| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-31页 |
| ·鸡传染性支气管炎研究进展 | 第13-21页 |
| ·IBV 早期发现及研究 | 第13-14页 |
| ·IBV 分子生物学特征 | 第14页 |
| ·IBV 结构蛋白及其生物学功能 | 第14-17页 |
| ·IBV 分型研究 | 第17-20页 |
| ·IB 疫苗研究 | 第20-21页 |
| ·禽类细胞因子研究进展 | 第21-27页 |
| ·白细胞介素－1β（Interluekin-1β，IL-1β） | 第22页 |
| ·白细胞介素－2（IL-2） | 第22-23页 |
| ·白细胞介素－6 家族（IL-6 Family） | 第23-24页 |
| ·白细胞介素－8（IL-8） | 第24-25页 |
| ·白细胞介素－18（IL-18） | 第25页 |
| ·干扰素－γ（Interferon γ, IFN-γ） | 第25-26页 |
| ·干扰素－α（IFN-α） | 第26页 |
| ·肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor, TNFs） | 第26-27页 |
| ·鸡白细胞介素15（INTERLEUKIN-15, IL-15）研究进展 | 第27-29页 |
| ·鸡IL-15 概述 | 第27-28页 |
| ·鸡IL-15 分子结构 | 第28页 |
| ·鸡IL-15 受体研究 | 第28页 |
| ·鸡IL-15 生物学功能 | 第28-29页 |
| 小结 | 第29页 |
| ·研究的目的与意义 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-51页 |
| ·试验材料 | 第31-32页 |
| ·病毒株 | 第31页 |
| ·试验动物 | 第31页 |
| ·细胞株、菌株、载体及质粒 | 第31页 |
| ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒 | 第31页 |
| ·主要生化试剂 | 第31-32页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-50页 |
| ·IBV S 基因、IBV 51 基因及ChIL-15 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建 | 第32-36页 |
| ·IBV S/ChIL-15 及IBV 51/ChIL-15 融合基因真核表达质粒的构建 | 第36-39页 |
| ·抗IBV H120 株病毒多克隆抗体的制备及鉴定 | 第39-41页 |
| ·pcDNA3.1-IBV S-linker-ChIL-15 及pcDNA3.1-IBV 51-linker-Ch IL-15 重组质粒体外瞬时表达及其表达产物的检测 | 第41-43页 |
| ·pcDNA3.1-IBV S-linker-ChIL-15 及pcDNA3.1-IBV 51-linker-Ch IL-15 重组质粒在雏鸡体内的应用及其免疫效果的检测 | 第43-50页 |
| ·数据处理 | 第50-51页 |
| 3 试验结果 | 第51-91页 |
| ·IBV S 基因、IBV 51 基因及CHIL-15 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建及鉴定 | 第51-54页 |
| ·pcDNA3.1-IBV S-TAA 重组质粒的构建与鉴定 | 第51-52页 |
| ·pcDNA3.1-IBV 51-TGA 重组质粒的构建与鉴定 | 第52-53页 |
| ·pcDNA3.1-ATG-ChIL-15 重组质粒的构建与鉴定 | 第53-54页 |
| ·PCDNA3.1-IBV S-CHIL-15 融合基因真核表达质粒构建及鉴定 | 第54-57页 |
| ·pcDNA3.1-IBV S-ChIL-15 基因推测表达蛋白特性软件预测结果 | 第54-55页 |
| ·重组质粒的PCR 及双酶切鉴定 | 第55-56页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第56-57页 |
| ·PCDNA3.1-IBV 51-CHIL-15 融合基因真核表达质粒的构建及鉴定 | 第57-58页 |
| ·pcDNA3.1-IBV 51-ChIL-15 基因推测表达蛋白特性软件预测结果 | 第57页 |
| ·重组质粒的PCR 及酶切鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第58页 |
| ·抗IBV H120 株全病毒多克隆抗体的制备及鉴定 | 第58-60页 |
