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Nell-1对出生后小鼠软骨内稳态及软骨内成骨的影响与机制研究

前言第4-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第16-17页
第1章 绪论第17-25页
    1.1 骨组织的发生第17-19页
        1.1.1 软骨内成骨的过程第17-19页
        1.1.2 生长板软骨及其功能第19页
    1.2 Nell-1对骨-软骨组织的影响及相关机制第19-24页
        1.2.1 Nell-1对颅骨发育及损伤修复的作用第20-22页
        1.2.2 Nell-1对软骨分化及损伤修复的作用第22-23页
        1.2.3 Nell-1参与调控骨-软骨组织的相关机制研究第23-24页
    1.3 研究思路第24-25页
第2章 Nell-1~(Col2α1)KO小鼠模型的建立与验证第25-36页
    2.1 实验材料与仪器第25-26页
        2.1.1 实验材料第25-26页
        2.1.2 实验仪器第26页
    2.2 实验方法第26-32页
        2.2.1 模型小鼠的获得与饲养第26-27页
        2.2.2 基因型鉴定第27-28页
        2.2.3 X-gal染色第28页
        2.2.4 小鼠软骨组织中Nell-1 蛋白分布及表达水平的检测第28-29页
        2.2.5 新生小鼠肋软骨细胞的分离与培养第29-30页
        2.2.6 新生小鼠颅骨细胞的分离与培养第30页
        2.2.7 软骨及颅骨细胞中Nell-1 基因表达水平的检测第30-32页
        2.2.8 统计学分析第32页
    2.3 实验结果第32-34页
        2.3.1 动物模型的建立第32页
        2.3.2 Col2α1-Cre在软骨组织内的成功表达第32页
        2.3.3 Nell-1在Col2α1-Cre表达的软骨组织中被特异性敲除第32-34页
    2.4 讨论第34-35页
    2.5 本章小结第35-36页
第3章 Nell-1 对出生后小鼠长骨生长发育的影响第36-58页
    3.1 实验材料与仪器第36-37页
        3.1.1 实验材料第36-37页
        3.1.2 实验仪器第37页
    3.2 实验方法第37-41页
        3.2.1 大体观察第37-38页
        3.2.2 Alcian Blue-Alizarin Red骨骼染色第38页
        3.2.3 体外micro-CT扫描第38页
        3.2.4 活体micro-CT扫描第38-39页
        3.2.5 扫描结果的重建与测量第39页
        3.2.6 骨组织形态计量分析第39-40页
        3.2.7 成骨细胞及破骨细胞计数第40页
        3.2.8 免疫组织化学染色第40-41页
        3.2.9 软骨细胞的诱导及基因表达水平的检测第41页
        3.2.10 统计学分析第41页
    3.3 实验结果第41-54页
        3.3.1 Nell-1对新生小鼠骨组织的影响第41-42页
        3.3.2 Nell-1对出生后1个月及3个月小鼠骨组织的影响第42-50页
        3.3.3 Nell-1影响小鼠出生后软骨内成骨的长期动态观察第50-54页
    3.4 讨论第54-57页
    3.5 本章小结第57-58页
第4章 Nell-1 对出生后小鼠软骨内稳态的影响第58-67页
    4.1 实验材料与仪器第58-59页
        4.1.1 实验材料第58-59页
        4.1.2 实验仪器第59页
    4.2 实验方法第59-61页
        4.2.1 生长板软骨厚度的测量第59页
        4.2.2 BrdU标记及检测第59-60页
        4.2.3 Safranin O染色第60页
        4.2.4 免疫组织化学染色第60页
        4.2.5 软骨细胞增殖及分化水平的体外验证第60-61页
        4.2.6 统计学分析第61页
    4.3 实验结果第61-63页
        4.3.1 Nell-1对新生小鼠胫骨近端软骨组织的影响第61-62页
        4.3.2 Nell-1对1月龄及3月龄小鼠生长板软骨组织的影响第62-63页
        4.3.3 Nell-1在体外对软骨细胞增殖及分化的调控作用第63页
    4.4 讨论第63-66页
    4.5 本章小结第66-67页
第5章 Nell-1 影响软骨内稳态和软骨内成骨的机制研究第67-80页
    5.1 实验材料与仪器第67-69页
        5.1.1 实验材料第67-68页
        5.1.2 实验仪器第68-69页
    5.2 实验方法第69-72页
        5.2.1 免疫组织化学染色第69页
        5.2.2 软骨细胞培养及基因表达水平检测第69页
        5.2.3 软骨细胞核内Gli-1蛋白表达水平的检测第69-72页
        5.2.4 统计学分析第72页
    5.3 实验结果第72-77页
        5.3.1 Nell-1对新生小鼠软骨组织内Ihh-PTHrP信号环路的影响第72页
        5.3.2 Nell-1对1月龄小鼠生长板软骨内Ihh-PTHrP信号环路的影响第72-74页
        5.3.3 Nell-1在体外对软骨细胞内Ihh-PTHrP信号通路的影响第74-75页
        5.3.4 Nell-1在体外对软骨细胞内Gli-1的影响第75-77页
    5.4 讨论第77-78页
    5.5 本章小结第78-80页
第6章 总结与展望第80-82页
参考文献第82-92页
作者简介第92-94页
致谢第94-95页

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