摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
英文缩写表 | 第9-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
·植物水孔蛋白的研究进展 | 第11-17页 |
·水孔蛋白的发现 | 第11-12页 |
·植物水孔蛋白的结构特征及分类 | 第12页 |
·植物水孔蛋白的生化特性 | 第12-13页 |
·植物水孔蛋白的主要功能 | 第13-14页 |
·水孔蛋白的调节 | 第14-17页 |
·关于RNA干扰 | 第17-18页 |
第二章 实验材料和涉及的方法技术 | 第18-21页 |
·实验材料 | 第18页 |
·仪器设备 | 第18页 |
·植物材料 | 第18页 |
·菌株和质粒 | 第18页 |
·分子生物学试剂 | 第18页 |
·涉及的分子生物学基本方法技术 | 第18-21页 |
·碱裂解法小量提取质粒DNA | 第18-19页 |
·植物总DNA的提取 | 第19页 |
·植物总RNA提取方法 | 第19页 |
·大肠杆菌和农杆菌感受态细胞的制备 | 第19-20页 |
·DNA的回收 | 第20页 |
·热激法转化(大肠杆菌) | 第20页 |
·冻融法转化(农杆菌) | 第20页 |
·质粒DNA的酶切 | 第20-21页 |
第三章 棉花水孔蛋白基因的克隆、植物表达载体的构建及其对烟草的转化 | 第21-28页 |
·材料与方法 | 第21-24页 |
·材料 | 第21页 |
·方法 | 第21-24页 |
·结果与分析 | 第24-28页 |
·棉花叶片水孔蛋白基因的克隆 | 第24-26页 |
·植物表达载体pBI121-GhPIP的构建及其鉴定 | 第26页 |
·含pBI121-GhPIP重组质粒的农杆菌GV3101菌株的鉴定 | 第26页 |
·转基因烟草的PCR和RT-PCR检测 | 第26-28页 |
第四章 RNA干扰载体的构建及其对棉花愈伤组织的转化 | 第28-36页 |
·材料与方法 | 第28-32页 |
·材料 | 第28页 |
·方法 | 第28-32页 |
·结果与分析 | 第32-36页 |
·干扰片段的PCR扩增和XhoⅠ/BglⅡ双酶切pGM-iGhPIP质粒电泳图 | 第32页 |
·正向片段连接到中间载体的PCR检测和酶切检测 | 第32-33页 |
·反向片段连接到中间载体的PCR检测和酶切检测 | 第33-34页 |
·pCAM2300-iGhPIP的PCR检测和酶切检测 | 第34页 |
·农杆菌转化子的PCR检测 | 第34-35页 |
·棉花愈伤组织的诱导和转化 | 第35-36页 |
第五章 结论与讨论 | 第36-38页 |
·实验结论 | 第36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
·关于棉花水孔蛋白基因和水孔蛋白 | 第36-37页 |
·关于棉花愈伤组织的培养和转化 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
附录一 主要技术路线 | 第42-43页 |
附录二 GhPIP基因序列比对 | 第43-50页 |
附录三 RNA干扰载体的构建示意图 | 第50-51页 |
附录四 常用培养基及溶液配制 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54-55页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第55页 |