摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
英文缩写词表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-29页 |
引言 | 第12-13页 |
1 黄绿青霉素的研究概况 | 第13-23页 |
·黄绿青霉菌的生长及其毒素的产生 | 第13-15页 |
·CIT的理化性质 | 第15-16页 |
·CIT的毒理作用与代谢 | 第16-18页 |
·CIT的提取方法及检测技术 | 第18-23页 |
·CIT的提取及纯化 | 第18页 |
·CIT的检测方法 | 第18-23页 |
·薄层色谱法 | 第19-21页 |
·高效液相色谱法 | 第21-22页 |
·气相色谱法 | 第22页 |
·酶联免疫吸附法 | 第22-23页 |
2 抗体技术在检测体系中的应用 | 第23-26页 |
·多克隆抗体 | 第23-24页 |
·单克隆抗体 | 第24-26页 |
·基因工程抗体 | 第26页 |
3 预防毒素污染及中毒的可行性控制措施 | 第26-27页 |
4 本研究的目的及意义 | 第27-29页 |
第二章 黄绿青霉素人工免疫抗原的制备与鉴定 | 第29-40页 |
引言 | 第29页 |
1 材料 | 第29-30页 |
·实验材料与试剂 | 第29页 |
·实验仪器设备 | 第29-30页 |
·主要缓冲溶液的配置(见附录) | 第30页 |
2 实验方法 | 第30-34页 |
·过碘酸盐氧化法制备人工抗原 | 第30-31页 |
·偶联产物的透析 | 第31-32页 |
·人工免疫抗原的鉴定 | 第32-34页 |
·BCA 法蛋白浓度的测定 | 第32页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定人工免疫抗原 | 第32-33页 |
·紫外光谱扫描仪检测偶联产物 | 第33-34页 |
·红外光谱扫描仪检测偶联产物 | 第34页 |
3 实验结果与分析 | 第34-39页 |
·人工免疫抗原浓度的测定 | 第34-35页 |
·人工免疫抗原的扫描检测 | 第35-39页 |
·人工免疫抗原紫外光谱扫描检测 | 第35-36页 |
·人工免疫抗原红外光谱扫描检测 | 第36-38页 |
·人工免疫抗原SDS-PAGE检测 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-40页 |
第三章 抗CIT抗体的制备及ELISA免疫学方法的建立 | 第40-54页 |
引言 | 第40页 |
1 材料 | 第40-41页 |
·实验材料与试剂 | 第40-41页 |
·实验仪器设备 | 第41页 |
·主要缓冲溶液的配置(见附录) | 第41页 |
2 实验方法 | 第41-46页 |
·BALB/c 小鼠的处理及免疫途径 | 第41页 |
·抗血清效价的测定 | 第41-44页 |
·最佳酶标二抗浓度的分析 | 第42页 |
·最佳包被抗原CIT-KLH浓度的测定(方阵法) | 第42-43页 |
·甲醇对ELISA的影响 | 第43页 |
·小鼠血清效价的测定 | 第43-44页 |
·抗CIT血清灵敏度的测定 | 第44-45页 |
·抗CIT交叉反应率的测定 | 第45-46页 |
3 结果与分析 | 第46-52页 |
·间接非竞争 ELISA 确定最佳羊抗鼠-HRP 酶标二抗 | 第46-47页 |
·最佳包被抗原和抗血清工作浓度的选择 | 第47页 |
·甲醇浓度对 ELISA 的影响 | 第47-48页 |
·血清效价的测定 | 第48-50页 |
·抗 CIT血清灵敏度分析 | 第50页 |
·抗 CIT血清特异性分析 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
·免疫动物的选择 | 第52页 |
·BALB/c 小鼠的免疫 | 第52页 |
·人工完全抗原的制备 | 第52-54页 |
第四章 CIT的加标回收及抗体在实际体系中的应用 | 第54-61页 |
引言 | 第54页 |
1 材料 | 第54-55页 |
·实验材料与试剂 | 第54页 |
·实验仪器设备 | 第54-55页 |
·主要缓冲溶液的配置(见附录) | 第55页 |
2 实验方法 | 第55-57页 |
·ELISA 标准曲线的建立 | 第55-56页 |
·加标回收率和变异系数的测定 | 第56-57页 |
·CIT标准品的添加 | 第56页 |
·CIT的提取 | 第56页 |
·CIT的 HPLC 检测 | 第56-57页 |
·回收率和变异系数的测定 | 第57页 |
3 实验结果与分析 | 第57-60页 |
·ELISA 标准曲线的建立 | 第57-58页 |
·样品中 CIT的提取及检测 | 第58-59页 |
·添加 CIT回收率及变异系数的测定 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-61页 |
第五章 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
附录 | 第70-74页 |
附录 1 试剂配制 | 第70-72页 |
附录 2 图表 | 第72-74页 |