本论文的创新点 | 第6-14页 |
摘要 | 第14-16页 |
ABSTRACT | 第16页 |
缩略语 | 第17-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-50页 |
1.1 伏马菌素FB1的研究进展 | 第18-23页 |
1.1.1 串珠镰刀菌简介 | 第18页 |
1.1.2 FB1的发现及结构 | 第18-19页 |
1.1.3 外源FB1对动物的危害及可能的作用机制 | 第19-21页 |
1.1.4 外源FB1对植物的危害及可能的作用机制 | 第21-23页 |
1.2 鞘脂类研究进展 | 第23-35页 |
1.2.1 鞘脂分类及结构 | 第23-25页 |
1.2.2 鞘脂合成代谢途径 | 第25页 |
1.2.3 鞘脂的功能 | 第25-32页 |
1.2.3.1 鞘脂在细胞膜上的功能 | 第28-29页 |
1.2.3.1.1 鞘脂是细胞膜的重要组分 | 第28页 |
1.2.3.1.2 鞘脂在膜运输中的重要作用 | 第28-29页 |
1.2.3.2 鞘脂的信使功能 | 第29-32页 |
1.2.3.2.1 鞘脂参与调控程序性细胞死亡和自噬 | 第30页 |
1.2.3.2.2 鞘脂参与调控植物对生物胁迫的响应 | 第30-31页 |
1.2.3.2.3 鞘脂参与调控植物对非生物胁迫的响应 | 第31-32页 |
1.2.4 鞘氨醇-1-磷酸的研究进展 | 第32-35页 |
1.2.4.1 动物细胞鞘氨醇-1-磷酸的研究进展 | 第33-34页 |
1.2.4.2 植物细胞鞘氨醇-1-磷酸的研究进展 | 第34-35页 |
1.3 鞘氨醇激酶的研究进展 | 第35-37页 |
1.3.1 动物鞘氨醇激酶的研究进展 | 第35-36页 |
1.3.2 植物鞘氨醇激酶的研究进展 | 第36-37页 |
1.4 植物超敏反应的研究进展 | 第37-38页 |
1.5 细胞程序性死亡的研究进展 | 第38-39页 |
1.6 活性氧及其作用机制的研究进展 | 第39-41页 |
1.7 水杨酸功能机制的研究进展 | 第41-45页 |
1.8 茉莉酸功能机制的研究进展 | 第45-46页 |
1.9 非生物胁迫研究进展 | 第46-48页 |
1.9.1 百草枯胁迫 | 第47页 |
1.9.2 高盐胁迫 | 第47-48页 |
1.10 本研究的目的与意义 | 第48-50页 |
第二章 实验材料与方法 | 第50-61页 |
2.1 实验材料 | 第50-52页 |
2.1.1 植物材料 | 第50页 |
2.1.2 质粒与菌株 | 第50页 |
2.1.3 生化药品 | 第50-52页 |
2.1.4 试剂盒 | 第52页 |
2.2 试剂及培养基的配制 | 第52-53页 |
2.2.1 Hoagland's营养液的配制 | 第52页 |
2.2.2 植物组织基因组DNA粗提提取液的配制 | 第52页 |
2.2.3 LB细菌培养基的配制 | 第52-53页 |
2.2.4 1/2MS植物培养基的配制 | 第53页 |
2.3 实验方法 | 第53-61页 |
2.3.1 进化树的构建 | 第53-54页 |
2.3.2 拟南芥的培养与种植 | 第54页 |
2.3.3 种子萌发实验 | 第54页 |
2.3.4 叶片基因组DNA的粗提取 | 第54页 |
2.3.5 叶片总RNA的提取与反转录 | 第54-55页 |
2.3.6 实时荧光定量PCR分析 | 第55-56页 |
2.3.7 启动子驱动报告基因GUS的载体构建及转化 | 第56页 |
2.3.8 拟南芥幼苗的GUS染色分析 | 第56页 |
2.3.9 拟南芥叶片的注射处理 | 第56页 |
2.3.10 叶片坏死斑的统计分析 | 第56-57页 |
2.3.11 叶片细胞活性的伊文思蓝染色分析 | 第57页 |
2.3.12 叶片胼胝质的积累分析 | 第57页 |
2.3.13 叶片离子渗漏率的测定 | 第57页 |
2.3.14 叶片叶绿素的测定 | 第57-58页 |
2.3.15 叶片O_2~(·-)的NBT染色分析 | 第58页 |
2.3.16 叶片H_2O_2的DAB染色分析 | 第58页 |
2.3.17 叶片H_2O_2的定量测定 | 第58-59页 |
2.3.18 叶片MDA含量的测定 | 第59页 |
2.3.19 叶片过氧化氢酶酶活的测定 | 第59页 |
2.3.20 植物内源激素含量的测定 | 第59-61页 |
第三章 拟南芥SPHK1基因的分析 | 第61-67页 |
