| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| ·研究问题的由来 | 第10页 |
| ·丙酮酸脱氢酶激酶概述 | 第10-13页 |
| ·丙酮酸脱氢酶复合体 | 第10-12页 |
| ·丙酮酸脱氢酶激酶家族 | 第12-13页 |
| ·丙酮酸脱氢酶激酶调节机制 | 第13页 |
| ·丙酮酸脱氢酶激酶4 | 第13-15页 |
| ·PDK4概述 | 第13-14页 |
| ·PDK4调节机制 | 第14-15页 |
| ·PDK4与临床疾病的研究 | 第15页 |
| ·猪PDK4基因研究现状 | 第15-16页 |
| 第二章 引言 | 第16-18页 |
| 第三章 材料与方法 | 第18-34页 |
| ·实验材料 | 第18-22页 |
| ·DNA与RNA样品 | 第18页 |
| ·主要仪器与设备 | 第18-19页 |
| ·主要试剂、试剂盒 | 第19-20页 |
| ·常用试剂及其配制 | 第20-21页 |
| ·常用生物信息学网站和分析软件 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-34页 |
| ·总RNA的提取及cDNA的制备、检测 | 第22-24页 |
| ·基因组织表达荧光定量分析 | 第24-25页 |
| ·猪基因组DNA的提取及浓度纯度测定 | 第25-26页 |
| ·PDK4基因启动子5’缺失载体的设计 | 第26-28页 |
| ·目的基因启动子的克隆 | 第28-29页 |
| ·启动子产物的纯化、克隆、鉴定和测序 | 第29-30页 |
| ·细胞培养及转染 | 第30-32页 |
| ·荧光素酶活性测定 | 第32-34页 |
| 第四章 结果与分析 | 第34-44页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第34页 |
| ·总RNA的提取及cDNA的制备、检测 | 第34-36页 |
| ·总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·cDNA的制备与检测 | 第35-36页 |
| ·猪PDK4基因的组织表达分析 | 第36页 |
| ·猪PDK4基因TATA盒和CPG岛的预测 | 第36-37页 |
| ·PDK4基因启动子序列调控元件预测 | 第37-39页 |
| ·猪PDK4基因启动子重组载体的构建 | 第39页 |
| ·PDK4启动子5’缺失载体转染MEF-3T3细胞后的荧光素活性分析 | 第39-40页 |
| ·PDK4启动子5’缺失载体转染PK15细胞后的荧光素活性分析 | 第40-41页 |
| ·供猪PDK4基因缺失启动子活性定量研究的细胞系筛选 | 第41-44页 |
| 第五章 讨论 | 第44-50页 |
| ·PDK4组织表达分析 | 第44页 |
| ·载体的构建 | 第44页 |
| ·瞬时转染 | 第44-46页 |
| ·影响转染效率因素的优化 | 第45页 |
| ·转染方法的选择 | 第45-46页 |
| ·荧光素酶活性测定的优化 | 第46页 |
| ·转染细胞的选择 | 第46页 |
| ·转录因子分析 | 第46-50页 |
| ·C/EBPβ转录因子 | 第46-47页 |
| ·SP1转录因子 | 第47页 |
| ·MyoD转录因子 | 第47-48页 |
| ·MEF2转录因子 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 发表论文及参加课题一览表 | 第62页 |
