前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第16-17页 |
第1章 绪论 | 第17-25页 |
1.1 骨组织的发生 | 第17-19页 |
1.1.1 软骨内成骨的过程 | 第17-19页 |
1.1.2 生长板软骨及其功能 | 第19页 |
1.2 Nell-1对骨-软骨组织的影响及相关机制 | 第19-24页 |
1.2.1 Nell-1对颅骨发育及损伤修复的作用 | 第20-22页 |
1.2.2 Nell-1对软骨分化及损伤修复的作用 | 第22-23页 |
1.2.3 Nell-1参与调控骨-软骨组织的相关机制研究 | 第23-24页 |
1.3 研究思路 | 第24-25页 |
第2章 Nell-1~(Col2α1)KO小鼠模型的建立与验证 | 第25-36页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第25-26页 |
2.1.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.2 实验仪器 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-32页 |
2.2.1 模型小鼠的获得与饲养 | 第26-27页 |
2.2.2 基因型鉴定 | 第27-28页 |
2.2.3 X-gal染色 | 第28页 |
2.2.4 小鼠软骨组织中Nell-1 蛋白分布及表达水平的检测 | 第28-29页 |
2.2.5 新生小鼠肋软骨细胞的分离与培养 | 第29-30页 |
2.2.6 新生小鼠颅骨细胞的分离与培养 | 第30页 |
2.2.7 软骨及颅骨细胞中Nell-1 基因表达水平的检测 | 第30-32页 |
2.2.8 统计学分析 | 第32页 |
2.3 实验结果 | 第32-34页 |
2.3.1 动物模型的建立 | 第32页 |
2.3.2 Col2α1-Cre在软骨组织内的成功表达 | 第32页 |
2.3.3 Nell-1在Col2α1-Cre表达的软骨组织中被特异性敲除 | 第32-34页 |
2.4 讨论 | 第34-35页 |
2.5 本章小结 | 第35-36页 |
第3章 Nell-1 对出生后小鼠长骨生长发育的影响 | 第36-58页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第36-37页 |
3.1.1 实验材料 | 第36-37页 |
3.1.2 实验仪器 | 第37页 |
3.2 实验方法 | 第37-41页 |
3.2.1 大体观察 | 第37-38页 |
3.2.2 Alcian Blue-Alizarin Red骨骼染色 | 第38页 |
3.2.3 体外micro-CT扫描 | 第38页 |
3.2.4 活体micro-CT扫描 | 第38-39页 |
3.2.5 扫描结果的重建与测量 | 第39页 |
3.2.6 骨组织形态计量分析 | 第39-40页 |
3.2.7 成骨细胞及破骨细胞计数 | 第40页 |
3.2.8 免疫组织化学染色 | 第40-41页 |
3.2.9 软骨细胞的诱导及基因表达水平的检测 | 第41页 |
3.2.10 统计学分析 | 第41页 |
3.3 实验结果 | 第41-54页 |
3.3.1 Nell-1对新生小鼠骨组织的影响 | 第41-42页 |
3.3.2 Nell-1对出生后1个月及3个月小鼠骨组织的影响 | 第42-50页 |
3.3.3 Nell-1影响小鼠出生后软骨内成骨的长期动态观察 | 第50-54页 |
3.4 讨论 | 第54-57页 |
3.5 本章小结 | 第57-58页 |
第4章 Nell-1 对出生后小鼠软骨内稳态的影响 | 第58-67页 |
4.1 实验材料与仪器 | 第58-59页 |
4.1.1 实验材料 | 第58-59页 |
4.1.2 实验仪器 | 第59页 |
4.2 实验方法 | 第59-61页 |
4.2.1 生长板软骨厚度的测量 | 第59页 |
4.2.2 BrdU标记及检测 | 第59-60页 |
4.2.3 Safranin O染色 | 第60页 |
4.2.4 免疫组织化学染色 | 第60页 |
4.2.5 软骨细胞增殖及分化水平的体外验证 | 第60-61页 |
4.2.6 统计学分析 | 第61页 |
4.3 实验结果 | 第61-63页 |
4.3.1 Nell-1对新生小鼠胫骨近端软骨组织的影响 | 第61-62页 |
4.3.2 Nell-1对1月龄及3月龄小鼠生长板软骨组织的影响 | 第62-63页 |
4.3.3 Nell-1在体外对软骨细胞增殖及分化的调控作用 | 第63页 |
4.4 讨论 | 第63-66页 |
4.5 本章小结 | 第66-67页 |
第5章 Nell-1 影响软骨内稳态和软骨内成骨的机制研究 | 第67-80页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第67-69页 |
5.1.1 实验材料 | 第67-68页 |
5.1.2 实验仪器 | 第68-69页 |
5.2 实验方法 | 第69-72页 |
5.2.1 免疫组织化学染色 | 第69页 |
5.2.2 软骨细胞培养及基因表达水平检测 | 第69页 |
5.2.3 软骨细胞核内Gli-1蛋白表达水平的检测 | 第69-72页 |
5.2.4 统计学分析 | 第72页 |
5.3 实验结果 | 第72-77页 |
5.3.1 Nell-1对新生小鼠软骨组织内Ihh-PTHrP信号环路的影响 | 第72页 |
5.3.2 Nell-1对1月龄小鼠生长板软骨内Ihh-PTHrP信号环路的影响 | 第72-74页 |
5.3.3 Nell-1在体外对软骨细胞内Ihh-PTHrP信号通路的影响 | 第74-75页 |
5.3.4 Nell-1在体外对软骨细胞内Gli-1的影响 | 第75-77页 |
5.4 讨论 | 第77-78页 |
5.5 本章小结 | 第78-80页 |
第6章 总结与展望 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-92页 |
作者简介 | 第92-94页 |
致谢 | 第94-95页 |