摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第11-13页 |
第1章 卵母细胞成熟和组蛋白去甲基化酶的研究进展 | 第13-24页 |
1.1 卵母细胞成熟 | 第13-17页 |
1.1.1 体内成熟 | 第13-15页 |
1.1.2 体外成熟 | 第15-16页 |
1.1.3 改善卵母细胞能力 | 第16-17页 |
1.2 组蛋白去甲基化酶的研究进展 | 第17-23页 |
1.2.1 家族成员 | 第18-19页 |
1.2.2 与癌症相关研究 | 第19-21页 |
1.2.3 与发育相关研究 | 第21-23页 |
1.3 研究目的与内容 | 第23-24页 |
第2章 牦牛KDM2的克隆、生物信息学分析及其组织表达谱 | 第24-36页 |
2.1 试验材料 | 第24-26页 |
2.1.1 样品采集 | 第24-25页 |
2.1.2 主要仪器及设备 | 第25页 |
2.1.3 主要试剂 | 第25-26页 |
2.2 试验方法 | 第26-29页 |
2.2.1 总RNA的提取和反转录 | 第26-27页 |
2.2.2 引物的设计与合成 | 第27-28页 |
2.2.3 PCR克隆测序 | 第28页 |
2.2.4 生物信息学分析 | 第28-29页 |
2.2.5 组织表达谱分析 | 第29页 |
2.2.6 数据分析 | 第29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-34页 |
2.3.1 牦牛KDM2基因的克隆及序列分析 | 第29-30页 |
2.3.2 牦牛KDM2基因的蛋白结构和功能预测 | 第30-33页 |
2.3.3 牦牛KDM2基因的组织表达谱 | 第33-34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
2.5 小结 | 第35-36页 |
第3章 KDM2在卵母细胞减数分裂中作用的初步探索 | 第36-49页 |
3.1 试验材料 | 第36-37页 |
3.1.1 样品采集 | 第36页 |
3.1.2 试剂与培养液的配置 | 第36-37页 |
3.2 试验方法 | 第37-41页 |
3.2.1 免疫组化定位检测 | 第37-39页 |
3.2.2 卵母细胞的体外成熟 | 第39页 |
3.2.3 卵母细胞体外受精和胚胎培养 | 第39页 |
3.2.4 卵母细胞RNA的提取和反转录 | 第39-40页 |
3.2.5 qPCR定量检测 | 第40页 |
3.2.6 免疫荧光染色 | 第40-41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-46页 |
3.3.1 KDM2A和KDM2B在卵巢中的定位 | 第41页 |
3.3.2 KDM2在卵母细胞减数分裂不同时期中的表达 | 第41-43页 |
3.3.3 丁酰肼对卵母细胞中KDM2mRNA表达的影响 | 第43-44页 |
3.3.4 丁酰肼对卵母细胞中KDM2蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
3.3.5 丁酰肼对卵母细胞成熟和早期胚胎发育的影响 | 第45-46页 |
3.4 讨论 | 第46-48页 |
3.5 小结 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-64页 |
附录一 研究生期间发表的文章 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |