摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
1 引言 | 第11-21页 |
·猪圆环病毒2 型的国内外研究概况 | 第11-18页 |
·病原学 | 第11-12页 |
·流行病学 | 第12-13页 |
·PCV2 致病机制 | 第13-16页 |
·PCV2 的诊断 | 第16-17页 |
·PCV2 的防治 | 第17-18页 |
·研究内容和技术路线 | 第18-19页 |
·研究内容 | 第18-19页 |
·技术路线(见下页) | 第19页 |
·研究目的与意义 | 第19页 |
·研究目标 | 第19-21页 |
2 材料 | 第21-27页 |
·毒株 | 第21页 |
·菌株和载体 | 第21页 |
·实验动物 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-25页 |
·RNA 和DNA 提取试剂 | 第21-22页 |
·细胞培养用溶液 | 第22-23页 |
·试剂 | 第23页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备及转化用溶液 | 第23-24页 |
·质粒DNA 提取用溶液 | 第24-25页 |
·琼脂糖凝胶电泳用溶液 | 第25页 |
·流式细胞术(FCM)检测用标记抗体 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-27页 |
3 方法 | 第27-37页 |
·PCR 用引物的设计与合成 | 第27-28页 |
·PAM 抗原递呈功能相关分子、细胞因子和PCV2、PPV 的相关基因片段的重组质粒的构建 | 第28-32页 |
·肺泡巨噬细胞的收集 | 第28页 |
·肺泡巨噬细胞总RNA 的提取 | 第28-29页 |
·PCV2 与PPV DNA 的提取 | 第29页 |
·共刺激分子和细胞因子及 PCV2、PPV 的部分基因片段重组质粒的构建 | 第29-32页 |
·动物实验 | 第32-37页 |
·试验动物分组与感染 | 第32页 |
·PCV2 与PPV 抗体检测 | 第32-33页 |
·PAM 活性检测 | 第33-34页 |
·病毒、细胞因子和CD 分子标准曲线的建立 | 第34页 |
·PAM 中PCV2、PPV 病毒载量的检测 | 第34-35页 |
·PAM 细胞因子表达水平的检测 | 第35-36页 |
·PAM 主要抗原递呈相关分子的检测 | 第36页 |
·数据表示和统计分析 | 第36-37页 |
4 结果与分析 | 第37-76页 |
·PAM 共刺激分子、细胞因子和PCV2、PPV 目的基因片段重组质粒的鉴定 | 第37-39页 |
·PAM 共刺激分子、细胞因子和PCV2、PPV 目的基因片段标准曲线的建立 | 第39-45页 |
·血清中PCV2 和PPV 抗体检测 | 第45-46页 |
·PAM 中PCV2 与PPV 的含量 | 第46-48页 |
·PAM 中PCV2 核酸的含量 | 第46-47页 |
·PAM 中PPV 核酸的含量 | 第47-48页 |
·PCV2/PPV 共感染对PAM 存活率与吞噬功能的影响 | 第48-56页 |
·PCV2/PPV 共感染对PAM 存活率的影响 | 第48-52页 |
·PCV2/PPV 共感染对PAM 吞噬功能的影响 | 第52-56页 |
·PCV2/PPV 共感染对PAM 中细胞因子表达水平的影响 | 第56-69页 |
·病毒感染猪PAM 表达促炎细胞因子水平的变化 | 第56-60页 |
·病毒感染猪PAM 表达趋化细胞因子水平的变化 | 第60-64页 |
·病毒感染猪PAM 表达调节细胞因子的水平变化 | 第64-69页 |
·PAM 抗原递呈相关分子表达水平的变化 | 第69-76页 |
·PAM 表面SLA-1 和SLA-DR 分子含量的动态变化 | 第69-73页 |
·PAM 中共刺激分子CD80 mRNA 和CD86 mRNA 的动态变化 | 第73-76页 |
5 讨论 | 第76-82页 |
·Real-time FQ-PCR 标准曲线的建立 | 第76-77页 |
·管家基因的确定 | 第76页 |
·定量方法的确定 | 第76页 |
·Real-time FQ-PCR 存在的问题 | 第76-77页 |
·PAM 活性和吞噬功能动态 | 第77-78页 |
·PAM 表达抗原递呈功能相关分子和细胞因子的动态 | 第78-82页 |
·PCV2 和PPV 共感染对PAM 促炎细胞因子mRNA 水平的影响 | 第78-79页 |
·PCV2 和PPV 共感染对PAM 趋化细胞因子mRNA 水平的影响 | 第79页 |
·PCV2 和PPV 共感染对PAM 调节细胞因子mRNA 水平的影响 | 第79-80页 |
·PAM 表面SLA-1 和SLA-DR 类分子含量的动态变化 | 第80-81页 |
·PAM 中共刺激分子CD80 mRNA 和CD86 mRNA 的动态变化 | 第81-82页 |
6 结论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-89页 |
附录 | 第89-91页 |
在读期间发表的学术论文与获得的研究成果 | 第91-92页 |
作者简介 | 第92-93页 |
致谢 | 第93-94页 |