| ·琼脂扩散实验检测多抗效价 | 第58-59页 |
| ·酶联免疫吸附实验（ELISA）检测多抗效价 | 第59-60页 |
| ·真核表达质粒体外转染及其表达产物的检测 | 第60-63页 |
| ·pcDNA3.1-IBV S-ChIL-15 融合基因真核表达质粒体外转染及其检测 | 第60-62页 |
| ·pcDNA3.1-IBV 51-ChIL-15 融合基因真核表达质粒体外转染及其检测 | 第62-63页 |
| ·雏鸡免疫器官IL-2 MRNA 表达水平REAL TIME RT-PCR 检测方法的建立 | 第63-68页 |
| ·ChIL-2 和ChGAPDH 目的片段的RT-PCR 扩增 | 第63-64页 |
| ·ChIL-2 和ChGAPDH 重组质粒的PCR 及酶切鉴定 | 第64-65页 |
| ·ChIL-2 和ChGAPDH 重组质粒测序鉴定结果 | 第65-66页 |
| ·标准曲线的制作 | 第66-67页 |
| ·标准曲线的重复性检测 | 第67-68页 |
| ·雏鸡免疫器官及血液T、B 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第68-72页 |
| ·雏鸡胸腺T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第68-69页 |
| ·雏鸡外周血液T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第69页 |
| ·雏鸡脾脏T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第69页 |
| ·雏鸡血液B 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第69-70页 |
| ·雏鸡脾脏B 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第70-72页 |
| ·雏鸡免疫器官及血液不同亚型T 淋巴细胞动态变化 | 第72-84页 |
| ·雏鸡免疫器官及血液CD4+T 淋巴细胞动态变化 | 第72-75页 |
| ·雏鸡免疫器官及血液CD8+T 淋巴细胞动态变化 | 第75-78页 |
| ·雏鸡免疫器官及血液TCRγδ+T 淋巴细胞动态变化 | 第78-84页 |
| ·雏鸡外周血液抗IBV IGG 抗体含量动态变化 | 第84-85页 |
| ·雏鸡免疫器官IL-2 MRNA 表达水平动态变化 | 第85-87页 |
| ·雏鸡胸腺IL-2 mRNA 表达水平动态变化 | 第85页 |
| ·雏鸡脾脏IL-2 mRNA 表达水平动态变化 | 第85-87页 |
| ·IBV 攻击试验雏鸡后病理学观察结果 | 第87-90页 |
| ·临床症状及病理剖检观察结果 | 第87-88页 |
| ·病理组织学观察结果 | 第88-90页 |
| ·感染率及保护率计算结果 | 第90-91页 |
| 4 讨论 | 第91-102页 |
| ·融合基因真核载体表达质粒的设计与构建 | 第92-93页 |
| ·多克隆抗体的制备及其效价鉴定结果分析 | 第93-94页 |
| ·融合基因真核载体表达质粒体外瞬时转染鉴定结果及分析 | 第94-95页 |
| ·雏鸡进行核酸免疫的讨论与分析 | 第95-96页 |
| ·雏鸡免疫后T 淋巴细胞增殖功能变化结果分析 | 第96页 |
| ·雏鸡免疫后B 淋巴细胞增殖功能动态变化结果分析 | 第96-97页 |
| ·雏鸡免疫后不同亚型T 细胞动态变化结果分析 | 第97-99页 |
| ·雏鸡免疫后免疫器官及血液CD4+T 细胞动态变化结果分析 | 第97页 |
| ·雏鸡免疫后免疫器官及血液CD8+T 细胞动态变化结果分析 | 第97-98页 |
| ·雏鸡免疫后TCRαβ+T（TCR-2 T）细胞动态变化结果分析 | 第98页 |
| ·雏鸡免疫后TCRγδ+T（TCR-1 T）细胞动态变化结果分析 | 第98-99页 |
| ·雏鸡外周血液抗IBV IGG 抗体含量动态变化结果分析 | 第99页 |
| ·雏鸡免疫器官IL-2 MRNA 表达水平动态变化结果分析 | 第99-100页 |
| ·IBV 攻击试验雏鸡后病理学观察结果、感染率及保护率计算结果的讨论与分析 | 第100页 |
| ·IBV S 基因与IBV 51 基因免疫效果比较分析 | 第100-101页 |
| 小结 | 第101-102页 |
| 5 结论 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-115页 |
| 附录I：融合基因质粒构建路线 | 第115-116页 |
| 附录II：主要溶液的配制 | 第116-118页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第118页 |
