| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-23页 |
| 第一章 文献综述 | 第23-56页 |
| ·AsA 的发现及其化学性质 | 第23-25页 |
| ·AsA 的发现 | 第23-24页 |
| ·化学特性 | 第24-25页 |
| ·AsA 对人体的重要性 | 第25-26页 |
| ·AsA 在植物中的生物功能 | 第26-28页 |
| ·抗氧化功能 | 第26页 |
| ·作为酶的辅因子 | 第26-27页 |
| ·参与细胞分裂 | 第27页 |
| ·参与细胞膨大和细胞壁软化 | 第27页 |
| ·调控开花时间和衰老的启动 | 第27-28页 |
| ·AsA 的生物合成途径 | 第28-37页 |
| ·早期建议 | 第28-30页 |
| ·L-半乳糖途径 | 第30-34页 |
| ·L-半乳糖途径的发现 | 第30-31页 |
| ·L-半乳糖途径的证据 | 第31-34页 |
| ·其它合成途径 | 第34-37页 |
| ·L-古洛糖酸参与的合成途径 | 第34-35页 |
| ·D-半乳糖醛酸途径 | 第35-36页 |
| ·其它途径之间的相关性 | 第36-37页 |
| ·AsA 的氧化降解与再生 | 第37-41页 |
| ·氧化和再生 | 第37-38页 |
| ·降解 | 第38-40页 |
| ·C2/C3 断裂 | 第38-40页 |
| ·C4/C5 断裂 | 第40页 |
| ·接合作用 | 第40-41页 |
| ·AsA 的转运 | 第41-43页 |
| ·胞内转运 | 第41-42页 |
| ·长距离转运 | 第42-43页 |
| ·植物中AsA 积累量的调控 | 第43-51页 |
| ·植物中AsA 形成和积累模式 | 第43-45页 |
| ·生物合成中的调控位点 | 第45-46页 |
| ·AsA 生物合成中相关酶基因及其与AsA 含量的关系 | 第46-50页 |
| ·再生酶与AsA 含量的关系 | 第50-51页 |
| ·目前国内外AsA 研究热点及其存在的主要问题 | 第51-54页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第54-56页 |
| 第二章 苹果果实 AsA形成与积累的生理和分子机理 | 第56-117页 |
| ·苹果AsA 合成和代谢相关基因的克隆 | 第56-68页 |
| ·试验材料 | 第56-57页 |
| ·植物材料 | 第56页 |
| ·菌株与质粒 | 第56页 |
| ·酶及生化试剂 | 第56页 |
| ·主要仪器 | 第56-57页 |
| ·试验方法 | 第57-59页 |
| ·RNA 的提取 | 第57页 |
| ·反转录 | 第57页 |
| ·PCR 引物设计 | 第57-58页 |
| ·PCR 扩增 | 第58页 |
| ·目的DNA 片段的获得 | 第58页 |
| ·目的DNA 与pMD19-T vector 的连接 | 第58-59页 |
| ·重组质粒导入大肠杆菌感受态细胞 | 第59页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第59页 |
| ·基因序列的测定 | 第59页 |
| ·序列分析 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-67页 |
| ·苹果RNA 的提取 | 第59-60页 |
| ·MDHAR 全长cDNA 序列的克隆与分析 | 第60-62页 |
| ·DHAR2 全长cDNA 序列的克隆与分析 | 第62-64页 |
| ·GME 全长cDNA 序列的克隆与分析 | 第64-66页 |
| ·GalUR 部分cDNA 序列的克隆与分析 | 第66-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| ·AsA 在苹果果实中的形成及不同组织中合成和代谢的变化 | 第68-85页 |
| ·试验材料 | 第68-69页 |
| ·试验方法 | 第69-74页 |
| ·AsA 和DHA 含量的测定 | 第69-70页 |
| ·GSH 和GSSG 含量测定 | 第70-71页 |
