致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 综述 | 第8-17页 |
1.1 细胞凋亡 | 第8-11页 |
1.1.1 细胞凋亡的特征 | 第8页 |
1.1.2 细胞凋亡的外源通路 | 第8-9页 |
1.1.3 细胞凋亡的内源性线粒体通路 | 第9页 |
1.1.4 细胞凋亡的内质网应激 | 第9-10页 |
1.1.5 Caspase家族在细胞凋亡中的作用 | 第10-11页 |
1.2 细胞自噬 | 第11-14页 |
1.2.1 细胞自噬简介 | 第11-12页 |
1.2.2 细胞自噬过程 | 第12页 |
1.2.3 细胞自噬调控通路 | 第12-13页 |
1.2.4 细胞凋亡自噬的交叉串话 | 第13-14页 |
1.2.4.1 Beclin-1 和Bcl-2 家族、caspases家族 | 第13-14页 |
1.2.4.2 p62蛋白 | 第14页 |
1.2.5 细胞凋亡和自噬常用的实验方法 | 第14页 |
1.3 齐墩果烷型皂苷的研究进展 | 第14-15页 |
1.3.1 齐墩果烷型皂苷的结构和性质 | 第14-15页 |
1.3.2 齐墩果烷型皂苷的药理活性 | 第15页 |
1.3.3 齐墩果烷型皂苷抗肿瘤作用及途径 | 第15页 |
1.4 苜蓿皂苷提取物的研究进展 | 第15-17页 |
1.4.1 苜蓿皂苷提取物的结构 | 第15-16页 |
1.4.2 苜蓿皂苷的分离和定量分析 | 第16页 |
1.4.2.1 苜蓿皂苷的主要分离方法 | 第16页 |
1.4.2.2 苜蓿皂苷的定量分析方法 | 第16页 |
1.4.3 苜蓿皂苷的药理活性 | 第16页 |
1.4.4 苜蓿皂苷的应用前景 | 第16-17页 |
2 引言 | 第17-18页 |
3.材料和方法 | 第18-26页 |
3.1 实验材料 | 第18-21页 |
3.1.1 细胞 | 第18页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第18-19页 |
3.1.3 主要试剂 | 第19-21页 |
3.2 | 第21-26页 |
3.2.1 细胞培养 | 第21-23页 |
3.2.1.1 细胞培养前的准备工作 | 第21-22页 |
3.2.1.2 A549细胞的复苏培养 | 第22页 |
3.2.1.3 细胞传代培养 | 第22页 |
3.2.1.4 细胞培养后的处理 | 第22-23页 |
3.2.2 倒置相差显微镜观察细胞形态 | 第23页 |
3.2.3 CCK-8 检测细胞存活率 | 第23页 |
3.2.4 吖啶橙(AO)染色 | 第23页 |
3.2.5 Hoechst 33342/PI双染检测细胞凋亡 | 第23页 |
3.2.6 线粒体膜电位的检测 | 第23-24页 |
3.2.7 Western-blotting检测 | 第24-25页 |
3.2.7.1 细胞的收集及蛋白质样品制备 | 第24页 |
3.2.7.2 蛋白含量的测定 | 第24页 |
3.2.7.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第24-25页 |
3.2.8 统计学处理 | 第25-26页 |
4.试验结果 | 第26-31页 |
4.1 苜蓿皂苷提取物抑制细胞增殖分析 | 第26-27页 |
4.2 AES对A549细胞线粒体膜电位的影响 | 第27-28页 |
4.3 ASE诱导细胞凋亡和坏死 | 第28-29页 |
4.4 吖啶橙(AO)染色分析自噬(AVOs) | 第29-30页 |
4.5 免疫印迹分析蛋白 | 第30-31页 |
5 结果与讨论 | 第31-33页 |
参考文献 | 第33-40页 |
附属表 | 第40-45页 |
Abstract | 第45-46页 |