| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| 1 水稻白叶枯病研究进展 | 第11-12页 |
| ·水稻白叶枯病 | 第11页 |
| ·水稻白叶枯病抗性基因的鉴定 | 第11页 |
| ·水稻—白叶枯病菌互作基因研究 | 第11-12页 |
| 2 OsBTF3 基因研究进展 | 第12-14页 |
| 3 植物启动子概述 | 第14-21页 |
| ·启动子结构特征 | 第14-15页 |
| ·启动子分类 | 第15-16页 |
| ·启动子序列克隆方法 | 第16-17页 |
| ·启动子功能分析方法 | 第17-21页 |
| ·植物启动子的应用 | 第21页 |
| 4 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第23-40页 |
| 1 供试材料 | 第23-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·供试植株 | 第23页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第23页 |
| ·引物设计 | 第23-25页 |
| ·常用缓冲液的配制 | 第25页 |
| 2. 实验方法 | 第25-40页 |
| ·植物启动子顺式作用元件在线分析网站 | 第25页 |
| ·原生质体转化 W5 溶液对水稻白叶枯病菌生长及致病性的影响 | 第25-27页 |
| ·水稻幼叶总 DNA 提取 | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增启动子 OsBTF3 全长及 5’端缺失基因片段 | 第28-29页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第29页 |
| ·pMD18-T 载体与目的片段的连接 | 第29页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 DH5α | 第29-30页 |
| ·重组质粒的提取与验证 | 第30-31页 |
| ·瞬时表达载体的构建与鉴定 | 第31-32页 |
| ·瞬时表达载体的大量提取 | 第32-33页 |
| ·拟南芥原生质体的分离与转化 | 第33-34页 |
| ·病原菌 Xoo 诱导拟南芥原生质体 | 第34-37页 |
| ·ABA 诱导拟南芥原生质体 | 第37-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-62页 |
| 1 植物启动子顺式作用元件分析 | 第40页 |
| 2 原生质体转化系统 W5 溶液对水稻白叶枯病菌生长及致病性的影响 | 第40-42页 |
| ·W5 溶液对病原菌 Xoo 生长活性的影响 | 第41页 |
| ·W5 溶液对病原菌致病性的影响 | 第41-42页 |
| 3 启动子 OsBTF3 全长及 5’端缺失基因片段的 PCR 扩增 | 第42-46页 |
| ·启动子全长基因的 PCR 扩增 | 第42-43页 |
| ·病原菌 Xoo 诱导的启动子 5’端缺失片段的 PCR 扩增 | 第43-45页 |
| ·ABA 诱导的启动子 5’端缺失片段的 PCR 扩增 | 第45-46页 |
| 4 启动子 OsBTF3 全长及 5’端缺失片段的克隆 | 第46-49页 |
| ·启动子全长的克隆 | 第46-47页 |
| ·病原菌 Xoo 诱导的启动子 5’端缺失片段的克隆 | 第47-49页 |
| ·ABA 诱导的启动子 5’端缺失片段的克隆 | 第49页 |
| 5 瞬时表达载体的构建 | 第49-52页 |
| ·启动子 OsBTF3 全长基因瞬时表达载体的构建 | 第49-50页 |
| ·病原菌 Xoo 诱导的启动子 5’端缺失片段瞬时表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·ABA 诱导的启动子 5’端缺失片段瞬时表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 6 拟南芥原生质体的分离与转化 | 第52页 |
| 7 病原菌 Xoo 诱导拟南芥原生质体 | 第52-57页 |
| ·病原菌 Xoo 诱导拟南芥原生质体的最适浓度及时间 | 第52-53页 |
| ·启动子 OsBTF3 基因中受病原菌 Xoo 诱导的调控元件 | 第53-54页 |
| ·调控元件保守位点的点突变 | 第54-55页 |
| ·CCD 成像验证调控元件功能 | 第55-56页 |
| ·其他病原菌对启动子 OsBTF3 的诱导 | 第56-57页 |
| 8 ABA 诱导拟南芥原生质体 | 第57-62页 |
| ·ABA 诱导拟南芥原生质体的最适浓度及时间 | 第57-58页 |
| ·启动子 OsBTF3 基因中受病原菌 Xoo 诱导的调控元件 | 第58-59页 |
| ·调控元件保守位点的点突变 | 第59-60页 |
| ·CCD 成像验证调控元件功能 | 第60-62页 |
| 第四章 问题与讨论 | 第62-66页 |
| 1 启动子 OsBTF3 调控元件的功能分析 | 第62-63页 |
| 2 原生质体瞬时表达体系的选择 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 附录 1 缩写词与中英文对照 | 第70-72页 |
| 附录 2 所用主要试剂及缓冲液的配制方法 | 第72-74页 |
| 附录 3 载体图谱 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
