缩略词表 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
1 文献综述 | 第13-26页 |
·遗传育种改良品种 | 第13-14页 |
·天冬氨酸转氨酶的研究进展 | 第14-17页 |
·天冬氨酸和天冬酰胺的生物合成 | 第14-15页 |
·天冬氨酸的生物合成 | 第14页 |
·天冬酰胺的生物合成 | 第14-15页 |
·天冬氨酸转氨酶的进展分析 | 第15页 |
·天冬氨酸转氨酶的克隆 | 第15-16页 |
·天冬氨酸转氨酶的调控 | 第16页 |
·天冬氨酸转氨酶在水稻中的情况 | 第16-17页 |
·稻米蛋白质和氨基酸的研究进展 | 第17-19页 |
·稻米蛋白质的种类 | 第17页 |
·稻米蛋白质的组成和利用 | 第17-18页 |
·影响稻米蛋白质的非遗传因素 | 第18页 |
·蛋白质和氨基酸含量与氨基酸代谢途径基因的关系 | 第18-19页 |
·研究植物基因功能的策略和方法 | 第19-25页 |
·基因功能增加或获得 | 第20页 |
·超量表达(Over-expression) | 第20页 |
·诱导表达(Inducible expression) | 第20页 |
·基因功能丧失或减少 | 第20-24页 |
·插入突变 | 第20-21页 |
·反义抑制和共抑制 | 第21-22页 |
·RNA干扰(RNAi) | 第22-24页 |
·基因的异位表达(Ectopic expression) | 第24-25页 |
·本研究的意义、目的和创新之处 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-38页 |
·水稻材料 | 第26页 |
·用于遗传转化的水稻基因片段 | 第26-27页 |
·实验所用到的菌株、质粒、载体和感受态细胞 | 第27页 |
·遗传转化载体的构建和转化 | 第27-30页 |
·骨架载体构建 | 第27-28页 |
·超量表达载体构建 | 第28页 |
·RNAi抑制表达载体的构建 | 第28-29页 |
·遗传转化 | 第29-30页 |
·DNA提取、转基因植株PCR阳性检测及转基因拷贝数检测 | 第30-31页 |
·DNA提取 | 第30页 |
·PCR阳性检测 | 第30-31页 |
·转基因Southern检测 | 第31页 |
·RNA的抽提、反转录及杂交 | 第31页 |
·RNA的抽提,反转录 | 第31页 |
·基因表达NORTHERN检测 | 第31页 |
·转基因植株超量表达检测 | 第31页 |
·PCR、RT-PCR和REAL-TIME PCR的检测 | 第31-32页 |
·水培试验及性状考察 | 第32-35页 |
·转基因植株的形态表型观察初筛和复筛 | 第32-33页 |
·性状考察 | 第33-35页 |
·天冬氨酸转氨酶酶活的测定方法 | 第33-35页 |
·游离NO_3~-的测定方法 | 第35页 |
·游离NH_4~+的测定方法 | 第35页 |
·各种胁迫条件下,培养基种植和性状考察 | 第35-36页 |
·田间种植和性状考察 | 第36-38页 |
·田间实验 | 第36页 |
·性状考察 | 第36-37页 |
·蛋白质含量的测定方法 | 第36-37页 |
·氨基酸含量的测定方法 | 第37页 |
·转基因植株的性状考察初筛 | 第37页 |
·转基因植株的性状考察复筛 | 第37-38页 |
·数据收集、整理与统计分析 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-61页 |
·骨架载体构建 | 第38-39页 |
·对天冬氨酸转氨酶基因的获得及序列分析 | 第39-40页 |
·转化载体的构建及遗传转化 | 第40页 |
·T_0代转基因植株PCR阳性分析 | 第40-42页 |
·T_0代转基因植株SOUTHERN拷贝数分析 | 第42-43页 |
·水稻内源基因的表达模式分析 | 第43-47页 |
·基因芯片分析基因家族OsAAT的表达模式 | 第43-44页 |
·RT-PCR分析基因家族OsAAT的表达模式 | 第44-46页 |
·利用RT-PCR,分析基因家族OsAAT在各种胁迫条件下的表达模 | 第46-47页 |
·转基因植株超量表达和抑制表达检测 | 第47-49页 |
·转基因植株中各基因表达量变化的检测 | 第49-52页 |
·转基因植株水培生理生化鉴定 | 第52-61页 |
·T_1代转基因家系在全营养水培条件下,酶活的测定 | 第52-53页 |
·T_1代转基因家系在全营养水培条件下,游离硝酸盐、铵盐和可溶性蛋白的测定 | 第53-55页 |
·T_1代转基因家系对氮胁迫放应的水培实验 | 第55-56页 |
·T_1代转基因家系在培养基上的胁迫实验 | 第56-57页 |
·T_1代转基因植株,米粉中氨基酸的测定 | 第57页 |
·T_2代转基因植株,米粉中氨基酸含量的复筛和蛋白质测定 | 第57-61页 |
4 讨论 | 第61-72页 |
·对AAT基因功能的探讨 | 第61-66页 |
·AAT基因对氮吸收的影响 | 第61-62页 |
·超量表达AAT基因对植株代谢的影响 | 第62-63页 |
·超量表达AAT基因能提高植株种子里氨基酸含量 | 第63-66页 |
·超量表达AAT基因提高植株种子里氨基酸含量的重要意义 | 第66页 |
·有关基因遗传转化的一些思考 | 第66-72页 |
·关于转化实验一些技术操作问题的思考 | 第66-67页 |
·农杆菌介导法转化水稻的注意问题 | 第66-67页 |
·转基因植株的阳性检测 | 第67页 |
·培养基实验和水培实验 | 第67页 |
·T_0代转基因家系表型不稳定的可能原因 | 第67-68页 |
·筛选标记基因在转基因植物中的应用 | 第68-69页 |
·基因家族中多成员在转基因植物中的表达 | 第69-70页 |
·转基因水稻安全性问题 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
个人简历 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
附录A | 第84-85页 |
附录B | 第85-92页 |