摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 文献综述 | 第11-27页 |
1.1 引言 | 第11页 |
1.2 竹子开花特点及其研究概况 | 第11-15页 |
1.2.1 竹子开花的特点 | 第11-12页 |
1.2.2 竹子开花原因 | 第12-14页 |
1.2.3 竹子开花的分子生物学研究 | 第14-15页 |
1.3 植物MADS-box基因研究进展 | 第15-23页 |
1.3.1 MADS-box基因的结构和分类 | 第15-16页 |
1.3.2 植物MADS-box基因的进化 | 第16页 |
1.3.3 MADS-box参与植物生长发育的各个阶段 | 第16-19页 |
1.3.4 MADS-box蛋白的转录调控机制 | 第19-21页 |
1.3.5 MADS-box基因在单双子叶植物中功能保守性和多样性 | 第21-23页 |
1.4 模式植物花期调控机理研究进展 | 第23-25页 |
1.4.1 光周期途径 | 第23页 |
1.4.2 春化途径 | 第23-24页 |
1.4.3 自主途径 | 第24页 |
1.4.4 GA途径 | 第24-25页 |
1.5 研究目的和意义 | 第25页 |
1.6 技术路线 | 第25-27页 |
2 毛竹MADS-box基因家族的生物信息学分析及基因表达研究 | 第27-50页 |
2.1 材料与方法 | 第27-30页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 试剂和仪器 | 第27页 |
2.1.3 毛竹MADS-box的鉴定与分类 | 第27-28页 |
2.1.4 毛竹Type Ⅰ型MADS-box的鉴定 | 第28页 |
2.1.5 毛竹PeMADS序列矫正 | 第28页 |
2.1.6 毛竹MADS-box基因家族成员系统进化分析 | 第28页 |
2.1.7 保守结构域分析 | 第28页 |
2.1.8 启动子区域顺式作用元件分析 | 第28-29页 |
2.1.9 毛竹MADS-box基因家族扩增模式分析 | 第29页 |
2.1.10 毛竹开花期MADS-box基因表达分析 | 第29页 |
2.1.11 毛竹MADS-box基因TA克隆 | 第29-30页 |
2.2 结果与分析 | 第30-47页 |
2.2.1 毛竹MADS-box基因成员的鉴定与序列矫正 | 第30-35页 |
2.2.2 毛竹MADS-box系统进化和基序分析 | 第35-38页 |
2.2.3 毛竹MADS-box基因长内含子区域LTR-RT分析 | 第38-40页 |
2.2.4 毛竹MADS-box基因启动子区域顺式作用元件分析 | 第40页 |
2.2.5 毛竹MADS-box基因家族扩增模式及共线性分析 | 第40-43页 |
2.2.6 毛竹花序不同发育时期MADS-box基因表达分析 | 第43-47页 |
2.3 讨论 | 第47-50页 |
2.3.1 利用生物信息学方法获得完整毛竹PeMADS序列 | 第47页 |
2.3.2 毛竹Type Ⅰ型MADS-box成员可能存在丢失现象 | 第47-48页 |
2.3.3 毛竹MADS-box基因存在长内含子及LTR-RT源间插入现象 | 第48-49页 |
2.3.4 毛竹MADS-box基因在花序发育过程中与水稻同源基因具有相似的表达模式 | 第49-50页 |
3 毛竹PeMADS基因克隆及功能研究 | 第50-70页 |
3.1 试验材料 | 第50-51页 |
3.1.1 植物材料 | 第50页 |
3.1.2 试验仪器和试剂 | 第50-51页 |
3.2 试验方法 | 第51-59页 |
3.2.1 植物总RNA提取 | 第51-52页 |
3.2.2 RNA的反转录 | 第52页 |
3.2.3 引物设计与基因克隆 | 第52-54页 |
3.2.4 大肠杆菌转化 | 第54-55页 |
3.2.5 质粒提取 | 第55-56页 |
3.2.6 过表达载体的构建 | 第56页 |
3.2.7 农杆菌转化 | 第56-57页 |
3.2.8 拟南芥的遗传转化 | 第57-59页 |
3.3 结果与分析 | 第59-68页 |
3.3.1 PeMADS基因的克隆及序列分析 | 第59-66页 |
3.3.2 PeMADS在拟南芥中的异源表达 | 第66-68页 |
3.4 讨论 | 第68-70页 |
4 PeMADS3和PeMADS5参与成花过程信号调控网络的功能初探 | 第70-89页 |
4.1 材料与方法 | 第70页 |
4.1.1 植物材料 | 第70页 |
4.1.2 试验仪器和试剂 | 第70页 |
4.2 试验方法 | 第70-74页 |
4.2.1 PeMADS3与PeMADS5过表达载体的构建 | 第70-71页 |
4.2.2 水稻的遗传转化 | 第71-72页 |
4.2.3 PeMADS3、PeMADS5启动子克隆 | 第72页 |
4.2.4 PeMADS5启动子活性分析 | 第72-73页 |
4.2.5 拟南芥突变体的遗传转化 | 第73页 |
4.2.6 转基因拟南芥RT-PCR表达分析 | 第73-74页 |
4.3 结果与分析 | 第74-87页 |
4.3.1 毛竹PeMADS5基因功能研究 | 第74-82页 |
4.3.2 毛竹PeMADS3基因功能研究 | 第82-87页 |
4.4 讨论 | 第87-89页 |
4.4.1 异源表达毛竹PeMADS5基因促进拟南芥开花 | 第87-88页 |
4.4.2 毛竹PeMADS3促进开花并参与花序形成 | 第88-89页 |
5 毛竹MADS-box基因家族蛋白互作网络研究 | 第89-102页 |
5.1 材料与方法 | 第89-92页 |
5.1.1 材料 | 第89-90页 |
5.1.2 载体构建 | 第90页 |
5.1.3 酵母双杂交 | 第90-92页 |
5.2 结果与分析 | 第92-99页 |
5.2.1 String网站预测毛竹MADS-box基因家族成员蛋白质互作网络 | 第92-94页 |
5.2.2 利用酵母双杂交方法确定毛竹MADS-box蛋白互作 | 第94-98页 |
5.2.3 毛竹MADS-box蛋白互作网络构建 | 第98-99页 |
5.3 讨论 | 第99-102页 |
5.3.1 MADS-box蛋白在毛竹与拟南芥中蛋白互作网络的异同 | 第99-100页 |
5.3.2 毛竹MADS-box基因家族同亚组内蛋白功能的异化 | 第100页 |
5.3.3 毛竹PeMADS参与毛竹开花过程 | 第100-102页 |
6 全文总结及创新点 | 第102-104页 |
6.1 全文总结 | 第102-103页 |
6.2 创新点 | 第103-104页 |
7 展望 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-115页 |
附录 | 第115-126页 |
个人简介 | 第126-127页 |
致谢 | 第127页 |