中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
引言 | 第12-29页 |
1. 病原学 | 第12-19页 |
·胸膜肺炎放线杆菌的概述 | 第12页 |
·胸膜肺炎放线杆菌的病原特性 | 第12-13页 |
·胸膜肺炎放线杆菌的血清型 | 第13-14页 |
·胸膜肺炎放线杆菌的毒力因子 | 第14-19页 |
·溶血毒素 | 第14-15页 |
·荚膜多糖 | 第15-16页 |
·脂多糖 | 第16-17页 |
·外膜蛋白 | 第17页 |
·转铁结合蛋白 | 第17-18页 |
·酶类 | 第18-19页 |
·粘附因子 | 第19页 |
2. 流行病学 | 第19-21页 |
3. 临床症状与病理变化 | 第21-23页 |
·临床症状 | 第21-22页 |
·病理变化 | 第22-23页 |
4. 预防控制 | 第23-27页 |
·加强饲养管理 | 第23页 |
·药物控制 | 第23-24页 |
·免疫预防 | 第24-27页 |
·灭活疫苗 | 第24页 |
·亚单位疫苗 | 第24-25页 |
·弱毒疫苗 | 第25-26页 |
·ghost 疫苗 | 第26-27页 |
·口服疫苗 | 第27页 |
5 展望 | 第27-29页 |
试验一 猪胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素的克隆与表达 | 第29-44页 |
1 材料与方法 | 第29-39页 |
·材料 | 第29-30页 |
·试剂与仪器 | 第29-30页 |
·菌株 | 第30页 |
·溶血毒素A 基因的引物设计 | 第30页 |
·溶血毒素A 基因的克隆与转化 | 第30-33页 |
·细菌的培养 | 第30-31页 |
·基因组DNA 的提取 | 第31页 |
·PCR 扩增溶血毒素 A 基因 | 第31页 |
·PCR 产物的回收、连接、转化 | 第31-33页 |
·重组质粒的酶切 | 第33页 |
·目的片断和载体的酶切、电泳及回收 | 第33-34页 |
·目的片断与pGEX-5X-3 的酶切 | 第33-34页 |
·酶切产物的电泳及回收 | 第34页 |
·DNA 的连接与转化 | 第34-35页 |
·质粒DNA 的提取与酶切 | 第35-36页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第36页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36-38页 |
·电泳样品的制备 | 第36页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第36-38页 |
·表达产物的 Western-blotting 检测 | 第38-39页 |
2 结果 | 第39-43页 |
·不同溶血毒素 A 基因 PCR 扩增结果 | 第39页 |
·不同溶血毒素 A 基因序列分析 | 第39-40页 |
·不同溶血毒素 A 基因双酶切结果 | 第40-41页 |
·不同诱导时间表达产物的含量 | 第41页 |
·表达产物免疫原性检测 | 第41-43页 |
3. 讨论 | 第43-44页 |
试验二 APP 溶血毒素表达产物的纯化及对小鼠免疫保护性研究 | 第44-60页 |
1材料与方法 | 第44-48页 |
·菌株 | 第44页 |
·试剂及仪器 | 第44页 |
·实验动物 | 第44-45页 |
·重组蛋白的纯化 | 第45-46页 |
·重组蛋白的表达 | 第45页 |
·硫酸铵盐析 | 第45页 |
·重组蛋白的透析与浓缩 | 第45页 |
·Sephadex G-200 凝胶过滤层析 | 第45-46页 |
·重组蛋白浓度的测定 | 第46页 |
·亚单位疫苗的制备 | 第46-47页 |
·动物分组与免疫 | 第47页 |
·病理学检查 | 第47-48页 |
·临床病理变化观察 | 第47页 |
·病理组织学观察 | 第47-48页 |
2 结果 | 第48-58页 |
·硫酸铵盐析 | 第48页 |
·Sephadex G-200 凝胶过滤层析 | 第48-49页 |
·蛋白质纯度的鉴定 | 第49-50页 |
·临床症状与剖检变化 | 第50-53页 |
·病理组织学变化 | 第53-58页 |
3 讨论 | 第58-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
攻读硕士期间发表的论文情况 | 第72页 |