摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-18页 |
1 镉的研究进展 | 第12-16页 |
1.1 镉的物理化学特性 | 第12页 |
1.2 镉的污染 | 第12-13页 |
1.3 镉的吸收代谢 | 第13页 |
1.4 镉对机体的毒性作用 | 第13-15页 |
1.4.1 镉对机体抗氧化功能的影响 | 第13-14页 |
1.4.2 镉对机体凋亡的影响 | 第14页 |
1.4.3 镉的肾脏毒性作用 | 第14-15页 |
1.4.4 镉与其他元素的互相作用 | 第15页 |
1.5 镉中毒的治疗与预防 | 第15-16页 |
2 NAC概述及其作用 | 第16-18页 |
2.1 NAC的生物学特性 | 第16页 |
2.2 NAC的抗氧化作用机制 | 第16页 |
2.3 NAC对细胞调亡的作用 | 第16-17页 |
2.4 NAC的其他作用 | 第17-18页 |
第二部分 试验研究 | 第18-40页 |
1 材料与方法 | 第18-20页 |
1.1 实验材料 | 第18-19页 |
1.1.1 毒源与细胞 | 第18页 |
1.1.2 实验动物 | 第18页 |
1.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
1.1.4 主要仪器设备 | 第19页 |
1.2 辅助器材 | 第19页 |
1.3 试验设计 | 第19-20页 |
2 试验方法 | 第20-24页 |
2.1 肾小管上皮细胞的培养与鉴定 | 第20页 |
2.1.1 肾小管上皮细胞的培养 | 第20页 |
2.1.2 肾小管上皮细胞的免疫组化鉴定 | 第20页 |
2.2 镉的攻毒浓度和NAC拮抗浓度的筛选 | 第20页 |
2.3 MTT法测定细胞存活率 | 第20-21页 |
2.4 肾小管上皮细胞及培养上清液中LDH活性的测定 | 第21页 |
2.4.1 样品的采集 | 第21页 |
2.4.2 LDH活性的测定 | 第21页 |
2.5 肾小管上皮细胞抗氧化指标测定 | 第21页 |
2.6 细胞膜ATP酶活力测定 | 第21-22页 |
2.7 肾小管上皮细胞相关凋亡基因表达量的测定 | 第22-23页 |
2.7.1 测定基因引物的设计与合成 | 第22页 |
2.7.2 样品的制备与采集 | 第22页 |
2.7.3 细胞总RNA的提取与纯度测定 | 第22-23页 |
2.7.4 去基因组DNA和反转录 | 第23页 |
2.7.5 SYBR Green RT-PCR反应 | 第23页 |
2.7.6 相对定量计算方法 | 第23页 |
2.8 数据分析 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-34页 |
3.1 肾小管上皮细胞的免疫组化染色结果 | 第24页 |
3.2 镉对细胞存活率的影响及NAC浓度筛选结果 | 第24-25页 |
3.3 镉对肾小管上皮细胞LDH释放率的影响 | 第25页 |
3.4 镉对肾小管上皮细胞抗氧化指标的影响 | 第25-27页 |
3.4.1 镉对肾小管上皮细胞MDA浓度的影响 | 第25-26页 |
3.4.2 镉对肾小管上皮细胞GSH含量的影响 | 第26页 |
3.4.3 镉对肾小管上皮细胞SOD和T-AOC的影响 | 第26-27页 |
3.4.4 镉对肾小管上皮细胞CAT活性的影响 | 第27页 |
3.5 镉对肾小管上皮细胞ATP酶的影响 | 第27-28页 |
3.6 镉对肾小管上皮细胞相关凋亡基因mRNA表达量的影响 | 第28-29页 |
3.6.1 镉对肾小管上皮细胞Bcl-2 mRNA表达量的影响 | 第28页 |
3.6.2 镉对肾小管上皮细胞Caspase-3 mRNA表达量的影响 | 第28-29页 |
3.6.3 镉对肾小管上皮细胞Bak-1mRNA表达量的影响 | 第29页 |
3.7 NAC对镉诱导鸭肾小管上皮细胞损伤的保护效应 | 第29-31页 |
3.7.1 NAC对镉诱导肾小管上皮细胞LDH释放率的保护效应 | 第29页 |
3.7.2 NAC对镉诱导肾小管上皮细胞氧化损伤的保护效应 | 第29-30页 |
3.7.3 NAC对镉诱导肾小管上皮细胞ATP酶的保护效应 | 第30页 |
3.7.4 NAC对镉诱导肾小管上皮细胞相关凋亡基因表达量的保护效应 | 第30-31页 |
3.8 镉对鸭肾小管上皮细胞形态的影响及NAC的保护效应 | 第31-34页 |
4 讨论 | 第34-39页 |
4.1 鸭肾小管上皮细胞的培养与鉴定 | 第34页 |
4.2 镉对鸭肾小管上皮细胞的毒性作用 | 第34-35页 |
4.3 镉对鸭肾小管上皮细胞抗氧化功能的影响 | 第35-36页 |
4.4 镉对鸭肾小管上皮细胞ATP酶的影响 | 第36-37页 |
4.5 镉对鸭肾小管上皮细胞相关凋亡基因表达量的影响 | 第37-38页 |
4.6 NAC对镉诱导肾小管上皮细胞毒性损伤的保护效应 | 第38-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-46页 |
附录 | 第46-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |