| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一部分 文献综述 猪圆环病毒的研究进展 | 第10-26页 |
| 1 病原学 | 第10-15页 |
| ·病毒的发现 | 第10-11页 |
| ·病毒的理化性质 | 第11页 |
| ·PCV的分子生物学特性 | 第11-15页 |
| 2 猪圆环病毒2型流行特点 | 第15-16页 |
| 3 临床症状与病理变化 | 第16-18页 |
| ·断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS) | 第16-17页 |
| ·猪皮炎/肾病综合征(PDNS) | 第17-18页 |
| 4 诊断技术 | 第18-26页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第18-19页 |
| ·抗体检测 | 第19-20页 |
| ·抗原的检测 | 第20-26页 |
| 第二部分 本试验研究的内容、目的和意义 | 第26-27页 |
| 第三部分 试验研究内容 | 第27-58页 |
| 试验一 兔抗猪圆环病毒Ⅱ型ORF2重组蛋白抗体的研制 | 第27-41页 |
| 1 材料与方法 | 第27-30页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·试验所需部分试剂制备和配制 | 第27-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-34页 |
| ·重组细菌的诱导表达 | 第30页 |
| ·重组蛋白包涵体的提取 | 第30-31页 |
| ·免疫与抗血清的制备与纯化 | 第31-32页 |
| ·PCV-ORF2抗血清效价的检测 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE电泳法检测ORF2融合蛋白纯度 | 第32-33页 |
| ·Western blotting法检测抗血清特异性 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-37页 |
| ·重组蛋白的表达及包涵体提取的结果 | 第34-35页 |
| ·抗体效价的检测结果 | 第35-36页 |
| ·抗血清特异性的检测结果 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| ·PCV-ORF2重组蛋白的应用 | 第37-38页 |
| ·兔抗猪PCV-ORF2多克隆血清的纯化 | 第38-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| ·本实验成功诱导表达PCV-ORF2重组蛋白并提取出相应包涵体,该重组蛋白不仅具有较高的纯度而且具有很强的免疫原性 | 第40页 |
| ·成功制备兔抗猪PCV2-ORF2血清,其抗体效价达到1:10240(2~(10)) | 第40页 |
| ·成功纯化兔抗猪PCV2-ORF2多克隆血清,抗体纯度较高,特异性强 | 第40页 |
| ·上述实验结果为进一步构建免疫组织化学诊断体系完成了前期工作 | 第40-41页 |
| 试验二 免疫组化检测猪圆环病毒及临床诊断标准的建立 | 第41-58页 |
| 1 材料与方法 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41-43页 |
| ·方法 | 第43-47页 |
| 2 结果 | 第47-51页 |
| ·猪圆环病Ⅱ型的临床及病理变化 | 第47-48页 |
| ·H.E染色结果 | 第48页 |
| ·免疫组织化学检测结果 | 第48-49页 |
| ·间接ELISA试验结果 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-57页 |
| ·兔抗猪圆环病毒特异性抗体的选择和制备 | 第51-52页 |
| ·免疫组织化学Envision法的选择 | 第52-53页 |
| ·免疫组织化学诊断标准的确立 | 第53-54页 |
| ·免疫组织化学检测方法与间接ELISA检测方法的比较 | 第54-55页 |
| ·免疫组织化学操作中易出现的问题 | 第55-56页 |
| ·免疫组织化学方法质量的控制 | 第56-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| ·Envision法可以对PCV2进行定性、定量和定位诊断,准确率高,特异性强 | 第57页 |
| ·肺脏为Envision法检测PCV2的靶组织,肺巨噬细胞为主要阳性细胞 | 第57页 |
| ·本试验初步建立了采用免疫组织化学技术临床诊断PCV2的标准,为PCV2的实验室鉴别诊断和临床诊断提供了有效的检测手段 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-76页 |
| 攻读硕士期间发表及待发表的论文 | 第76页 |
