| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1 花器官的形成过程 | 第14-17页 |
| ·成花诱导 | 第14-17页 |
| ·光周期诱导途径 | 第14-15页 |
| ·春化作用途径 | 第15-16页 |
| ·自主途径 | 第16页 |
| ·赤霉素(GA)诱导途径 | 第16-17页 |
| ·花的发端 | 第17页 |
| ·花器官的发育 | 第17页 |
| 2 FT及其同源基因 | 第17-23页 |
| ·FT基因的起源——开花素学说 | 第17-18页 |
| ·开花过程的相关基因及其功能 | 第18-21页 |
| ·FT基因的研究进展 | 第21-23页 |
| 3 半定量RT-PCR技术 | 第23-24页 |
| 4 基于PCR的染色体步移技术 | 第24-26页 |
| 第二章 苹果FT基因的克隆与表达分析 | 第26-38页 |
| 1 材料 | 第27页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌种及试剂 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-31页 |
| ·苹果FT基因的克隆 | 第27-30页 |
| ·总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·基因组DNA的消化 | 第28页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第28页 |
| ·苹果FT基因编码区的扩增 | 第28-29页 |
| ·PCR产物的回收 | 第29页 |
| ·目的片段的连接,转化及测序 | 第29-30页 |
| ·FT基因3'RACE扩增 | 第30页 |
| ·生物信息学分析 | 第30页 |
| ·苹果FT基因的半定量RT-PCR分析 | 第30-31页 |
| ·不同组织RNA的提取及消化 | 第30页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR分析 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-36页 |
| ·总RNA提取 | 第31-32页 |
| ·苹果FT基因cDNA序列的获得 | 第32页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第32-35页 |
| ·MdFT3基因在苹果不同器官中的时空表达分析 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章 苹果FT基因启动子的克隆及序列分析 | 第38-52页 |
| 1 材料 | 第38-39页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| 2 方法 | 第39-43页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第39页 |
| ·DNA质量检测方法 | 第39页 |
| ·FT基因组DNA的克隆 | 第39-40页 |
| ·FT基因上游调控序列的克隆 | 第40-43页 |
| ·接头、引物设计与合成 | 第41-42页 |
| ·基因组步移文库构建 | 第42页 |
| ·PCR反应 | 第42-43页 |
| ·启动子序列分析 | 第43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-48页 |
| ·FT基因组DNA序列的克隆 | 第43页 |
| ·FT基因上游调控序列的克隆与分析 | 第43-48页 |
| ·基因组DNA的酶切、接头连接 | 第43-44页 |
| ·Touch-Down PCR | 第44页 |
| ·序列分析及顺式元件预测 | 第44-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| 第四章 苹果FT启动子不同区段表达载体构建及GUS基因的瞬时表达分析 | 第52-62页 |
| 1 材料 | 第53页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·菌株和质粒 | 第53页 |
| ·分子生物学试剂 | 第53页 |
| 2 方法 | 第53-57页 |
| ·烟草无菌苗的获得 | 第53页 |
| ·FT基因启动子不同区段连接GUS基因的植物表达载体的构建 | 第53-56页 |
| ·农杆菌介导的烟草叶片转化 | 第56-57页 |
| ·将载体质粒转入农杆菌 | 第56-57页 |
| ·农杆菌菌株的活化 | 第57页 |
| ·烟草叶盘法遗传转化 | 第57页 |
| ·GUS基因表达的组织化学检测 | 第57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-60页 |
| ·FT基因启动子不同区段连接GUS基因的植物表达载体的构建 | 第58-59页 |
| ·农杆菌介导烟草叶片GUS基因的组织化学检测 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 全文结论 | 第62-64页 |
| 创新之处 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 附录 | 第74-80页 |
| 附录1 本论文中常用试剂及培养基的配置 | 第75-77页 |
| 附录2 本论文中所用的DH5α感受态CCMB80的制备 | 第77-79页 |
| 附录3 根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第79-80页 |
| 硕士在读期间发表的论文 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
