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单核细胞增生性李斯特菌快速检测技术研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-6页
目录第6-10页
第一章 文献综述第10-28页
   ·食品安全现状第10-11页
   ·单核细胞增生性李斯特菌的生物学分类及特征第11-13页
     ·形态与染色特性第11-12页
     ·培养特性第12页
     ·生化特性第12-13页
     ·血清型第13页
   ·单核细胞增生性李斯特菌的污染现状及危害第13-16页
     ·单核细胞增生性李斯特菌的食品污染现状第13页
     ·单核细胞增生性李斯特菌的重要感染事件第13-16页
   ·单核细胞增生性李斯特菌检测技术现状及进展第16-27页
     ·传统生物学分离培养与生化鉴定第16-17页
       ·选择性培养基分离培养及鉴定第16页
       ·显色培养基快速鉴定技术第16-17页
     ·免疫血清学检测技术第17-18页
       ·酶联免疫分析(ELISA)第17-18页
       ·胶体金免疫层析分析(GICA)第18页
     ·核酸探针杂交检测技术第18页
     ·变温扩增技术第18-22页
       ·PCR 及其衍生技术第18-22页
       ·连接酶链式反应(LCR)第22页
     ·等温扩增技术第22-23页
       ·环介导等温扩增(LAMP)第22页
       ·依赖核酸序列的扩增(NASBA)第22-23页
     ·全自动微生物检测系统第23-24页
       ·全自动微生物生化鉴定系统第23页
       ·全自动酶联免疫分析系统第23-24页
       ·分子生物学致病菌检测平台第24页
     ·生物芯片第24-25页
     ·电信号检测技术第25-26页
       ·生物传感器第25页
       ·电子鼻第25-26页
     ·色谱质谱分析第26页
     ·新型检测技术展望第26-27页
   ·研究目的与意义第27-28页
第二章 单核细胞增生性李斯特菌九种检测技术的比较研究第28-74页
   ·引言第28页
   ·材料与试剂第28-31页
     ·标准菌株、引物第28-29页
     ·试剂与缓冲液第29-30页
     ·仪器与设备第30-31页
   ·研究路线第31页
   ·七种常规方法与两种快速技术检测 LM第31-39页
     ·菌株的培养与计数、DNA 的提取第31-32页
       ·标准菌株的培养及平板计数第31-32页
       ·梯度菌液和模拟菌液的制备第32页
       ·细菌组总 DNA 的提取第32页
     ·脑心浸液培养基培养(BHA 平板培养)第32-33页
     ·李斯特显色培养基快速鉴定技术第33页
     ·Bacteria Direct-PCR第33-34页
       ·Bacteria Direct-PCR PCR 的优化第33页
       ·Bacteria Direct-PCR 灵敏度、模拟带菌实验第33-34页
     ·DNA Direct-PCR第34页
     ·Bio-PCR第34页
     ·SYBR Green Real time-PCR第34页
       ·SYBR Green Real time-PCR 的优化第34页
       ·SYBR Green Real time-PCR 灵敏度、模拟带菌实验第34页
     ·TaqMan Real time-PCR第34-35页
       ·TaqMan Real time-PCR 的优化第34页
       ·TaqMan Real time-PCR 标准曲线的建立第34-35页
       ·TaqMan Real time-PCR 灵敏度、模拟带菌实验第35页
     ·自制酶标抗体 TAS-ELISA第35-38页
       ·山羊抗兔 IgG 浓度的测定第35页
       ·戊二醛法制备 AP-羊抗兔 IgG第35页
       ·改良过碘酸钠氧化法制备 HRP-羊抗兔 IgG第35页
       ·两种酶标抗体检测效果比较第35-36页
       ·改良过碘酸钠法的优化及酶标抗体质量的鉴定第36-37页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 封闭液的优化第37页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 灵敏度实验、模拟带菌实验第37页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 特异性、干扰实验第37页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 重复性、稳定性测定第37页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 保存期实验第37-38页
       ·商业化酶标抗体 TAS-ELISA 灵敏度实验第38页
     ·IC-PCR第38-39页
       ·IC-PCR 操作流程第38页
       ·IC-PCR 的优化第38页
       ·IC-PCR 灵敏度、模拟带菌实验第38页
       ·IC-PCR 特异性、干扰实验第38-39页
   ·结果与分析第39-63页
     ·梯度菌液平板计数结果第39页
     ·脑心浸液培养基检测结果第39页
     ·显色培养基方法检测结果第39-42页
     ·Bacteria Direct-PCR 检测结果第42-44页
       ·Bacteria Direct-PCR 反应体系及条件的确定第42-44页
       ·Bacteria Direct-PCR 灵敏度、模拟带菌实验结果第44页
     ·DNA Direct-PCR 检测结果第44页
     ·Bio-PCR 检测结果第44页
     ·SYBR Green Real time-PCR 检测结果第44-50页
       ·SYBR Green Real time-PCR 反应体系的确定第44页
       ·SYBR Green Realtime-PCR 灵敏度、模拟带菌实验结果第44-50页
     ·TaqMan Realtime-PCR 检测结果第50-52页
       ·TaqMan Realtime-PCR 反应体系及条件的确定第50页
       ·TaqMan Realtime-PCR 标准曲线的建立第50页
       ·TaqMan Realtime-PCR 灵敏度、模拟带菌实验结果第50-52页
     ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 检测结果第52-57页
       ·山羊抗兔 IgG 浓度的测定结果第52页
       ·AP-IgG、HRP-IgG 的比较第52页
       ·改良过碘酸钠法优化实验酶标抗体质量的鉴定第52-54页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 最优封闭液的确定第54页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 灵敏度、模拟带菌实验结果第54-55页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 特异性、干扰实验结果第55页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 重复性实验结果第55-56页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 保存期实验结果第56页
       ·自制酶标抗体 TAS-ELISA 检测成本、检测周期第56页
       ·与商业化酶标抗体 TAS-ELISA 相比较第56-57页
     ·IC-PCR 检测结果第57-63页
       ·IC-PCR 反应体系及条件的确定第57-58页
       ·IC-PCR 灵敏度实验、模拟带菌实验结果第58-60页
       ·IC-PCR 特异性、干扰实验结果第60-63页
   ·多种检测技术的比较第63-66页
     ·检测灵敏度比较第63页
     ·检测特异性比较第63-64页
     ·检测周期比较第64-65页
     ·检测成本比较第65-66页
   ·讨论第66-73页
     ·BHA 培养第66-67页
     ·李斯特显色培养基第67页
     ·Bacteria Direct-PCR第67页
     ·DNA Direct-PCR第67页
     ·Bio-PCR第67-68页
     ·SYBR Green Real time-PCR第68页
     ·TaqMan Real time-PCR第68页
     ·自制酶标抗体 TAS-ELISA第68-70页
     ·IC-PCR第70-72页
     ·生猪肉中检测灵敏度低的问题第72-73页
   ·结论第73-74页
参考文献第74-80页
缩略词表第80-81页
致谢第81-82页
个人简介第82-83页
导师简介第83-84页

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