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猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白在病毒复制过程中的作用研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 引言第14-29页
   ·猪繁殖与呼吸综合征研究进展第14-21页
     ·病原的分类地位及理化特性第14-15页
     ·病毒的基因组结构与病毒的复制第15页
     ·病毒编码的蛋白及其功能第15-19页
     ·临床症状及致病机理第19页
     ·防治现状第19-21页
   ·PRRSV 核衣壳蛋白的研究进展第21-27页
     ·病毒粒子的基本结构及核衣壳的类型第21页
     ·PRRSV N 蛋白的基本理化特性及序列特性第21-22页
     ·N 蛋白的抗原性研究第22页
     ·PRRSV N 蛋白的结构解析第22-23页
     ·PRRSV N 蛋白的功能解析第23-25页
     ·PRRSV N 蛋白的反向遗传操作第25-27页
     ·PRRSV N 蛋白研究的前景及展望第27页
   ·本研究的内容及意义第27-29页
第二章 PRRSV N 蛋白翻译起始位点的研究第29-44页
   ·前言第29页
   ·材料与方法第29-38页
     ·细胞、质粒与病毒第29页
     ·主要试剂第29-30页
     ·主要仪器第30页
     ·质粒或连接产物转化第30页
     ·质粒的提取第30-31页
     ·胶回收第31页
     ·引物设计第31-32页
     ·突变体构建第32-34页
     ·质粒转染第34-35页
     ·病毒传代及细胞上清盲传第35页
     ·病毒上清RNA 的提取第35-36页
     ·细胞总RNA 的提取第36页
     ·RT-PCR 检测病毒基因组及亚基因组第36-37页
     ·一步生长曲线第37-38页
   ·结果第38-43页
     ·全长突变体的构建及鉴定第38-40页
     ·突变体转染及病毒拯救第40-41页
     ·突变病毒的稳定性第41页
     ·突变病毒亚基因组的检测第41-42页
     ·突变病毒的一步生长曲线第42-43页
   ·讨论第43-44页
第三章 PRRSV N 蛋白末端序列在病毒复制过程中的作用研究第44-66页
   ·前言第44页
   ·材料与方法第44-52页
     ·细胞、质粒与病毒第44页
     ·主要试剂第44-45页
     ·主要仪器第45页
     ·质粒或连接产物转化第45页
     ·质粒的提取第45页
     ·胶回收第45页
     ·引物设计第45-46页
     ·突变体构建第46-50页
     ·质粒转染第50-51页
     ·免疫荧光第51页
     ·病毒传代及细胞上清盲传第51页
     ·病毒上清RNA 的提取第51页
     ·细胞总RNA 的提取第51页
     ·RT-PCR 检测病毒基因组及亚基因组第51页
     ·空斑形态及空斑纯化第51-52页
     ·多步生长曲线第52页
   ·结果第52-63页
     ·N 端及C 端缺失突变质粒的构建第52-57页
     ·缺失突变体的转染第57-59页
     ·N 端缺失突变病毒的稳定性及体外生长特性第59-61页
     ·C 端突变病毒的稳定性及体外生长特性第61-63页
   ·讨论第63-66页
第四章 PRRSV N 蛋白中间序列在病毒复制过程中的作用研究第66-78页
   ·前言第66页
   ·材料与方法第66-70页
     ·细胞、质粒与病毒第66页
     ·主要试剂第66页
     ·主要仪器第66页
     ·质粒或连接产物转化第66-67页
     ·质粒的提取第67页
     ·胶回收第67页
     ·引物设计第67页
     ·含中间缺失及双突变的突变体的构建第67-69页
     ·质粒转染第69页
     ·免疫荧光第69页
     ·病毒传代及细胞上清传代第69页
     ·病毒上清RNA 的提取第69页
     ·细胞总RNA 的提取第69-70页
     ·RT-PCR 检测病毒基因组及亚基因组第70页
     ·空斑形态及空斑纯化第70页
     ·多步生长曲线第70页
   ·结果第70-75页
     ·含中间缺失及双突变的突变体的构建第70-72页
     ·突变体对病毒复制转录的影响第72-73页
     ·突变病毒的基因组稳定性第73-74页
     ·突变病毒的体外生长特性第74-75页
   ·讨论第75-78页
第五章 全文结论第78-79页
参考文献第79-89页
致谢第89-90页
作者简历第90页

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