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拟南芥缺磷超敏突变体cks1的研究

致谢第1-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-15页
缩略语表第15-16页
第一章 文献综述第16-24页
   ·磷信号调控根系构型第16-19页
     ·以PHR1为中心的磷信号系统第16-17页
     ·缺磷调控根系构型的分子机制第17-19页
       ·低磷条件下根系生长进程。第17页
       ·拟南芥根构型适应磷胁迫改变的分子机制第17-18页
       ·主根的缺磷抑制受多基因调控第18-19页
   ·磷信号与细胞分裂素信号间的互作第19-21页
       ·细胞分裂素影响植株发育第19-21页
       ·细胞分裂素抑制缺磷诱导基因的表达第21页
   ·钙调蛋白结合转录激活子调控机制第21-23页
   ·假设第23-24页
第二章 突变体筛选及表型分析第24-48页
     ·材料与方法第24-34页
     ·材料第24页
     ·方法第24-29页
         ·拟南芥生长环境第24页
         ·拟南芥种子表面灭菌第24-25页
         ·培养皿播种培养第25页
         ·突变体筛选及表型试验第25页
         ·突变体与CycB1:GUS株系的杂交和组织染色第25-26页
         ·GUS染色及根系透明第26页
         ·内源CTK测定方法第26-28页
         ·其他生理表型测定方法第28-29页
     ·培养基及试剂配方第29-31页
       ·Johnson培养基配方(Ma et al.,2001)第29-30页
       ·拟南芥营养液配方:第30页
       ·GUS染液的配制:第30-31页
       ·淀粉粒染色液配方(Acid lngol's solution):第31页
     ·RNA提取及RT-PCR第31-34页
       ·RNA提取第31页
       ·RNA的逆转录第31-32页
       ·定量PCR第32页
       ·引物序列第32-34页
   ·结果第34-46页
     ·缺磷超敏突变体的获得第34-35页
       ·突变体对磷胁迫超敏具有特异性第35-36页
       ·突变体对外源CTK的反应第36-37页
     ·突变体cks1对其他激素的反应第37页
     ·突变体cks1在磷饥饿条件下根系生长的变化第37-38页
       ·突变体cks1的主根伸长区变短第38页
       ·突变体cks1的主根分生区减小第38-40页
       ·缺磷下cks1根冠柱功能细胞迅速丧失活力第40-41页
       ·缺磷下突变体cks1主根根尖分生活力下降第41页
       ·突变体cks1植株内磷浓度分析第41页
       ·突变体cks1表型可被磷类似物所拯救第41页
       ·CKS1是早期磷信号的响应因子第41-43页
       ·CKS1的突变对PSI基因转录水平的影响第43-44页
       ·突变体中CTK含量的变化第44-45页
       ·CTK合成相关基因的表达在突变体内的变化第45页
     ·CTK信号在缺磷条件下的调整第45-46页
   ·小结及讨论第46-48页
第三章 CKS1基因克隆第48-61页
   ·材料与方法第48-56页
     ·材料第48页
     ·方法第48-56页
       ·Tail-PCR获得插入位点第48-50页
       ·F2群体构建及遗传分析第50-51页
       ·F2群体DNA提取第51页
       ·图位克隆的方法第51-53页
       ·RNA提取及RT-PCR第53页
       ·回复载体构建第53-54页
       ·拟南芥转基因第54页
       ·引物序列第54-56页
   ·结果第56-60页
     ·Tail-PCR插入位点分析第56页
     ·遗传分析第56-58页
     ·基因定位分析第58-59页
     ·转基因回复验证第59-60页
     ·At2g22300的基因表达第60页
   ·小结及讨论第60-61页
第四章、生物信息学分析第61-66页
   ·材料与方法第61-62页
     ·材料第61页
     ·方法第61-62页
       ·基因家族进化分析第61页
       ·亚家族同源性分析第61页
       ·启动子结构域分析第61-62页
   ·结果第62-65页
     ·进化树分析第62-63页
     ·结构域同源性分析第63页
     ·启动子结构域筛选可能的下游基因第63-64页
     ·下游基因突变体分析第64-65页
   ·小结及讨论第65-66页
第五章 结论与展望第66-69页
     ·AtCMTA3参与磷胁迫信号第66-67页
     ·AtCMTA3参与CTK合成途径第67页
     ·AtCMTA3参与CTK信号转导途径第67-69页
参考文献第69-76页
附录第76页

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