| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-33页 |
| ·铁代谢的研究进展 | 第15-26页 |
| ·铁在植物中的生理功能 | 第15-16页 |
| ·缺铁对植物的影响 | 第16-17页 |
| ·植物中铁素的吸收机制 | 第17-21页 |
| ·植物铁蛋白的研究进展 | 第21-25页 |
| ·铁蛋白基因的转化研究 | 第25-26页 |
| ·PIC1 基因研究进展 | 第26-29页 |
| ·PIC1 基因的结构 | 第26-28页 |
| ·PIC1 基因的功能 | 第28-29页 |
| ·叶绿体基因工程 | 第29-33页 |
| ·叶绿体基因工程的优越性 | 第30-31页 |
| ·叶绿体基因工程的应用 | 第31-33页 |
| 第2章 Ferritin 和 PIC1 叶绿体双价表达载体的构建及 其对烟草的遗传转化 | 第33-65页 |
| ·引言 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·质粒载体与菌株 | 第34页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·分子生物学实验用品 | 第34-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-37页 |
| ·实验方法 | 第37-52页 |
| ·pPRV PIC1-Sfer 载体的构建 | 第37-44页 |
| ·pPRV PIC1-Sfer/del TP 载体的构建 | 第44-46页 |
| ·pPRV PIC1-Tfer/del TP 载体的构建 | 第46-50页 |
| ·叶绿体双价表达载体对烟草的遗传转化 | 第50-52页 |
| ·烟草无菌苗的培养用MS 固体培养基培养野生型烟草无菌苗，培养温度为25℃,光照强度为3000 lux，光/暗周期为 16h/8h。通过腋芽切段培养方式继代繁殖 | 第50页 |
| ·烟草受体细胞的准备取4-6 叶期烟草无菌苗，选择直径约3cm 的烟草无菌苗展开叶作为外植体，将其置于含有MS+0.1mg/L NAA+1mg/L 6-BA 培养基的培养皿上，背面朝上，在轰击前处理16-20 h | 第50页 |
| ·微粒子弹(DNA coated microprojectiles)的制备 | 第50页 |
| ·装备基因枪 | 第50-51页 |
| ·轰击 | 第51页 |
| ·转化叶片的过渡培养及抗性筛选培养 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-60页 |
| ·pPRV PIC1-Sfer 载体的构建 | 第52-54页 |
| ·pPRV PIC1-Sfer/delTP 载体的构建 | 第54-56页 |
| ·pPRV PIC1-Tfer/delTP 载体的构建 | 第56-59页 |
| ·烟草叶绿体基因组的转化 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-64页 |
| ·RNA 的分离及 RT-PCR 克隆 | 第60页 |
| ·外源DNA 片段和质粒载体的连接反应策略 | 第60-61页 |
| ·叶绿体转化载体的构建 | 第61-62页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第62-63页 |
| ·叶绿体转化 | 第63-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| ·野生大豆和烟草铁蛋白基因的克隆 | 第64页 |
| ·叶绿体双价表达载体的构建 | 第64页 |
| ·获得了转Ferritin 基因和PIC1 基因烟草 | 第64-65页 |
| 第3章 转 Ferritin 和 PIC1 基因烟草的分子生物学检测 | 第65-82页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·实验材料 | 第65-68页 |
| ·植物材料 | 第65-66页 |
| ·分子生物学实验用品 | 第66页 |
| ·主要仪器设备 | 第66页 |
| ·主要试剂 | 第66-68页 |
| ·实验方法 | 第68-73页 |
| ·叶绿体基因组转化植株的PCR 检测 | 第68-70页 |
| ·转基因植物的Southern blot 检测 | 第70-73页 |
| ·结果与分析 | 第73-80页 |
| ·叶绿体基因组转化植株的PCR 检测 | 第73-78页 |
| ·Southern blot 检测 | 第78-80页 |
| ·pPRVPIC1-Sfer/delTP 转化烟草的Southern blot 检测 | 第78-80页 |
| ·讨论 | 第80-81页 |
| ·PCR 过程中出现的假阳性及假阴性 | 第80-81页 |
| ·关于后续工作的设想 | 第81页 |
| ·本章小结 | 第81-82页 |
| 第4章 pPRVPIC1-Sfer/delTP 转化烟草的表型分析 | 第82-87页 |
| ·引言 | 第82页 |
| ·实验材料 | 第82-83页 |
| ·植物材料 | 第82页 |
| ·主要仪器设备 | 第82页 |
| ·主要试剂 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83页 |
| ·pPRVPIC1-Sfer/delTP 转化烟草的抗铁毒能力的检测 | 第83页 |
| ·pPRVPIC1-Sfer/delTP 转化烟草的T_0种子对壮观霉素的抗性分析 | 第83页 |
| ·结果与分析 | 第83-85页 |
| ·pPRVPIC1-Sfer/delTP 转化烟草的抗铁毒能力的检测 | 第83-84页 |
| ·pPRVPIC1-Sfer/delTP 转化烟草的T_0 种子对壮观霉素的抗性分析 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-86页 |
| ·表型分析材料的选取 | 第85页 |
| ·关于后续工作的设想 | 第85-86页 |
| ·本章小结 | 第86-87页 |
| ·pPRVPIC1-Sfer/delTP 转化烟草抗铁毒能力的检测 | 第86页 |
| ·pPRVPIC1-Sfer/delTP 转化烟草的T_0 种子对壮观霉素的抗性分析 | 第86-87页 |
| 结论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-97页 |
| 在读期间发表的文章 | 第97页 |
| 在读期间参加的学术活动 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 英文缩略词索引 | 第99-100页 |
| 图版说明 | 第100-101页 |
| 图版 | 第101-103页 |
