摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 引言 | 第14-29页 |
·猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第14-21页 |
·病原的分类地位及理化特性 | 第14-15页 |
·病毒的基因组结构与病毒的复制 | 第15页 |
·病毒编码的蛋白及其功能 | 第15-19页 |
·临床症状及致病机理 | 第19页 |
·防治现状 | 第19-21页 |
·PRRSV 核衣壳蛋白的研究进展 | 第21-27页 |
·病毒粒子的基本结构及核衣壳的类型 | 第21页 |
·PRRSV N 蛋白的基本理化特性及序列特性 | 第21-22页 |
·N 蛋白的抗原性研究 | 第22页 |
·PRRSV N 蛋白的结构解析 | 第22-23页 |
·PRRSV N 蛋白的功能解析 | 第23-25页 |
·PRRSV N 蛋白的反向遗传操作 | 第25-27页 |
·PRRSV N 蛋白研究的前景及展望 | 第27页 |
·本研究的内容及意义 | 第27-29页 |
第二章 PRRSV N 蛋白翻译起始位点的研究 | 第29-44页 |
·前言 | 第29页 |
·材料与方法 | 第29-38页 |
·细胞、质粒与病毒 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·质粒或连接产物转化 | 第30页 |
·质粒的提取 | 第30-31页 |
·胶回收 | 第31页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·突变体构建 | 第32-34页 |
·质粒转染 | 第34-35页 |
·病毒传代及细胞上清盲传 | 第35页 |
·病毒上清RNA 的提取 | 第35-36页 |
·细胞总RNA 的提取 | 第36页 |
·RT-PCR 检测病毒基因组及亚基因组 | 第36-37页 |
·一步生长曲线 | 第37-38页 |
·结果 | 第38-43页 |
·全长突变体的构建及鉴定 | 第38-40页 |
·突变体转染及病毒拯救 | 第40-41页 |
·突变病毒的稳定性 | 第41页 |
·突变病毒亚基因组的检测 | 第41-42页 |
·突变病毒的一步生长曲线 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
第三章 PRRSV N 蛋白末端序列在病毒复制过程中的作用研究 | 第44-66页 |
·前言 | 第44页 |
·材料与方法 | 第44-52页 |
·细胞、质粒与病毒 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44-45页 |
·主要仪器 | 第45页 |
·质粒或连接产物转化 | 第45页 |
·质粒的提取 | 第45页 |
·胶回收 | 第45页 |
·引物设计 | 第45-46页 |
·突变体构建 | 第46-50页 |
·质粒转染 | 第50-51页 |
·免疫荧光 | 第51页 |
·病毒传代及细胞上清盲传 | 第51页 |
·病毒上清RNA 的提取 | 第51页 |
·细胞总RNA 的提取 | 第51页 |
·RT-PCR 检测病毒基因组及亚基因组 | 第51页 |
·空斑形态及空斑纯化 | 第51-52页 |
·多步生长曲线 | 第52页 |
·结果 | 第52-63页 |
·N 端及C 端缺失突变质粒的构建 | 第52-57页 |
·缺失突变体的转染 | 第57-59页 |
·N 端缺失突变病毒的稳定性及体外生长特性 | 第59-61页 |
·C 端突变病毒的稳定性及体外生长特性 | 第61-63页 |
·讨论 | 第63-66页 |
第四章 PRRSV N 蛋白中间序列在病毒复制过程中的作用研究 | 第66-78页 |
·前言 | 第66页 |
·材料与方法 | 第66-70页 |
·细胞、质粒与病毒 | 第66页 |
·主要试剂 | 第66页 |
·主要仪器 | 第66页 |
·质粒或连接产物转化 | 第66-67页 |
·质粒的提取 | 第67页 |
·胶回收 | 第67页 |
·引物设计 | 第67页 |
·含中间缺失及双突变的突变体的构建 | 第67-69页 |
·质粒转染 | 第69页 |
·免疫荧光 | 第69页 |
·病毒传代及细胞上清传代 | 第69页 |
·病毒上清RNA 的提取 | 第69页 |
·细胞总RNA 的提取 | 第69-70页 |
·RT-PCR 检测病毒基因组及亚基因组 | 第70页 |
·空斑形态及空斑纯化 | 第70页 |
·多步生长曲线 | 第70页 |
·结果 | 第70-75页 |
·含中间缺失及双突变的突变体的构建 | 第70-72页 |
·突变体对病毒复制转录的影响 | 第72-73页 |
·突变病毒的基因组稳定性 | 第73-74页 |
·突变病毒的体外生长特性 | 第74-75页 |
·讨论 | 第75-78页 |
第五章 全文结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
作者简历 | 第90页 |