| 内容提要 | 第1-8页 |
| 1 前言 | 第8-21页 |
| ·细胞色素P450 酶 | 第8-14页 |
| ·细胞色素P450 多态性及其在药物不良反应中的作用 | 第8-10页 |
| ·CYP2C9 基因多态性及其对药物代谢的影响 | 第10-13页 |
| ·P450 还原酶 | 第13-14页 |
| ·杆状病毒介导的昆虫细胞表达体系 | 第14-17页 |
| ·转染试剂：PEI | 第17-19页 |
| ·论文设计思路 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-49页 |
| ·试剂和仪器 | 第21-27页 |
| ·试剂 | 第21-23页 |
| ·溶液的配制 | 第23-26页 |
| ·仪器 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-49页 |
| ·表达质粒的构建 | 第27-38页 |
| ·P450 还原酶cDNA的克隆 | 第27-31页 |
| ·pGEMT Easy-CPR的构建 | 第31-33页 |
| ·CPR定点缺失诱变（回复突变） | 第33-35页 |
| ·pFastBacDual-CPR的构建 | 第35页 |
| ·pFastBacDual-CPR-CYP2C9 的构建 | 第35-36页 |
| ·pFastBac-CYP2C9 的构建 | 第36页 |
| ·Bacmid-CPR/CYP2C9 的构建 | 第36-38页 |
| ·细胞色素还原酶、野生型CYP2C9*1 及其突变体CYP2C9*3 和CYP2C9*13 的表达及其活力测定 | 第38-49页 |
| ·细胞培养 | 第38-39页 |
| ·转染 | 第39-40页 |
| ·病毒扩增 | 第40-41页 |
| ·病毒滴度噬斑测定 | 第41-43页 |
| ·高MOI感染蛋白表达 | 第43页 |
| ·S9 组分制备 | 第43-44页 |
| ·CO相差分光光度法测P450 含量 | 第44-45页 |
| ·免疫印迹分析 | 第45-46页 |
| ·CYP2C9 对双氯芬酸酶活测定 | 第46-49页 |
| 3 结果与讨论 | 第49-67页 |
| ·表达质粒的构建 | 第49-51页 |
| ·细胞色素P450 还原酶、野生型CYP2C9*1 及其突变体CYP2C9*3 和CYP2C9*13 的表达及其活力测定 | 第51-63页 |
| ·转染条件优化 | 第51-52页 |
| ·病毒扩增 | 第52-54页 |
| ·高MOI感染蛋白表达 | 第54-55页 |
| ·S9 组分制备 | 第55页 |
| ·CO相差分光光度法测P450 含量 | 第55-57页 |
| ·免疫印迹分析 | 第57-58页 |
| ·CYP2C9 对双氯芬酸酶活测定 | 第58-63页 |
| ·CPR酶活测定 | 第58-59页 |
| ·CYP2C9、CPR和质膜的重建及CPR加入量对酶反应的影响 | 第59-61页 |
| ·最适酶液加入量 | 第61页 |
| ·CYP2C9*1，*3，*13 对双氯芬酸酶活测定 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 中文摘要 | 第74-77页 |
| Abstract | 第77-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