| ·果实AsA 组织化学定位 | 第71页 |
| ·AsA 合成前体饲喂 | 第71页 |
| ·果柄和叶柄韧皮部汁液中AsA 测定 | 第71-72页 |
| ·苹果不同组织 RNA提取 | 第72页 |
| ·基因表达的半定量分析 | 第72-73页 |
| ·GalLDH 活性测定 | 第73页 |
| ·GalDH 活性测定 | 第73页 |
| ·APX、MDHAR、DHAR 和GR 活性测定 | 第73-74页 |
| ·H_2O_2 含量的测定 | 第74页 |
| ·数据处理 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-84页 |
| ·苹果不同组织中AsA 含量的差异及其在果实不同组织的分配 | 第74-76页 |
| ·苹果果实AsA 的合成能力 | 第76-79页 |
| ·苹果不同组织中AsA 的再生系统 | 第79-82页 |
| ·AsA 的运输 | 第82-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| ·光对苹果果实AsA 形成和代谢的调控 | 第85-97页 |
| ·试验材料及处理 | 第85页 |
| ·试验方法 | 第85-87页 |
| ·AsA 和DHA 含量的测定 | 第85-86页 |
| ·GSH 和GSSG 含量的测定 | 第86页 |
| ·RNA 的提取 | 第86页 |
| ·GalDH 和GalLDH 基因的 Northern blotting | 第86页 |
| ·AsA 合成和代谢相关基因表达的qRT-PCR 分析 | 第86-87页 |
| ·GalDH 和GalLDH 活性测定 | 第87页 |
| ·AsA-GSH 循环系统相关酶活性的测定 | 第87页 |
| ·数据统计与分析 | 第87页 |
| ·结果与分析 | 第87-95页 |
| ·光对苹果叶片、果皮和果肉AsA 水平的影响 | 第87-90页 |
| ·光对苹果叶片、果皮和果肉GSH 水平的影响 | 第90-91页 |
| ·光对苹果叶片、果皮和果肉GalDH 与GalLDH 基因m RNA 表达水平的影响 | 第91-93页 |
| ·光对苹果叶片、果皮和果肉GalDH 与GalLDH 活性的影响 | 第93-94页 |
| ·光对苹果叶片、果皮和果肉APX, DHAR, MDHAR 及GR 活性的影响 | 第94-95页 |
| ·小结 | 第95-97页 |
| ·在苹果果实生长发育过程中AsA 积累及其与合成和代谢调控的关系 | 第97-108页 |
| ·试验材料 | 第97页 |
| ·试验方法 | 第97-99页 |
| ·AsA 和GSH 含量的测定 | 第97页 |
| ·mRNA 的提取 | 第97页 |
| ·基因表达的qRT-PCR 分析 | 第97-98页 |
| ·GalDH 和GalLDH 活性测定 | 第98页 |
| ·AsA-GSH 代谢相关酶活性的测定 | 第98页 |
| ·糖含量的测定 | 第98-99页 |
| ·数据统计与分析 | 第99页 |
| ·结果与分析 | 第99-106页 |
| ·苹果果实发育过程中AsA 水平及其积累量的变化 | 第99-100页 |
| ·苹果果实发育过程中GSH 水平及其积累量的变化 | 第100-101页 |
| ·苹果果实发育过程中AsA 合成酶基因m RNA 相对表达量的变化 | 第101-103页 |
| ·苹果果实发育过程中AsA 合成酶GalLDH 和GalDH 活性的变化 | 第103-104页 |
| ·苹果果实发育过程中AsA 再生酶MDHAR 和DHAR 基因mRNA 相对表达量的变化 | 第104页 |
| ·苹果果实发育过程中AsA-GSH 循环相关酶活性的变化 | 第104-105页 |
| ·苹果果实发育过程中H_2O_2 含量的变化 | 第105-106页 |
| ·苹果果实发育过程中糖含量的变化 | 第106页 |
| ·小结 | 第106-108页 |
| ·不同叶龄苹果叶片中AsA 形成及其与合成和再生调控的关系 | 第108-117页 |
| ·试验材料 | 第108页 |
| ·试验内容与方法 | 第108-109页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第108-109页 |