3.1 前言 | 第61页 |
3.2 实验结果与分析 | 第61-65页 |
3.2.1 拟南芥鞘氨醇激酶的系统进化分析 | 第61-63页 |
3.2.2 拟南芥SPHK1转录本的定量分析 | 第63页 |
3.2.3 拟南芥SPHK1启动子驱动GUS的染色分析 | 第63-65页 |
3.3 本章总结与讨论 | 第65-67页 |
第四章 SPHK1参与调控植物对FB1的响应 | 第67-105页 |
4.1 前言 | 第67页 |
4.2 实验结果与分析 | 第67-103页 |
4.2.1 过量表达鞘氨醇激酶增强FB1诱导超敏反应的效应 | 第67-78页 |
4.2.1.1 过量表达鞘氨醇激酶促进FB1诱导的坏死斑产生 | 第68-70页 |
4.2.1.2 过量表达鞘氨醇激酶促进FB1诱导的叶绿素降解 | 第70-71页 |
4.2.1.3 过量表达鞘氨醇激酶增强FB1诱导的胼胝质积累 | 第71-74页 |
4.2.1.4 过量表达鞘氨醇激酶增强FB1诱导细胞死亡的效应 | 第74-76页 |
4.2.1.5 过量表达鞘氨醇激酶增强FB1诱导的细胞离子渗漏 | 第76-77页 |
4.2.1.6 本节小结与讨论 | 第77-78页 |
4.2.2 过量表达SPHK1增强FB1诱导的ROS积累 | 第78-86页 |
4.2.2.1 过量表达SPHK1增强FB1诱导的O_2~(·-)积累 | 第78-80页 |
4.2.2.2 过量表达SPHK1增强FB1诱导的H_2O_2积累 | 第80-83页 |
4.2.2.3 过量表达SPHK1增强FB1诱导的膜脂过氧化 | 第83-84页 |
4.2.2.4 FB1在SPHK1-OE中诱导ROS积累增多的来源分析 | 第84页 |
4.2.2.5 本节小结与讨论 | 第84-86页 |
4.2.3 过量表达SPHK1增强FB1诱导的SA上调 | 第86-94页 |
4.2.3.1 过量表达SPHK1增强FB1诱导的SA相关基因转录本上调 | 第86-87页 |
4.2.3.2 过量表达SPHK1增强了FB1诱导的SA合成增多 | 第87-90页 |
4.2.3.3 Phyto-S1P的过量积累进一步加剧FB1诱导的SA上调 | 第90-92页 |
4.2.3.4 外源S1P诱导SA响应基因的表达 | 第92页 |
4.2.3.5 外源LCB抑制SA响应基因的表达 | 第92-94页 |
4.2.3.6 本节小结与讨论 | 第94页 |
4.2.4 SPHK1-KD中FB1诱导JA上调 | 第94-98页 |
4.2.4.1 SPHK1-KD中FB1诱导JA相关基因转录本上调 | 第94-95页 |
4.2.4.2 SPHK1-KD中FB1诱导JA合成增多 | 第95-96页 |
4.2.4.3 本小节总结与讨论 | 第96-98页 |
4.2.5 扰动SPHK1的表达影响FB1对拟南芥生长发育的抑制效应 | 第98-103页 |
4.2.5.1 扰动SPHK1的表达影响FB1对拟南芥幼苗生长的抑制效应 | 第98-99页 |
4.2.5.2 扰动SPHK1的表达影响FB1对拟南芥主根生长的抑制效应 | 第99-102页 |
4.2.5.3 扰动SPHK1的表达影响FB1对拟南芥主根分生区的抑制效应 | 第102页 |
4.2.5.4 本节小结与讨论 | 第102-103页 |
4.3 本章总结与讨论 | 第103-105页 |
第五章 SPHK1参与调控拟南芥对非生物逆境的响应 | 第105-112页 |
5.1 前言 | 第105页 |
5.2 实验结果与分析 | 第105-110页 |
5.2.1 SPHK1参与调控拟南芥对百草枯胁迫的响应 | 第105-107页 |
5.2.2 SPHK1参与调控拟南芥对盐胁迫的响应 | 第107-110页 |
5.2.2.1 SPHK1转录本受高浓度NaCl诱导上调 | 第107-108页 |
5.2.2.2 SPHK1-KD对高浓度NaCl抑制子叶转绿更敏感 | 第108-109页 |
5.2.2.3 SPHK1-KD对高浓度NaCl抑制主根伸长更敏感 | 第109-110页 |
5.3 本章总结与讨论 | 第110-112页 |
第六章 总结与讨论 | 第112-116页 |
6.1 总结 | 第112-114页 |
6.2 讨论 | 第114-116页 |
参考文献 | 第116-132页 |
附录Ⅰ 本研究中常用的实验仪器和设备 | 第132-133页 |
附录Ⅱ PCR引物名称和序列 | 第133-134页 |
在读期间发表的论文 | 第134-135页 |
致谢 | 第135页 |