中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
前言 | 第12-29页 |
1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)及其分子生物学研究 | 第12-28页 |
·对虾白斑综合症病毒研究概况 | 第12-16页 |
·对虾白斑综合症病毒的发现 | 第12页 |
·对虾白斑综合症病毒的大小和形态结构 | 第12页 |
·对虾白斑综合症病毒的感染宿主及感染动物模型 | 第12-13页 |
·对虾白斑综合症病毒的组织病理学 | 第13-14页 |
·对虾白斑综合症病毒的分离纯化 | 第14-15页 |
·对虾白斑综合症病毒的检测 | 第15-16页 |
·对虾白斑综合症病毒的基因组学研究 | 第16-17页 |
·对虾白斑综合症病毒的蛋白质组学研究 | 第17-25页 |
·对虾白斑综合症病毒的结构蛋白 | 第17-22页 |
·对虾白斑综合症病毒的功能酶类 | 第22-25页 |
·胶原蛋白研究概况 | 第25-28页 |
·胶原蛋白的组织分布和类型 | 第25页 |
·胶原蛋白的氨基酸组成 | 第25页 |
·胶原蛋白的结构 | 第25-26页 |
·胶原蛋白稳定性 | 第26-27页 |
·胶原蛋白的功能和应用 | 第27-28页 |
2 本论文研究的内容和意义 | 第28-29页 |
第一部分 对虾白斑综合症病毒膜蛋白VP32基因的鉴定 | 第29-43页 |
1 前言 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-36页 |
·材料 | 第30页 |
·方法 | 第30-36页 |
·WSSV完整病毒和核衣壳的制备 | 第30-32页 |
·基因的克隆表达和蛋白质纯化 | 第32-34页 |
·多克隆抗体的制备 | 第34页 |
·Western blot分析 | 第34-35页 |
·Far-Western分析 | 第35页 |
·GST pull-down分析 | 第35页 |
·免疫金标电镜定位分析 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-42页 |
·vp32基因的结构 | 第36页 |
·GST-VP32和MBP-VP32的诱导表达和纯化 | 第36-39页 |
·Western blot分析 | 第39-40页 |
·免疫电镜定位 | 第40-41页 |
·VP32与WSSV主要膜蛋白/宿主细胞总蛋白之间相互作用 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
第二部分 对虾白斑综合症病毒类胶原蛋白CLP基因的初步鉴定 | 第43-53页 |
1 前言 | 第43页 |
2 材料与方法 | 第43-46页 |
·材料 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-46页 |
·pGEX-2T-clpn-(6His),pGEX-2T-clpm-(6His)和pET-His-clpc重组表达质粒的构建 | 第44-45页 |
·pGEX-2T-clpn-(6His),pGEX-2T-clpm-(6His)和pET-His-clpc在E.coli BL-21中的表达 | 第45页 |
·GST-CLPn和GST-CLPm的纯化 | 第45页 |
·Ni-NTA柱变性条件下纯化重组蛋白 | 第45页 |
·多克隆抗体的制备 | 第45页 |
·螯虾各组织总蛋白的制备 | 第45-46页 |
·Western blot分析 | 第46页 |
3 结果 | 第46-52页 |
·clp基因的结构 | 第46-47页 |
·GST-clpn-(6His),GST-clpm-(6His)和His-clpc在E.coli BL-21中的诱导表达和纯化 | 第47-50页 |
·Western blot分析CLP在宿主病虾各组织中的分布情况 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
缩略词 | 第63-64页 |
附录 | 第64-73页 |
致谢 | 第73页 |