致谢 | 第1-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
缩略语表 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-24页 |
·磷信号调控根系构型 | 第16-19页 |
·以PHR1为中心的磷信号系统 | 第16-17页 |
·缺磷调控根系构型的分子机制 | 第17-19页 |
·低磷条件下根系生长进程。 | 第17页 |
·拟南芥根构型适应磷胁迫改变的分子机制 | 第17-18页 |
·主根的缺磷抑制受多基因调控 | 第18-19页 |
·磷信号与细胞分裂素信号间的互作 | 第19-21页 |
·细胞分裂素影响植株发育 | 第19-21页 |
·细胞分裂素抑制缺磷诱导基因的表达 | 第21页 |
·钙调蛋白结合转录激活子调控机制 | 第21-23页 |
·假设 | 第23-24页 |
第二章 突变体筛选及表型分析 | 第24-48页 |
·材料与方法 | 第24-34页 |
·材料 | 第24页 |
·方法 | 第24-29页 |
·拟南芥生长环境 | 第24页 |
·拟南芥种子表面灭菌 | 第24-25页 |
·培养皿播种培养 | 第25页 |
·突变体筛选及表型试验 | 第25页 |
·突变体与CycB1:GUS株系的杂交和组织染色 | 第25-26页 |
·GUS染色及根系透明 | 第26页 |
·内源CTK测定方法 | 第26-28页 |
·其他生理表型测定方法 | 第28-29页 |
·培养基及试剂配方 | 第29-31页 |
·Johnson培养基配方(Ma et al.,2001) | 第29-30页 |
·拟南芥营养液配方: | 第30页 |
·GUS染液的配制: | 第30-31页 |
·淀粉粒染色液配方(Acid lngol's solution): | 第31页 |
·RNA提取及RT-PCR | 第31-34页 |
·RNA提取 | 第31页 |
·RNA的逆转录 | 第31-32页 |
·定量PCR | 第32页 |
·引物序列 | 第32-34页 |
·结果 | 第34-46页 |
·缺磷超敏突变体的获得 | 第34-35页 |
·突变体对磷胁迫超敏具有特异性 | 第35-36页 |
·突变体对外源CTK的反应 | 第36-37页 |
·突变体cks1对其他激素的反应 | 第37页 |
·突变体cks1在磷饥饿条件下根系生长的变化 | 第37-38页 |
·突变体cks1的主根伸长区变短 | 第38页 |
·突变体cks1的主根分生区减小 | 第38-40页 |
·缺磷下cks1根冠柱功能细胞迅速丧失活力 | 第40-41页 |
·缺磷下突变体cks1主根根尖分生活力下降 | 第41页 |
·突变体cks1植株内磷浓度分析 | 第41页 |
·突变体cks1表型可被磷类似物所拯救 | 第41页 |
·CKS1是早期磷信号的响应因子 | 第41-43页 |
·CKS1的突变对PSI基因转录水平的影响 | 第43-44页 |
·突变体中CTK含量的变化 | 第44-45页 |
·CTK合成相关基因的表达在突变体内的变化 | 第45页 |
·CTK信号在缺磷条件下的调整 | 第45-46页 |
·小结及讨论 | 第46-48页 |
第三章 CKS1基因克隆 | 第48-61页 |
·材料与方法 | 第48-56页 |
·材料 | 第48页 |
·方法 | 第48-56页 |
·Tail-PCR获得插入位点 | 第48-50页 |
·F2群体构建及遗传分析 | 第50-51页 |
·F2群体DNA提取 | 第51页 |
·图位克隆的方法 | 第51-53页 |
·RNA提取及RT-PCR | 第53页 |
·回复载体构建 | 第53-54页 |
·拟南芥转基因 | 第54页 |
·引物序列 | 第54-56页 |
·结果 | 第56-60页 |
·Tail-PCR插入位点分析 | 第56页 |
·遗传分析 | 第56-58页 |
·基因定位分析 | 第58-59页 |
·转基因回复验证 | 第59-60页 |
·At2g22300的基因表达 | 第60页 |
·小结及讨论 | 第60-61页 |
第四章、生物信息学分析 | 第61-66页 |
·材料与方法 | 第61-62页 |
·材料 | 第61页 |
·方法 | 第61-62页 |
·基因家族进化分析 | 第61页 |
·亚家族同源性分析 | 第61页 |
·启动子结构域分析 | 第61-62页 |
·结果 | 第62-65页 |
·进化树分析 | 第62-63页 |
·结构域同源性分析 | 第63页 |
·启动子结构域筛选可能的下游基因 | 第63-64页 |
·下游基因突变体分析 | 第64-65页 |
·小结及讨论 | 第65-66页 |
第五章 结论与展望 | 第66-69页 |
·AtCMTA3参与磷胁迫信号 | 第66-67页 |
·AtCMTA3参与CTK合成途径 | 第67页 |
·AtCMTA3参与CTK信号转导途径 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
附录 | 第76页 |