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亚洲玉米螟GOBPs和18SrRNA基因的克隆、序列分析与表达

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-25页
   ·昆虫的嗅觉第9-21页
     ·昆虫感知的气味化合物第9-10页
     ·昆虫触角的化学感器第10-11页
     ·昆虫嗅觉系统相关蛋白第11-19页
       ·气味结合蛋白第11-14页
       ·化学感受蛋白第14-16页
       ·气味受体蛋白第16-17页
       ·气味降解酶第17-18页
       ·感觉神经元膜蛋白第18-19页
     ·昆虫嗅觉系统识别气味的过程第19-21页
       ·Perireceptor events第19-20页
       ·信号传导过程(Transduction events)第20-21页
   ·18S 核糖体 RNA 基因第21-25页
     ·18S rRNA 基因在昆虫分子系统学研究中的应用第21-23页
     ·18S rRNA 基因作为内参基因的应用第23-25页
2 引言第25-26页
3 材料与方法第26-38页
   ·试验材料第26-29页
     ·供试昆虫第26页
     ·供试菌种及质粒第26页
     ·主要试剂及工具酶第26页
     ·供试试剂盒第26页
     ·缓冲溶液第26-27页
     ·培养基第27页
     ·碱法小量质粒抽提液第27页
     ·SDS-PAGE 电泳试剂第27-28页
     ·Western blot 所用溶液第28页
     ·其他溶液第28-29页
   ·试验方法第29-38页
     ·亚洲玉米螟 GOBPs 基因的克隆第29-32页
       ·总 RNA 提取第29页
       ·引物设计第29页
       ·RT-PCR第29-30页
       ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳检测第30页
       ·PCR 产物纯化第30页
       ·质粒的连接第30-31页
       ·感受态细胞的制备(CaCl_2 法)第31页
       ·连接载体的转化第31页
       ·阳性克隆的筛选第31页
       ·质粒DNA 的提取第31-32页
       ·重组质粒的酶切鉴定第32页
       ·序列测定和分析第32页
     ·3'RACE 获取GOBP2 3'末端序列第32-34页
       ·总RNA 提取第32页
       ·3'RACE 引物设计第32-33页
       ·反转录反应第33页
       ·套式PCR 反应第33-34页
       ·3'RACE 其他步骤第34页
     ·亚洲玉米螟18S rRNA 基因的克隆与序列分析第34-35页
       ·亚洲玉米螟幼虫DNA 的提取第34-35页
       ·引物设计第35页
       ·PCR 扩增第35页
       ·18S rRNA 克隆的其他步骤第35页
     ·亚洲玉米螟GOBPs 基因表达的半定量分析第35-36页
       ·不同龄期和不同组织总RNA 的提取第35页
       ·总RNA 反转录cDNA第35-36页
       ·引物设计第36页
       ·PCR 扩增第36页
       ·琼脂糖电泳检测第36页
     ·GOBP2 抗血清特异性检测第36-38页
4 结果与分析第38-53页
   ·亚洲玉米螟GOBP2 基因的克隆第38页
   ·亚洲玉米螟GOBP2 基因的序列测定和分析第38-43页
     ·亚洲玉米螟GOBP2 序列测定第38-40页
     ·亚洲玉米螟GOBP2 氨基酸序列多重联配和同源性比较第40-41页
     ·OfurGOBP2 与其他昆虫GOBP2 系统发育树的构建第41-42页
     ·亚洲玉米螟 GOBP2 亲脂性分析第42-43页
   ·亚洲玉米螟GOBP1 基因片段的克隆第43页
   ·亚洲玉米螟GOBP1 基因片段的序列测定和分析第43-46页
     ·GOBP1 序列测定第43-44页
     ·GOBP1 氨基酸多重联配和同源性分析第44-45页
     ·OfurGOBP1 与其他昆虫GOBP1 系统发育树的构建第45-46页
   ·亚洲玉米螟18S rRNA 基因的克隆第46-47页
   ·亚洲玉米螟18S rRNA 基因序列测定和分析第47-52页
     ·18S rRNA 基因序列测定第47-49页
     ·基于18S rRNA 基因全长序列和第二保守区段构建发育树第49-52页
   ·亚洲玉米螟GOBPs 基因表达的半定量分析第52页
   ·亚洲玉米螟GOBP2 抗血清特异性检测第52-53页
5 结论与讨论第53-56页
   ·结论第53-54页
   ·讨论第54-56页
参考文献(References)第56-68页
ABSTRACT第68-69页

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