中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
引言 | 第12-32页 |
一、核酸疫苗研究进展 | 第12-21页 |
1. 核酸疫苗的历史 | 第12页 |
2. 核酸疫苗的结构 | 第12-13页 |
3. 核酸疫苗的作用机理 | 第13-16页 |
4. 核酸疫苗的优点及不足 | 第16-17页 |
·核酸疫苗的优点 | 第16-17页 |
·核酸疫苗的不足 | 第17页 |
5. 影响核酸疫苗免疫效果的因素 | 第17-20页 |
·从优选择目的基因 | 第18页 |
·获得外源基因在机体内的高效表达 | 第18-19页 |
·接种前组织预处理 | 第19页 |
·基因疫苗导入方法 | 第19-20页 |
6. 增强 DNA 疫苗免疫效果的策略 | 第20-21页 |
·CpG DNA (ODN)佐剂 | 第20-21页 |
·细胞因子佐剂 | 第21页 |
二、补体 C3d 研究进展 | 第21-27页 |
1. C3d 的分子结构 | 第22-23页 |
2. C3d 的分子佐剂作用 | 第23-26页 |
3. C3d 的可能的作用机制 | 第26-27页 |
·促进 CR2~+细胞对与 C3d 偶联抗原的摄取 | 第26页 |
·利于抗原向次级淋巴组织的运输 | 第26页 |
·促进膜分子 B7 的表达 | 第26页 |
·降低 B 细胞的活化阈值 | 第26-27页 |
·利于生发中心的形成 | 第27页 |
·促进抗体亲和力成熟和记忆性 B 淋巴细胞的形成 | 第27页 |
三、鸡新城疫病毒F 基因分子生物学特征 | 第27-30页 |
四、新城疫F 基因疫苗 | 第30-31页 |
五、本研究的目的及意义 | 第31-32页 |
试验一、AA 肉鸡补体 C3d cDNA 的克隆 | 第32-42页 |
1 材料和方法 | 第32-38页 |
·材料 | 第32-34页 |
·菌株 | 第32页 |
·载体 | 第32-33页 |
·试剂及试剂盒 | 第33页 |
·试剂动物 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·试验所用溶液及其配制 | 第33-34页 |
·RT-PCR 相关物品的处理 | 第34页 |
·方法 | 第34-38页 |
·鸡肝脏总RNA 的提取 | 第34-35页 |
·引物设计 | 第35页 |
·RT- PCR 扩增 C3d cDNA | 第35-36页 |
·制作感受态细胞 | 第36-37页 |
·PCR 产物与pMD18-T 的连接 | 第37页 |
·连接物的转化 | 第37页 |
·重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
·测定 | 第38页 |
2 结果 | 第38-40页 |
·RT-PCR 扩增C3d cDNA,及其PCR、酶切鉴定 | 第38-39页 |
·AA 肉鸡C3d cDNA 的测序及序列分析 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
试验二、新城疫C3d-P29 分子佐剂F 基因疫苗的构建 | 第42-58页 |
1 材料和方法 | 第42-50页 |
·试验材料 | 第42-43页 |
·方法 | 第43-50页 |
·P29 串联体的构建 | 第43-46页 |
·pCDNA-P29.n(n=2,4,6)的构建 | 第46页 |
·RT-PCR 扩增新城疫(LaSota 株)F 基因 | 第46-47页 |
·插入抗原基因 | 第47-49页 |
·新城疫 C3d-P29 分子佐剂 F 基因疫苗效力检测 | 第49-50页 |
2 结果 | 第50-55页 |
·新城疫C3d-P29 分子佐剂F 基因疫苗的构建原理 | 第50-51页 |
·构建P29 串联体 | 第51-53页 |
·RT-PCR 扩增新城疫La Sota 株F 基因 | 第53-54页 |
·抗原基因的插入 | 第54页 |
·血凝抑制抗体变化 | 第54-55页 |
·攻毒保护试验结果 | 第55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
个人简介 | 第72-73页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第73页 |