| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第13-30页 |
| 0.1 肾癌 | 第13页 |
| 0.2 舒尼替尼(Sunitinib,ST) | 第13页 |
| 0.3 细胞死亡方式 | 第13-21页 |
| 0.3.1 细胞凋亡 | 第13-15页 |
| 0.3.2 细胞自噬 | 第15-21页 |
| 0.3.2.1 细胞自噬的简介 | 第15-16页 |
| 0.3.2.2 引起自噬的原因 | 第16-18页 |
| 0.3.2.3 自噬的分子机制 | 第18-20页 |
| 0.3.2.4 自噬与疾病 | 第20-21页 |
| 0.3.3 细胞坏死 | 第21页 |
| 0.4 Akt/mTOR信号通路 | 第21-26页 |
| 0.5 糖酵解 | 第26-29页 |
| 0.5.1 糖酵解概念 | 第26页 |
| 0.5.2 糖酵解的过程 | 第26-29页 |
| 0.6 课题研究的意义 | 第29-30页 |
| 第一章 舒尼替尼(ST)引起肾癌细胞死亡方式分析 | 第30-45页 |
| 1.1 实验目的 | 第30页 |
| 1.2 实验方案 | 第30页 |
| 1.3 细胞株、药品试剂与仪器设备 | 第30-33页 |
| 1.3.1 实验细胞株及主要药品 | 第30-31页 |
| 1.3.2 实验试剂 | 第31-32页 |
| 1.3.3 试验仪器设备 | 第32-33页 |
| 1.4 基本实验方法 | 第33-39页 |
| 1.4.1 细胞复苏 | 第33页 |
| 1.4.2 细胞传代 | 第33页 |
| 1.4.3 细胞蛋白提取 | 第33-34页 |
| 1.4.4 免疫印迹检测 | 第34-36页 |
| 1.4.5 细胞冻存 | 第36-37页 |
| 1.4.6 MTS细胞活性检测实验 | 第37页 |
| 1.4.7 细胞克隆形成实验检测 | 第37页 |
| 1.4.8 电镜样品的制备 | 第37页 |
| 1.4.9 Real-timePCR检测 | 第37-38页 |
| 1.4.10 siRNA敲降技术 | 第38-39页 |
| 1.5 实验结果 | 第39-43页 |
| 1.5.1 舒尼替尼可以引起肾癌细胞活性的丢失 | 第39-40页 |
| 1.5.2 舒尼替尼可以通过多种途径引起细胞死亡 | 第40-41页 |
| 1.5.3 舒尼替尼可以诱导肾癌细胞产生自噬 | 第41-42页 |
| 1.5.4 舒尼替尼诱导的自噬与其诱导的凋亡之间关系 | 第42-43页 |
| 1.6 小结 | 第43-45页 |
| 第二章 Akt/mTOR信号通路参与调控舒尼替尼诱导的细胞自噬 | 第45-51页 |
| 2.1 实验目的 | 第45页 |
| 2.2 实验方案 | 第45页 |
| 2.3 细胞株、药品试剂与仪器设备 | 第45-46页 |
| 2.3.1 实验细胞株及主要药品 | 第45页 |
| 2.3.2 试验试剂 | 第45-46页 |
| 2.3.3 仪器设备 | 第46页 |
| 2.4 基本实验方法 | 第46页 |
| 2.5 结果 | 第46-50页 |
| 2.5.1 舒尼替尼对Akt/mTOR信号通路上主要蛋白的表达情况 | 第46-47页 |
| 2.5.2 抑制mTOR和Akt影响舒尼替尼诱导的细胞自噬 | 第47-48页 |
| 2.5.3 敲降Akt不同亚基抑制舒尼替尼诱导的细胞自噬 | 第48-50页 |
| 2.6 小结 | 第50-51页 |
| 第三章 抑制糖酵解途径扩大舒尼替尼对肾癌细胞的抑癌作用 | 第51-57页 |
| 3.1 实验目的 | 第51页 |
| 3.2 实验方案 | 第51页 |
| 3.3 细胞株、药品试剂与仪器设备 | 第51-52页 |
| 3.3.1 实验细胞株及主要药品 | 第51页 |
| 3.3.2 试验试剂 | 第51-52页 |
| 3.3.3 仪器设备 | 第52页 |
| 3.4 基本实验方法 | 第52-53页 |
| 3.4.1 腺病毒转染 | 第52-53页 |
| 3.4.2 Real-timePCR检测 | 第53页 |
| 3.5 结果 | 第53-56页 |
| 3.5.1 肾癌细胞中舒尼替尼处理后PFKFB3表达下降 | 第53-54页 |
| 3.5.2 PFKFB3抑制剂增加了舒尼替尼引起的细胞凋亡 | 第54-55页 |
| 3.5.3 糖酵解调节基因PFKFB3参与了舒尼替尼诱导的自噬 | 第55-56页 |
| 3.6 小结 | 第56-57页 |
| 第四章 结论与展望 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第68-69页 |
