| 内容提要 | 第1-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-40页 |
| 第一节 RNA 干扰简介 | 第10-24页 |
| 一、RNA 干扰作用简史 | 第10页 |
| 二、相关术语 | 第10-12页 |
| 三、哺乳动物中的RNA 干扰 | 第12-13页 |
| 四、RNA 干扰作用机制 | 第13-17页 |
| 五、靶向递程siRNA | 第17-18页 |
| 六、RNAi 技术的应用 | 第18-24页 |
| 第二节 细胞凋亡 | 第24-32页 |
| 一、细胞凋亡的概念 | 第24页 |
| 二、细胞凋亡的研究历史 | 第24-25页 |
| 三、细胞凋亡的形态学特征 | 第25-26页 |
| 四、细胞凋亡的生化特征 | 第26页 |
| 五、细胞凋亡与坏死的区别 | 第26-28页 |
| 六、细胞凋亡的过程及机理 | 第28-30页 |
| 七、氧化压力与细胞凋亡 | 第30-31页 |
| 八、细胞凋亡与人类疾病 | 第31-32页 |
| 第三节 APX模拟酶简介 | 第32-39页 |
| 一、抗氧化损伤研究 | 第32-37页 |
| 二、抗坏血酸过氧化物酶 | 第37-38页 |
| 三、DhHP-6 | 第38-39页 |
| 第四节 本论文的选题及设计思路 | 第39-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-65页 |
| 第一节 HeLa细胞Survivin基因的RNA干扰 | 第40-58页 |
| 一、材料与试剂 | 第40-44页 |
| （一） 材料 | 第40-41页 |
| （二） 主要试剂的配置 | 第41-44页 |
| 二、主要仪器及设备 | 第44-45页 |
| 三、实验方法 | 第45-58页 |
| （一） RNAi 实验原理与方法 | 第45-46页 |
| （二） Survivin基因干扰序列的确定 | 第46-48页 |
| （三） RNA干扰质粒的构建 | 第48-50页 |
| （四） 细胞培养与转染 | 第50-51页 |
| （五） RNA干扰效果检测 | 第51-57页 |
| （六） 细胞凋亡的检测 | 第57-58页 |
| 第二节 DhHP-6抗氧化损伤的研究 | 第58-65页 |
| 一、材料与方法 | 第58-60页 |
| （一） 材料 | 第58-59页 |
| （二） 主要试剂的配置 | 第59-60页 |
| 二、主要仪器及设备 | 第60页 |
| 三、实验方法 | 第60-65页 |
| （一） DhHP-6体外酶学性质的测定 | 第60-61页 |
| （二） DhHP-6进入细胞能力的测定 | 第61页 |
| （三） DhHP-6 抗氧化损伤作用的研究 | 第61-65页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第65-102页 |
| 第一节 RNAi下调survivin表达诱导HeLa细胞凋亡 | 第65-78页 |
| 一、Survivin基因RNA干扰序列选择和质粒构建 | 第65-68页 |
| （一） 序列选择 | 第65-68页 |
| 二、Survivin基因RNA干扰效果的测定 | 第68-71页 |
| （一） RT-PCR检测结果 | 第68-69页 |
| （二） 实时定量PCR检测结果 | 第69页 |
| （三） Western Blot检测结果 | 第69-71页 |
| 三、Survivin基因被调低后引发的细胞凋亡的检测 | 第71-77页 |
| （一） caspase-3活力检测结果 | 第71-72页 |
| （二） 流式细胞仪检测结果 | 第72-75页 |
| （三） p53基因RT-PCR检测结果 | 第75-77页 |
| 四、讨论 | 第77-78页 |
| 第二节 DhHP-6抗氧化损伤作用的研究 | 第78-102页 |
| 一、DhHP-6的合成及活性的测定 | 第78-80页 |
| （一） DhHP-6的设计与合成 | 第78-79页 |
| （二） DhHP-6活性测定 | 第79-80页 |
| 二、DhHP-6最适反应条件的探索 | 第80-82页 |
| （一） 最适反应pH和温度的测定 | 第80-81页 |
| （二） DhHP-6稳定性的测定 | 第81-82页 |
| 三、DhHP-6迅速渗透进细胞并在细胞内有效清除H202 | 第82-85页 |
| （一） 不同浓度DhHP-6进入细胞量的测定 | 第82-83页 |
| （二） 不同时间DhHP-6进入细胞量的测定 | 第83-84页 |
| （三） DhHP-6清除细胞内H202的检测 | 第84-85页 |
| 四、DhHP-6抗过氧化物引发的细胞凋亡 | 第85-100页 |
| （一） 过氧化损伤模型的建立 | 第85-87页 |
| （二） DhHP-6抗氧化损伤效果的测定 | 第87-92页 |
| （三） DhHP-6对H202-诱导的细胞凋亡的保护作用 | 第92-100页 |
| 五、讨论 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-115页 |
| 中文摘要 | 第115-118页 |
| 英文摘要 | 第118-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
