| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-17页 |
| 1.1 三色堇再生研究进展 | 第10页 |
| 1.2 再生相关基因研究进展 | 第10-13页 |
| 1.2.1 WUS基因研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2.2 BBM基因研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 直接法导入外源基因的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.4 转基因植株筛选方法 | 第15-16页 |
| 1.5 课题研究的意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.1 植物 | 第17页 |
| 2.1.2 载体 | 第17页 |
| 2.1.3 菌株 | 第17页 |
| 2.1.4 试剂 | 第17页 |
| 2.2 方法 | 第17-27页 |
| 2.2.1 AtWUS基因的克隆与载体构建 | 第17-19页 |
| 2.2.1.1 拟南芥总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.2.1.2 AtWUS引物设计与克隆 | 第18页 |
| 2.2.1.3 AtWUS表达载体的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.2 大肠杆菌和农杆菌的转化 | 第19页 |
| 2.2.3 三色堇幼苗对卡那霉素抗性浓度的筛选 | 第19页 |
| 2.2.4 外源基因种子浸泡法转化三色堇 | 第19-21页 |
| 2.2.4.1 试验设计 | 第19-20页 |
| 2.2.4.2 质粒介导的种子浸泡法 | 第20页 |
| 2.2.4.3 农杆菌介导的种子浸泡法 | 第20-21页 |
| 2.2.5 外源基因花粉管通道法转化三色堇 | 第21-23页 |
| 2.2.5.1 试验设计 | 第21-23页 |
| 2.2.5.2 转化介质处理 | 第23页 |
| 2.2.5.3 质粒介导的花粉管通道法 | 第23页 |
| 2.2.5.4 农杆菌介导的花粉管通道法 | 第23页 |
| 2.2.6 转基因三色堇抗性苗筛选和阳性苗鉴定 | 第23-25页 |
| 2.2.7 转基因三色堇阳性株系表型观测 | 第25-26页 |
| 2.2.8 转基因三色堇阳性植株诱导再生 | 第26-27页 |
| 2.2.8.1 外植体的获得 | 第26页 |
| 2.2.8.2 培养基 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-50页 |
| 3.1 AtWUS克隆及超量表达载体构建 | 第27-28页 |
| 3.2 卡那霉素抗性浓度的筛选 | 第28-29页 |
| 3.3 种子浸泡法转化三色堇的阳性苗鉴定 | 第29-31页 |
| 3.4 花粉管通道法转化三色堇的结果分析 | 第31-45页 |
| 3.4.1 花粉管通道法处理植株结实情况分析 | 第31-41页 |
| 3.4.2 花粉管通道法转化三色堇阳性苗鉴定 | 第41-45页 |
| 3.5 转基因三色堇阳性植株的表型观测 | 第45-49页 |
| 3.6 转基因三色堇阳性植株的愈伤诱导 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-58页 |
| 4.1 三色堇幼苗对卡那霉素浓度的抗性 | 第50-51页 |
| 4.2 花粉管直接导入法各因素对留种的影响 | 第51-53页 |
| 4.3 直接转化的影响因子分析 | 第53-55页 |
| 4.4 三色堇转基因阳性苗表型鉴定及观测的讨论 | 第55-56页 |
| 4.5 三色堇转AtWUS基因阳性苗诱导再生的讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 致谢 | 第65页 |