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猪胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素的克隆表达及表达产物对小白鼠的免疫保护性研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
引言第12-29页
 1. 病原学第12-19页
   ·胸膜肺炎放线杆菌的概述第12页
   ·胸膜肺炎放线杆菌的病原特性第12-13页
   ·胸膜肺炎放线杆菌的血清型第13-14页
   ·胸膜肺炎放线杆菌的毒力因子第14-19页
     ·溶血毒素第14-15页
     ·荚膜多糖第15-16页
     ·脂多糖第16-17页
     ·外膜蛋白第17页
     ·转铁结合蛋白第17-18页
     ·酶类第18-19页
     ·粘附因子第19页
 2. 流行病学第19-21页
 3. 临床症状与病理变化第21-23页
   ·临床症状第21-22页
   ·病理变化第22-23页
 4. 预防控制第23-27页
   ·加强饲养管理第23页
   ·药物控制第23-24页
   ·免疫预防第24-27页
     ·灭活疫苗第24页
     ·亚单位疫苗第24-25页
     ·弱毒疫苗第25-26页
     ·ghost 疫苗第26-27页
     ·口服疫苗第27页
 5 展望第27-29页
试验一 猪胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素的克隆与表达第29-44页
 1 材料与方法第29-39页
   ·材料第29-30页
     ·试剂与仪器第29-30页
     ·菌株第30页
   ·溶血毒素A 基因的引物设计第30页
   ·溶血毒素A 基因的克隆与转化第30-33页
     ·细菌的培养第30-31页
     ·基因组DNA 的提取第31页
     ·PCR 扩增溶血毒素 A 基因第31页
     ·PCR 产物的回收、连接、转化第31-33页
     ·重组质粒的酶切第33页
   ·目的片断和载体的酶切、电泳及回收第33-34页
     ·目的片断与pGEX-5X-3 的酶切第33-34页
     ·酶切产物的电泳及回收第34页
   ·DNA 的连接与转化第34-35页
   ·质粒DNA 的提取与酶切第35-36页
   ·重组质粒的诱导表达第36页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第36-38页
     ·电泳样品的制备第36页
     ·SDS-PAGE 电泳第36-38页
   ·表达产物的 Western-blotting 检测第38-39页
 2 结果第39-43页
   ·不同溶血毒素 A 基因 PCR 扩增结果第39页
   ·不同溶血毒素 A 基因序列分析第39-40页
   ·不同溶血毒素 A 基因双酶切结果第40-41页
   ·不同诱导时间表达产物的含量第41页
   ·表达产物免疫原性检测第41-43页
 3. 讨论第43-44页
试验二 APP 溶血毒素表达产物的纯化及对小鼠免疫保护性研究第44-60页
 1材料与方法第44-48页
   ·菌株第44页
   ·试剂及仪器第44页
   ·实验动物第44-45页
   ·重组蛋白的纯化第45-46页
     ·重组蛋白的表达第45页
     ·硫酸铵盐析第45页
     ·重组蛋白的透析与浓缩第45页
     ·Sephadex G-200 凝胶过滤层析第45-46页
     ·重组蛋白浓度的测定第46页
   ·亚单位疫苗的制备第46-47页
   ·动物分组与免疫第47页
   ·病理学检查第47-48页
     ·临床病理变化观察第47页
     ·病理组织学观察第47-48页
 2 结果第48-58页
   ·硫酸铵盐析第48页
   ·Sephadex G-200 凝胶过滤层析第48-49页
   ·蛋白质纯度的鉴定第49-50页
   ·临床症状与剖检变化第50-53页
   ·病理组织学变化第53-58页
 3 讨论第58-60页
结论第60-61页
参考文献第61-71页
致谢第71-72页
攻读硕士期间发表的论文情况第72页

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