| ·叶绿体光系统Ⅱ效率的测定 | 第109页 |
| ·H_2O_2 和可溶性蛋白质含量的测定 | 第109页 |
| ·AsA 和GSH 含量的测定 | 第109页 |
| ·前体物饲喂 | 第109页 |
| ·RNA 的提取 | 第109页 |
| ·AsA 合成和代谢酶基因的qRT-PCR 分析 | 第109页 |
| ·GalDH 和GalLDH 活性的测定 | 第109页 |
| ·AsA-GSH 循环系统酶活性的测定 | 第109页 |
| ·数据处理 | 第109页 |
| ·结果与分析 | 第109-116页 |
| ·不同叶龄苹果叶片叶面积、H_2O_2 和叶绿素含量及叶绿体光系统Ⅱ效率的变化 | 第109-110页 |
| ·不同叶龄苹果叶片T-AsA，AsA 和DHA 含量及AsA | 第110-111页 |
| ·不同叶龄苹果叶片T-GSH，GSH 和GSSG 含量及GSH/GSSG 比率的变化 | 第111-112页 |
| ·不同叶龄苹果叶片AsA 合成能力的差异 | 第112页 |
| ·不同叶龄苹果叶片AsA 合成酶基因mRNA 性对表达量的变化 | 第112-114页 |
| ·不同叶龄苹果叶片AsA 合成酶GalLDH 和GalDH 活性的变化 | 第114-115页 |
| ·不同叶龄苹果叶片AsA 再生酶基因mRNA 性对表达量的变化 | 第115页 |
| ·不同叶龄苹果叶片AsA 再生系统酶活性的变化 | 第115-116页 |
| ·小结 | 第116-117页 |
| 第三章 猕猴桃果实中 AsA形成和积累的生理和分子机理 | 第117-166页 |
| ·猕猴桃AsA 合成和代谢部分相关基因的克隆 | 第117-128页 |
| ·材料与方法 | 第117页 |
| ·试验内容与方法 | 第117-118页 |
| ·RNA 的提取与反转录 | 第117页 |
| ·引物设计 | 第117-118页 |
| ·PCR 扩增 | 第118页 |
| ·克隆与测序 | 第118页 |
| ·序列分析 | 第118页 |
| ·结果与分析 | 第118-127页 |
| ·猕猴桃果实RNA 的提取 | 第118-119页 |
| ·美味猕猴桃果实MDHAR 基因部分cDNA 序列克隆与分析 | 第119-120页 |
| ·美味猕猴桃果实DHAR1 基因全长cDNA 序列克隆与分析 | 第120-122页 |
| ·美味猕猴桃果实DHAR2 基因部分cDNA 序列克隆与分析 | 第122-123页 |
| ·美味猕猴桃果实GME 基因部分cDNA 序列克隆与分析 | 第123-125页 |
| ·美味猕猴桃果实GGP 基因cDNA 全长序列克隆与分析 | 第125-127页 |
| ·小结 | 第127-128页 |
| ·猕猴桃不同组织和器官中AsA 含量的变化及其合成和代谢 | 第128-143页 |
| ·试验材料 | 第128-129页 |
| ·实验方法 | 第129-131页 |
| ·AsA 和DHA 含量的测定 | 第129页 |
| ·GSH 和GSSG 含量测定 | 第129页 |
| ·果实AsA 组织化学定位 | 第129页 |
| ·果实中AsA 的细胞观察 | 第129-130页 |
| ·AsA 合成前体饲喂 | 第130页 |
| ·果柄和叶柄韧皮部汁液中AsA 测定AsA 合成前体饲喂 | 第130页 |
| ·猕猴桃不同组织RNA 的提取 | 第130页 |
| ·基因表达半定量分析 | 第130-131页 |
| ·GalLDH 酶活性测定 | 第131页 |
| ·GalDH 酶活性测定 | 第131页 |
| ·AsA-GSH 循环系统相关酶活性测定 | 第131页 |
| ·数据统计与分析 | 第131页 |
| ·结果与分析 | 第131-142页 |
| ·AsA 在猕猴桃果实不同组织中的含量及细胞分布 | 第131-134页 |
| ·猕猴桃不同发育期及组织中AsA 的生物合成 | 第134-137页 |
| ·猕猴桃不同发育期及组织中AsA 再生相关指标的变化 | 第137-140页 |
| ·AsA 的运输 | 第140-142页 |
| ·小结 | 第142-143页 |
| ·光对猕猴桃果实AsA 的调控 | 第143-155页 |
| ·试验材料及其处理 | 第144页 |
