| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 目次 | 第9-12页 |
| 1 引言 | 第12-31页 |
| ·烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒概述 | 第12-14页 |
| ·烟草花叶病毒研究进展 | 第12-14页 |
| ·黄瓜花叶病毒研究进展 | 第14页 |
| ·植物病毒病控制方法 | 第14-31页 |
| ·外壳蛋白介导的抗性 | 第15页 |
| ·复制酶介导的抗性 | 第15-17页 |
| ·移动蛋白介导的抗性 | 第17-18页 |
| ·肽段介导的抗性 | 第18页 |
| ·非病毒来源介导的抗性 | 第18-19页 |
| ·RNA介导的植物抗病毒基因工程 | 第19-31页 |
| 2 方法 | 第31-42页 |
| ·普通PCR技术 | 第31页 |
| ·PCR产物纯化 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第32-33页 |
| ·番茄叶片感染与卡那霉素抗性植株的再生 | 第33-34页 |
| ·摩擦接种病毒 | 第34页 |
| ·ELISA检测 | 第34-35页 |
| ·植物总DNA提取(CTAB法) | 第35-36页 |
| ·Southern blot分析 | 第36-38页 |
| ·植物RNA提取 | 第38-39页 |
| ·Northern blot分析 | 第39-42页 |
| 3 转反向重复CMV△Rep基因烟草的抗病性和分子生物学检测分析 | 第42-62页 |
| ·材料和方法 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-60页 |
| ·T0代转基因植株的获得及相关分析 | 第43-44页 |
| ·T1代抗CMV转基因烟草的拷贝数检测及抗病性分析 | 第44-46页 |
| ·T2代转基因烟草植株对CMV的抗性分析和分子生物学检测 | 第46-51页 |
| ·T2代转基因烟草对CMV-RB的抗病性分析 | 第46-48页 |
| ·T2代抗CMV转基因烟草总DNA的Southern blot杂交分析 | 第48-51页 |
| ·T3代转基因烟草植株对CMV的抗性分析和分子生物学检测 | 第51页 |
| ·T4代转基因烟草植株对CMV的抗性分析和分子生物学检测 | 第51-60页 |
| ·T4代的发病症状观察 | 第51-52页 |
| ·T4代抗CMV转基因烟草接种CMV-RB后病毒积累量分析 | 第52-54页 |
| ·T4代抗CMV转基因烟草总DNA的Southern杂交分析 | 第54-55页 |
| ·T4代抗CMV转基因烟草的Northern blot和siRNA检测分析 | 第55-56页 |
| ·T4代抗CMV转基因烟草植株与野生烟草的生长性状比较 | 第56-57页 |
| ·T4代抗CMV转基因烟草在不同生长温度下的抗性分析 | 第57-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 4 转反向重复TMVA△MP基因烟草的抗病性和分子生物学检测分析 | 第62-83页 |
| ·材料和方法 | 第62-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-80页 |
| ·T0代转基因植株的获得及相关分析 | 第63-64页 |
| ·T1代抗TMV转基因烟草的拷贝数检测及抗病性分析 | 第64-67页 |
| ·T2代转基因烟草植株对TMV的抗性分析和分子生物学检测 | 第67-71页 |
| ·T3代转基因烟草植株对TMV的抗性分析和分子生物学检测 | 第71-72页 |
| ·T4代转基因烟草植株对TMV的抗性分析和分子生物学检测 | 第72-77页 |
| ·CMV对抗TMV转基因烟草抗性的影响分析 | 第77-80页 |
| ·讨论 | 第80-83页 |
| 5 转反向重复CMV△Rep基因的T0代抗CMV转基因番茄苗的获得及初步鉴定 | 第83-90页 |
| ·材料和方法 | 第83-84页 |
| ·结果与分析 | 第84-88页 |
| ·通过转化含反向重复△Rep基因的表达载体获得卡那抗性番茄植株 | 第84-85页 |
| ·组培转基因番茄植株对CMV-RB的抗病性分析 | 第85-87页 |
| ·转反向重复△Rep基因转基因番茄的分子生物学检测 | 第87-88页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第87-88页 |
| ·转基因植株的印迹点杂交 | 第88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| 6 全文小结 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-104页 |
| 附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第104-105页 |
| 附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第105-110页 |
