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苜蓿皂苷提取物对诱导A549细胞死亡机制的研究

致谢第4-7页
摘要第7-8页
1 综述第8-17页
    1.1 细胞凋亡第8-11页
        1.1.1 细胞凋亡的特征第8页
        1.1.2 细胞凋亡的外源通路第8-9页
        1.1.3 细胞凋亡的内源性线粒体通路第9页
        1.1.4 细胞凋亡的内质网应激第9-10页
        1.1.5 Caspase家族在细胞凋亡中的作用第10-11页
    1.2 细胞自噬第11-14页
        1.2.1 细胞自噬简介第11-12页
        1.2.2 细胞自噬过程第12页
        1.2.3 细胞自噬调控通路第12-13页
        1.2.4 细胞凋亡自噬的交叉串话第13-14页
            1.2.4.1 Beclin-1 和Bcl-2 家族、caspases家族第13-14页
            1.2.4.2 p62蛋白第14页
        1.2.5 细胞凋亡和自噬常用的实验方法第14页
    1.3 齐墩果烷型皂苷的研究进展第14-15页
        1.3.1 齐墩果烷型皂苷的结构和性质第14-15页
        1.3.2 齐墩果烷型皂苷的药理活性第15页
        1.3.3 齐墩果烷型皂苷抗肿瘤作用及途径第15页
    1.4 苜蓿皂苷提取物的研究进展第15-17页
        1.4.1 苜蓿皂苷提取物的结构第15-16页
        1.4.2 苜蓿皂苷的分离和定量分析第16页
            1.4.2.1 苜蓿皂苷的主要分离方法第16页
            1.4.2.2 苜蓿皂苷的定量分析方法第16页
        1.4.3 苜蓿皂苷的药理活性第16页
        1.4.4 苜蓿皂苷的应用前景第16-17页
2 引言第17-18页
3.材料和方法第18-26页
    3.1 实验材料第18-21页
        3.1.1 细胞第18页
        3.1.2 主要仪器设备第18-19页
        3.1.3 主要试剂第19-21页
    3.2第21-26页
        3.2.1 细胞培养第21-23页
            3.2.1.1 细胞培养前的准备工作第21-22页
            3.2.1.2 A549细胞的复苏培养第22页
            3.2.1.3 细胞传代培养第22页
            3.2.1.4 细胞培养后的处理第22-23页
        3.2.2 倒置相差显微镜观察细胞形态第23页
        3.2.3 CCK-8 检测细胞存活率第23页
        3.2.4 吖啶橙(AO)染色第23页
        3.2.5 Hoechst 33342/PI双染检测细胞凋亡第23页
        3.2.6 线粒体膜电位的检测第23-24页
        3.2.7 Western-blotting检测第24-25页
            3.2.7.1 细胞的收集及蛋白质样品制备第24页
            3.2.7.2 蛋白含量的测定第24页
            3.2.7.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳第24-25页
        3.2.8 统计学处理第25-26页
4.试验结果第26-31页
    4.1 苜蓿皂苷提取物抑制细胞增殖分析第26-27页
    4.2 AES对A549细胞线粒体膜电位的影响第27-28页
    4.3 ASE诱导细胞凋亡和坏死第28-29页
    4.4 吖啶橙(AO)染色分析自噬(AVOs)第29-30页
    4.5 免疫印迹分析蛋白第30-31页
5 结果与讨论第31-33页
参考文献第33-40页
附属表第40-45页
Abstract第45-46页

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