| ·试验方法 | 第144-146页 |
| ·AsA 和DHA 含量的测定 | 第144页 |
| ·RNA 的提取 | 第144页 |
| ·基因表达的qRT-PCR 分析 | 第144-145页 |
| ·GalDH 和GalLDH 活性测定 | 第145页 |
| ·AsA-GSH 代谢相关酶活性的测定 | 第145页 |
| ·糖含量的测定 | 第145-146页 |
| ·数据统计与分析 | 第146页 |
| ·结果与分析 | 第146-154页 |
| ·光对猕猴桃果实AsA 含量的影响 | 第146-148页 |
| ·树体遮光对猕猴桃果实不同发育阶段果实大小和AsA 积累量的影响 | 第148-149页 |
| ·猕猴桃果实不同发育阶段树体遮光对果实糖含量的影响 | 第149-150页 |
| ·猕猴桃树体遮光对叶片AsA 合成和再生酶基因m RNA 相对表达量的影响 | 第150-151页 |
| ·猕猴桃树体遮光对叶片AsA合成酶GalLDH 和GalDH及再生酶MDHAR和DHAR 活性的影响 | 第151页 |
| ·猴桃果实不同发育阶段树体遮光对果实AsA 合成酶基因m RNA 相对表达量的影响 | 第151-153页 |
| ·猴桃果实不同发育阶段树体遮光对果实 AsA 合成酶 GalLDH 和GalDH及再生酶 MDHAR 和DHAR 活性的影响 | 第153-154页 |
| ·小结 | 第154-155页 |
| ·猕猴桃果实生长发育过程中AsA 积累及其与合成和代谢调控的关系 | 第155-166页 |
| ·材料与方法 | 第155页 |
| ·试验方法 | 第155-156页 |
| ·AsA 和DHA 含量的测定 | 第155页 |
| ·GSH 和GSSG 含量测定 | 第155页 |
| ·RNA 的提取 | 第155页 |
| ·基因表达的qRT-PCR 分析 | 第155页 |
| ·GalDH 和GalLDH 活性测定 | 第155页 |
| ·AsA-GSH 代谢相关酶活性的测定 | 第155页 |
| ·糖含量的测定 | 第155页 |
| ·OA 和TA 含量的测定 | 第155-156页 |
| ·数据统计与分析 | 第156页 |
| ·结果与分析 | 第156-164页 |
| ·猕猴桃果实发育过程中AsA 水平及其积累量的变化 | 第156-157页 |
| ·猕猴桃果实发育过程中GSH 水平及其积累量的变化 | 第157-158页 |
| ·猕猴桃果实发育过程中AsA 合成酶基因m RNA 性对表达量的变化 | 第158-159页 |
| ·猕猴桃果实发育过程中AsA 合成酶GalLDH 和GalDH 活性的变化 | 第159-160页 |
| ·猕猴桃果实发育过程中AsA 再生酶MDHAR 和DHAR 基因m RNA 性对表达量的变化 | 第160-161页 |
| ·猕猴桃果实发育过程中AsA-GSH 循环相关酶活性的变化 | 第161-162页 |
| ·猕猴桃果实发育过程中H_2O_2 及其OA 和TA 含量的变化 | 第162-163页 |
| ·猕猴桃果实发育过程中碳水化合物含量的变化 | 第163-164页 |
| ·小结 | 第164-166页 |
| 第四章 讨论 | 第166-179页 |
| ·AsA 含量在苹果和猕猴桃果实中存在组织和细胞差异性 | 第166页 |
| ·苹果和猕猴桃果实均具有AsA 合成能力 | 第166-169页 |
| ·运输不是苹果和猕猴桃果实AsA 形成和积累的主要原因 | 第169-171页 |
| ·光通过叶片影响着果实AsA 的合成和积累量 | 第171-172页 |
| ·AsA 积累过程中合成的调控位点分析 | 第172-175页 |
| ·GPP 是否具有调控AsA 合成和积累的能力 | 第175-177页 |
| ·AsA 再生系统（尤其MDHAR）通过维持AsA 的氧化还原状态调控着AsA 含量 | 第177-178页 |
| ·猕猴桃AsA 含量高于苹果的原因分析 | 第178-179页 |
| 第五章 结论 | 第179-182页 |
| 参考文献 | 第182-199页 |
| 附录 | 第199-209页 |
| 缩略词 | 第209-211页 |
| 致谢 | 第211-212页 |
| 个人简介 | 第212页 |
