摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-12页 |
第一章:引言 | 第16-24页 |
1.1 中华绒螯蟹脂类营养研究概况 | 第16-17页 |
1.2 中华绒螯蟹多不饱和脂肪酸合成研究进展 | 第17-18页 |
1.3 中华绒螯蟹饲料鱼油替代的研究进展 | 第18-19页 |
1.4 甲壳动物转录组研究进展 | 第19-22页 |
1.4.1 转录组学技术在甲壳动物免疫学中的应用 | 第20-21页 |
1.4.2 转录组技术在甲壳动物发育生物学中的应用 | 第21页 |
1.4.3 转录组技术在甲壳动物营养学中的应用 | 第21-22页 |
1.5 甲壳动物蛋白组研究进展 | 第22-23页 |
1.6 本研究目的和意义 | 第23-24页 |
第二章:饲料中豆油和亚麻油替代鱼油对中华绒螯蟹肝胰腺转录组的影响 | 第24-40页 |
2.1 材料与方法 | 第24-28页 |
2.1.1 实验材料 | 第24-26页 |
2.1.2 养殖管理 | 第26页 |
2.1.3 样品收集 | 第26页 |
2.1.4 RNA提取 | 第26页 |
2.1.5 转录组文库构建 | 第26页 |
2.1.6 序列拼接和注释 | 第26-27页 |
2.1.7 基因表达量分析 | 第27页 |
2.1.8 差异基因荧光定量验证 | 第27-28页 |
2.1.9 统计分析 | 第28页 |
2.2 实验结果 | 第28-37页 |
2.2.1 序列组装与注释 | 第28-33页 |
2.2.2 差异表达分析 | 第33-37页 |
2.3 讨论 | 第37-40页 |
第三章:饲料中豆油和亚麻油替代鱼油对中华绒螯蟹肝胰腺蛋白质组的影响 | 第40-48页 |
3.1 材料与方法 | 第40-43页 |
3.1.1 实验材料 | 第40页 |
3.1.2 养殖管理 | 第40页 |
3.1.3 样品收集 | 第40页 |
3.1.4 RNA提取 | 第40页 |
3.1.5 蛋白质提取 | 第40-41页 |
3.1.6 蛋白酶解 | 第41页 |
3.1.7 质谱分析 | 第41-42页 |
3.1.8 质谱数据分析 | 第42页 |
3.1.9 生物信息学分析 | 第42页 |
3.1.10 荧光定量验证 | 第42-43页 |
3.1.11 统计分析 | 第43页 |
3.2 实验结果 | 第43-45页 |
3.2.1 蛋白质鉴定和差异分析 | 第43-44页 |
3.2.2 差异蛋白质注释分析 | 第44页 |
3.2.3 荧光定量验证 | 第44-45页 |
3.3 讨论 | 第45-48页 |
第四章:亚油酸和亚麻酸饲料对中华绒螯蟹肝胰腺蛋白质组的影响 | 第48-58页 |
4.1 材料与方法 | 第48-50页 |
4.1.1 实验材料、养殖管理和样品收集 | 第48-49页 |
4.1.2 蛋白质的提取 | 第49-50页 |
4.1.3 蛋白质定量和酶解 | 第50页 |
4.1.4 LC-MS/MS分析 | 第50页 |
4.1.5 蛋白质鉴定和定量 | 第50页 |
4.1.6 生物信息学分析 | 第50页 |
4.1.7 平行反应监测(PRM)分析 | 第50页 |
4.2 实验结果 | 第50-55页 |
4.2.1 蛋白质鉴定 | 第50-51页 |
4.2.2 差异表达蛋白质 | 第51页 |
4.2.3 差异蛋白功能分析 | 第51-52页 |
4.2.4 代谢相关差异蛋白质 | 第52-54页 |
4.2.5 PRM分析 | 第54-55页 |
4.3 讨论 | 第55-58页 |
4.3.1 脂类代谢 | 第55-56页 |
4.3.2 碳水化合物代谢 | 第56-57页 |
4.3.3 蛋白质代谢 | 第57-58页 |
第五章:EPA和DHA饲料对中华绒螯蟹肝胰腺蛋白质组的影响 | 第58-65页 |
5.1 材料与方法 | 第58-59页 |
5.1.1 实验饲料配方 | 第58-59页 |
5.1.2 实验材料和实验方法 | 第59页 |
5.1.3 PRM验证分析 | 第59页 |
5.2 实验结果 | 第59-63页 |
5.2.1 蛋白质鉴定 | 第59-60页 |
5.2.2 差异蛋白质分析 | 第60-61页 |
5.2.3 差异蛋白质功能注释 | 第61-62页 |
5.2.4 PRM验证 | 第62-63页 |
5.3 讨论 | 第63-65页 |
第六章:不同脂肪酸对离体培养中华绒螯蟹肝胰腺多不饱和脂肪酸合成相关基因表达的影响 | 第65-72页 |
6.1 材料与方法 | 第65-67页 |
6.1.1 实验材料 | 第65-66页 |
6.1.2 组织培养 | 第66页 |
6.1.3 RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第66页 |
6.1.4 荧光定量 | 第66-67页 |
6.2 实验结果 | 第67-69页 |
6.2.1 不同脂肪酸对ELOVL6表达的影响 | 第67页 |
6.2.2 不同脂肪酸对FAD6和FAD6b表达的影响 | 第67-69页 |
6.2.3 不同脂肪酸对FAD9表达的影响 | 第69页 |
6.3 讨论 | 第69-72页 |
第七章:中华绒螯蟹胰脂酶基因的克隆及表达分析 | 第72-84页 |
7.1 材料与方法 | 第72-75页 |
7.1.1 实验材料 | 第72-73页 |
7.1.2 总RNA提取、cDNA第一链和5’RACE和3’RACE模板合成 | 第73页 |
7.1.3 中华绒螯蟹胰脂酶基因的克隆 | 第73-74页 |
7.1.4 中华绒螯蟹胰脂酶基因序列分析 | 第74页 |
7.1.5 中华绒螯蟹胰脂酶基因表达分析 | 第74-75页 |
7.1.6 统计分析 | 第75页 |
7.2 实验结果 | 第75-81页 |
7.2.1 中华绒螯蟹胰脂酶基因克隆及序列分析 | 第75-76页 |
7.2.2 同源性分析及进化树分析 | 第76-78页 |
7.2.3 中华绒螯蟹胰脂酶基因不同组织表达分析 | 第78-79页 |
7.2.4 中华绒螯蟹幼体不同发育阶段胰脂酶基因的表达量 | 第79-80页 |
7.2.5 不同脂肪源饲料对中华绒螯蟹胰脂酶基因表达量的影响 | 第80-81页 |
7.3 讨论 | 第81-84页 |
小结 | 第84-85页 |
附录 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-104页 |
致谢 | 第104-106页 |
英文缩写索引 | 第106页 |