缩写名词表 | 第1-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
前言 | 第16-17页 |
1 文献综述 | 第17-41页 |
·植物体内氮的营养特征 | 第17-19页 |
·植物体内氮的含量和分布 | 第17页 |
·植物体内氮的生理功能 | 第17-18页 |
·氮对植物光合作用的影响 | 第18-19页 |
·植物对氮的吸收和利用 | 第19-27页 |
·植物对氮的吸收 | 第19-23页 |
·共生固氮 | 第20页 |
·植物通过根部从土壤中吸收氮 | 第20-23页 |
·植物对氮的利用 | 第23-27页 |
·NO_3~-的还原 | 第23-25页 |
·NH_4~+的同化 | 第25-27页 |
·植物谷氨酰胺合成酶(GS)的研究概况 | 第27-33页 |
·谷氨酰胺合成酶与其相关基因 | 第27-28页 |
·谷氨酰胺合成酶的生化性质 | 第28页 |
·谷氨酰胺合成酶的反应途径与功能 | 第28-29页 |
·谷氨酰胺合成酶的基因表达调节 | 第29-30页 |
·谷氨酰胺合成酶介导的碳氮平衡 | 第30-31页 |
·谷氨酰胺合成酶转基因植物的研究现状 | 第31-33页 |
·植物基因功能研究的策略和方法 | 第33-39页 |
·基因功能丧失或减少 | 第34-38页 |
·插入突变 | 第34-35页 |
·反义抑制和共抑制 | 第35-36页 |
·RNA干扰 | 第36-38页 |
·基因功能增加 | 第38-39页 |
·基因的超量表达 | 第39页 |
·基因的诱导表达 | 第39页 |
·农杆菌介导的遗传转化系统和抗性标记基因的使用 | 第39-40页 |
·本研究的目的和意义 | 第40-41页 |
2 材料与方法 | 第41-58页 |
·实验所用的水稻材料和菌株 | 第41-42页 |
·遗传转化的基因片段 | 第42页 |
·载体的构建和遗传转化 | 第42-47页 |
·骨架载体的构建 | 第42页 |
·超量表达载体的构建 | 第42-44页 |
·RNAi抑制表达载体的构建 | 第44-46页 |
·基因启动子融合GFP载体的构建 | 第46页 |
·基因的遗传转化 | 第46-47页 |
·DNA的提取、转基因植株的阳性检测及转基因拷贝数的检测 | 第47-49页 |
·DNA的提取 | 第47-48页 |
·转基因植株的阳性检测 | 第48页 |
·转基因拷贝数的Southern检测 | 第48-49页 |
·RNA的抽提、反转录及表达量的检测 | 第49页 |
·RNA的抽提 | 第49页 |
·转基因表达量的RT-PCR和Northern检测 | 第49页 |
·转基因植株的种植和性状考察 | 第49-50页 |
·水培试验和性状考察 | 第49-50页 |
·田间试验和性状考察 | 第50页 |
·转基因植株生理生化指标的测定 | 第50-56页 |
·谷氨酰胺合成酶活性的测定 | 第50-51页 |
·水溶性蛋白含量的测定 | 第51-53页 |
·游离NO_3~-含量的测定 | 第53-54页 |
·游离NH_4~+含量的测定 | 第54-55页 |
·游离氨基酸含量的测定 | 第55页 |
·总氮含量的测定 | 第55页 |
·总氨基酸含量/籽粒氨基酸含量的测定 | 第55-56页 |
·叶片叶绿素含量的测定 | 第56页 |
·转基因植株的非生物胁迫试验和性状考察 | 第56-58页 |
·Basta胁迫试验 | 第56-57页 |
·高浓度NaCl胁迫试验 | 第57页 |
·冷胁迫试验 | 第57页 |
·干旱胁迫试验 | 第57-58页 |
·ABA敏感性试验 | 第58页 |
·体外添加Gln培养试验 | 第58页 |
3 结果与分析 | 第58-98页 |
·超量表达GS1;1、GS1;2和glnA转基因植株的获得与功能分析 | 第58-73页 |
·转基因植株的获得与鉴定 | 第58-62页 |
·基因片段的获得与转化载体的构建 | 第58-59页 |
·转基因植株的获得与鉴定 | 第59-62页 |
·转基因植株的生理生化指标的分析 | 第62-68页 |
·转基因植株谷氨酰胺合成酶活性的测定分析 | 第62页 |
·转基因植株水溶性蛋白含量的测定分析 | 第62-63页 |
·转基因植株游离NH_4~+、游离NO_3~-和游离氨基酸含量的测定分析 | 第63-65页 |
·转基因植株总氮和总氨基酸含量的测定分析 | 第65-67页 |
·转基因植株的经济产量及籽粒氨基酸含量的测定分析 | 第67-68页 |
·转基因植株的非生物胁迫试验 | 第68-73页 |
·转基因植株的Basta抗性筛选试验 | 第69页 |
·转基因植株的高浓度NaCl胁迫试验 | 第69-71页 |
·转基因植株的冷胁迫试验 | 第71页 |
·转基因植株的干旱胁迫和ABA敏感性试验 | 第71-73页 |
·超量表达GS2转基因植株的获得与功能分析 | 第73-87页 |
·转基因植株的获得与鉴定 | 第73-75页 |
·基因片段的获得与转化载体的构建 | 第73页 |
·转基因植株的获得与鉴定 | 第73-75页 |
·转基因植株的表型与生物产量的分析 | 第75-76页 |
·转基因黄化植株的生理生化指标的分析 | 第76-82页 |
·转基因黄化植株谷氨酰胺合成酶活性的测定分析 | 第76-78页 |
·转基因黄化植株水溶性蛋白含量的测定分析 | 第78页 |
·转基因黄化植株游离NH_4~+和游离氨基酸含量的测定分析 | 第78-82页 |
·转基因黄化植叶绿素含量的测定分析 | 第82-84页 |
·不同生育期叶片叶绿素含量的测定分析 | 第82页 |
·不同叶龄叶片叶绿素含量的测定分析 | 第82-84页 |
·转基因黄化植株叶绿素合成途径及光呼吸途径相关基因表达分析 | 第84-86页 |
·转基因黄化植株体外添加Gln的试验 | 第86-87页 |
·超量表达GS1;3、NRT2、AMT1;1、AMT1;2和AMT1;3转基因植株的获得与功能分析 | 第87-95页 |
·转基因植株的获得与鉴定 | 第87-91页 |
·基因片段的获得与转化载体的构建 | 第87-88页 |
·转基因植株的获得与鉴定 | 第88-91页 |
·转基因植株生长表型和生物产量的分析 | 第91-92页 |
·超量表达AMT1;3植株NH_4~+含量的测定分析 | 第92-94页 |
·超量表达AMT1;3植株相关基因表达分析 | 第94-95页 |
·RNAi抑制表达以及启动子融合GFP蛋白的转基因植株的获得与分析 | 第95-98页 |
·RNAi抑制表达的转基因植株的获得与鉴定 | 第95-96页 |
·启动子融合GFP蛋白的转基因植株的获得与鉴定 | 第96-97页 |
·基因表达模式的分析 | 第97-98页 |
4 讨论 | 第98-110页 |
·关于GS1;1、GS1;2和glnA基因功能的探讨 | 第98-102页 |
·转基因植株的生长表型 | 第98-99页 |
·转基因植株的代谢水平 | 第99-100页 |
·转基因植株对非生物胁迫条件的反应 | 第100-102页 |
·关于GS2基因功能的探讨 | 第102-104页 |
·转基因植株的生长表型 | 第102-103页 |
·转基因植株的代谢水平 | 第103-104页 |
·关于GS1;3、NRT2、AMT1;1、AMT1;2和AMT1;3基因功能的探讨 | 第104-106页 |
·关于氮高效利用的转基因水稻新品种培育方法的探讨 | 第106-109页 |
·氮高效利用的转基因水稻新品种的应用前景 | 第106页 |
·超量表达GS1;2转基因植株在育种上的应用前景 | 第106-107页 |
·氮高效利用的转基因水稻培育新方法探讨 | 第107-109页 |
·关于后续工作的设想 | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-134页 |
致谢 | 第134-135页 |
附录A 基本实验操作步骤 | 第135-145页 |
附录B 个人简历 | 第145页 |