| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·大肠杆菌不耐热肠毒素的研究概述 | 第11页 |
| ·LT 的基因与分子结构 | 第11-13页 |
| ·LT 的性质 | 第13-14页 |
| ·与细胞膜表面的GM1 结合 | 第13-14页 |
| ·与NAD 的结合 | 第14页 |
| ·与ADP-核糖化因子（ARF）的结合 | 第14页 |
| ·LT 的功能 | 第14-17页 |
| ·LT 的毒性 | 第14-15页 |
| ·LT 的免疫原性及免疫调节作用 | 第15-16页 |
| ·LT 的佐剂活性 | 第16-17页 |
| ·LT 的突变体的研究 | 第17页 |
| ·LT 粘膜免疫佐剂的应用及前景展望 | 第17-19页 |
| 2 实验一、大肠杆菌不耐热肠毒素LTAK63/LTB 的原核表达 | 第19-45页 |
| ·材料和方法 | 第19-24页 |
| ·菌株、载体和细胞 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第21-23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-37页 |
| ·LTA 和LTB 基因的PCR 扩增 | 第24-26页 |
| ·LTA 和LTB 基因重组载体pMD18-T-LTA 和pMD18-T-LTB的构建 | 第26-28页 |
| ·DNA 序列测定与分析 | 第28-29页 |
| ·重组质粒pMD18-T-LTA 定点突变 | 第29页 |
| ·原核表达载体pET-206-LTAK63 和pET-206-LTAK63 的构建 | 第29-34页 |
| ·重组质粒pET-206-LTAK63和pET-206-LTB在原核细胞中的表达 | 第34-37页 |
| ·结果和分析 | 第37-41页 |
| ·LTA/LTB 基因的扩增 | 第37-38页 |
| ·pMD18-T-LTA 和pMD18-T-LTB 的构建 | 第38-39页 |
| ·LTA 和LTB 基因的序列测定与分析 | 第39-40页 |
| ·LTAK63 和LTB 原核表达载体pET-206-LTAK63 和pET-206-LTB的构建 | 第40页 |
| ·表达产物的SDS- PAGE 检测 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-45页 |
| 3 实验二、大肠杆菌不耐热肠毒素LTAK63 在真核细胞中的表达 | 第45-57页 |
| ·材料和方法 | 第45-48页 |
| ·菌株、载体和细胞 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-52页 |
| ·LTAK63 基因的PCR 扩增 | 第48页 |
| ·真核表达载体pcDNACD55p-LTAK63A 的构建 | 第48-50页 |
| ·重组质粒pcDNACD55p-LTAK63A 在真核细胞中的表达 | 第50-52页 |
| ·结果和分析 | 第52-54页 |
| ·LTAK63 基因的PCR 扩增 | 第52页 |
| ·LTAK63 真核表达载体pcDNACD55p-LTAK63 的构建 | 第52-53页 |
| ·LTAK63 基因的序列测定与分析 | 第53页 |
| ·表达产物的Western blot 检测 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 附录1 重组质粒PMD18-T-LTA 测序报告图 | 第61-62页 |
| 附录2 重组质粒PMD18-T-LTB 测序报告图 | 第62-63页 |
| 附录3 LTA 与LTAK63 的局部测序图比较 | 第63-64页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
