分酶切 | 第17页 |
·目的片段的回收 | 第17页 |
·连接、转化和保存 | 第17-18页 |
·BAC克隆片段大小的检测 | 第18页 |
·BAC克隆稳定性检测 | 第18页 |
·高密度文库膜的制备 | 第18页 |
·探针的制备 | 第18页 |
·探针标记及文库筛选 | 第18-19页 |
·DNA酶切、转膜和阳性克隆的确证 | 第19页 |
·BAC重叠群的构建 | 第19页 |
·BAC亚克隆的获得 | 第19页 |
·BAC亚克隆的测序 | 第19页 |
·与拟南芥序列的比较 | 第19-20页 |
结果与分析 | 第20-26页 |
1 甘蓝型油菜基因组文库的构建 | 第20-22页 |
·植物总DNA部分酶切最佳条件的确定 | 第20页 |
·文库的构建 | 第20页 |
·片段检测 | 第20-21页 |
·BAC克隆稳定性的检测 | 第21-22页 |
2 与硼高效基因连锁的克隆的筛选 | 第22-25页 |
·文库筛选 | 第22-23页 |
·克隆的进一步确认 | 第23页 |
·与BE1相连锁克隆的筛选 | 第23-24页 |
·重叠群的构建 | 第24-25页 |
3 与拟南芥序列的比较 | 第25-26页 |
·BAC亚克隆的获得及测序 | 第25页 |
·与拟南芥序列的比较 | 第25页 |
·PA28、H3、H31、H32在拟南芥克隆F1M20上的定位分析 | 第25-26页 |
讨论 | 第26-29页 |
1 载体的选择 | 第26页 |
2 高质量植物总DNA的提取 | 第26页 |
3 转化效率的影响因素 | 第26-27页 |
4 文库插入片段大小对文库筛选的影响 | 第27页 |
5 高密度文库膜的制备 | 第27页 |
6 探针的选择 | 第27-28页 |
7 比较基因组在甘蓝型油菜中的应用 | 第28页 |
8 BE1基因区的精细定位 | 第28-29页 |
参考文献 | 第29-38页 |
附录Ⅰ: 试剂和溶液的配方 | 第38-40页 |
附录Ⅱ: 实验详细步骤 | 第40-49页 |
致谢 | 第49页 |