摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
·青蒿素与疟疾 | 第11-15页 |
·疟疾介绍 | 第11页 |
·青蒿素介绍 | 第11-13页 |
·黄花蒿介绍 | 第13-14页 |
·黄花蒿腺毛体-青蒿素合成、分泌、存储的场所 | 第14-15页 |
·黄花蒿中的部分次生代谢产物分析 | 第15-16页 |
·青蒿素衍生物 | 第15页 |
·黄花蒿中挥发性次生代谢产物 | 第15页 |
·黄花蒿中的非挥发性次生代谢产物 | 第15-16页 |
·黄花蒿中几种次生代谢产物的化学结构式 | 第16页 |
·青蒿素生物合成代谢途径 | 第16-22页 |
·青蒿素生物合成上游途径(MVA和MEP途径) | 第16-18页 |
·青蒿素生物合成下游途径 | 第18-19页 |
·黄花蒿中已获得的转基因成果 | 第19-22页 |
·影响黄花蒿中青蒿素含量的因素 | 第22-25页 |
第二章 绪论 | 第25-29页 |
·研究的目的和意义 | 第25-26页 |
·研究的内容和范围 | 第26页 |
·本研究的技术路线 | 第26-29页 |
第三章 LBA4404-pCAMBIA1304~+cyp71av1-cpr高效植物表达载体的构建 | 第29-39页 |
·实验材料及试剂 | 第29-30页 |
·植物材料 | 第29页 |
·菌株和质粒 | 第29页 |
·仪器设备 | 第29页 |
·试剂及试剂盒 | 第29-30页 |
·常规实验方法和步骤 | 第30-34页 |
·总RNA的提取与检测 | 第30-31页 |
·目的条带的回收 | 第31页 |
·连接反应 | 第31页 |
·CaCl_2法制备大肠杆菌DH5α感受态细胞的 | 第31-32页 |
·连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第32页 |
·质粒的提取 | 第32-33页 |
·重组子的鉴定、测序 | 第33页 |
·农杆菌LBA4404感受态的制备(CaCl_2法) | 第33页 |
·重组质粒转化感受态农杆菌 | 第33-34页 |
·RNA反转录成cDNA | 第34页 |
·pCAMBIA1304~+-cyp71av1-cpr高效植物表达载体的构建及工程菌的获得 | 第34-39页 |
·植物总RNA提取 | 第34-35页 |
·引物设计 | 第35页 |
·pCAMBIA1304~+构建 | 第35-36页 |
·pCAMBIA1304~+cyp71av1-cpr载体构建 | 第36-38页 |
·农杆菌工程菌的获得 | 第38-39页 |
第四章 转基因黄花蒿的获得及分析 | 第39-53页 |
·实验材料和常规方法步骤 | 第39-40页 |
·实验材料及仪器设备 | 第39页 |
·常规方法及步骤 | 第39-40页 |
·工程菌遗传转化黄花蒿 | 第40-42页 |
·黄花蒿无菌苗的获得 | 第40页 |
·工程菌两次活化 | 第40-41页 |
·工程菌侵染黄花蒿 | 第41页 |
·暗培养 | 第41页 |
·抗性筛选培养 | 第41页 |
·生根培养 | 第41页 |
·黄花蒿炼苗 | 第41页 |
·黄花蒿田间试验 | 第41-42页 |
·转基因黄花蒿鉴定 | 第42-43页 |
·青蒿素含量测定 | 第43页 |
·青蒿素提取 | 第43页 |
·HPLC-ELSD测定青蒿素含量 | 第43页 |
·荧光定量PCR测定cyp71av1、cpr和β-actin基因的表达量 | 第43-45页 |
·结果与分析 | 第45-50页 |
·转基因黄花蒿的检测和鉴定 | 第45页 |
·LBA4404-pCAMBIA13O4~+-cyp71av1-cpr对黄花蒿的遗传转化 | 第45-46页 |
·转cyp71av1和cpr基因黄花蒿青蒿素含量分析 | 第46-48页 |
·cyp71av1和cpr基因表达量分析 | 第48-50页 |
·结论和展望 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录 | 第57-63页 |
附录A:实验室常用培养基和抗生素配置 | 第57-59页 |
附录B:发表论文情况 | 第59-61页 |
附录C:缩略词 | 第61-63页 |
致谢 | 第63页 |