| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1 东莨菪内酯的生物活性多样性研究 | 第12-16页 |
| 1.1 东莨菪内酯的杀虫抑菌活性研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2 东莨菪内酯的杀螨活性研究现状 | 第14-16页 |
| 2 昆虫G蛋白偶联神经肽受体(GPCR) | 第16-18页 |
| 3 数字基因表达谱测序技术 | 第18页 |
| 4 RNA干扰技术 | 第18-19页 |
| 5 论文选题依据与研究内容 | 第19-22页 |
| 5.1 选题依据 | 第19-20页 |
| 5.2 研究内容 | 第20-22页 |
| 第二章 东莨菪内酯对朱砂叶螨杀螨活性相关差异表达基因的鉴定及相关分析 | 第22-46页 |
| 第一节 东莨菪内酯胁迫下朱砂叶螨数字基因表达谱测序 | 第22-37页 |
| 1 材料与方法 | 第22-28页 |
| 1.1 供试螨类 | 第22-23页 |
| 1.2 供试药剂 | 第23页 |
| 1.3 主要实验试剂和实验仪器 | 第23-24页 |
| 1.4 实验材料 | 第24-25页 |
| 1.5 总RNA质量检测方法 | 第25页 |
| 1.6 朱砂叶螨数字基因表达谱升级版测序方法 | 第25-26页 |
| 1.7 实时荧光定量PCR检测 | 第26-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-36页 |
| 2.1 总RNA质量检测结果 | 第28-29页 |
| 2.2 数字基因表达谱测序结果 | 第29页 |
| 2.3 测序质量评估 | 第29-31页 |
| 2.4 差异表达基因统计分析 | 第31-32页 |
| 2.5 实时荧光定量验证结果 | 第32-34页 |
| 2.6 GeneOntology(GO)功能富集分析 | 第34-35页 |
| 2.7 Pathway显著性富集分析 | 第35-36页 |
| 3 小结与讨论 | 第36-37页 |
| 第二节 朱砂叶螨响应东莨菪内酯作用的显著差异基因筛选 | 第37-42页 |
| 1 朱砂叶螨的显著差异基因筛选方法 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-40页 |
| 2.1 东莨菪内酯处理朱砂叶螨24h和48h的样品组间差异比较分析 | 第37-38页 |
| 2.2 参与螨体代谢、信号传导等相关基因的筛选 | 第38-40页 |
| 3 小结与讨论 | 第40-42页 |
| 第三节 差异基因G蛋白偶联神经肽受体、鸟苷酸激酶和细胞凋亡蛋白的相关分析 | 第42-46页 |
| 1 材料与方法 | 第42-43页 |
| 1.1 供试螨类 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂和实验仪器 | 第42页 |
| 1.3 总RNA提取 | 第42页 |
| 1.4 cDNA的合成 | 第42页 |
| 1.5 引物设计 | 第42-43页 |
| 1.6 定量PCR | 第43页 |
| 1.7 数据分析 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-44页 |
| 3 小结与讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 朱砂叶螨体内GPCR、BAG和GUK的克隆及表达模式研究 | 第46-58页 |
| 第一节 朱砂叶螨GPCR、BAG和GUK的克隆及序列分析 | 第46-54页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| 1.1 供试螨类 | 第46页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第46-47页 |
| 1.3 试剂配制 | 第47页 |
| 1.4 总RNA的提取 | 第47页 |
| 1.5 第一链cDNA的合成 | 第47页 |
| 1.6 引物设计 | 第47-48页 |
| 1.7 PCR反应 | 第48页 |
| 1.8 PCR产物克隆和测序 | 第48-49页 |
| 1.9 基因序列以及系统发育树分析 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-53页 |
| 2.1 朱砂叶螨的总RNA提取 | 第49页 |
| 2.2 朱砂叶螨TcGPCR、TcBAG和TcGUK基因的扩增结果 | 第49-50页 |
| 2.3 朱砂叶螨TcGPCR、TcBAG和TcGUK基因序列的生物信息学分析 | 第50页 |
| 2.4 朱砂叶螨TcGPCR、TcBAG和TcGUK基因的同源性分析 | 第50-53页 |
| 3 小结与讨论 | 第53-54页 |
| 第二节 朱砂叶螨不同螨态TcGPCR,TcBAG和TcGUK基因表达模式分析 | 第54-58页 |
| 1 材料与方法 | 第54-55页 |
| 1.1 供试螨类 | 第54页 |
| 1.2 主要试剂和实验仪器 | 第54页 |
| 1.3 总RNA提取 | 第54页 |
| 1.4 cDNA的合成 | 第54页 |
| 1.5 引物设计 | 第54-55页 |
| 1.6 定量PCR | 第55页 |
| 1.7 数据分析 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-56页 |
| 2.1 总RNA的提取 | 第55页 |
| 2.2 朱砂叶螨不同螨态的TcGPCR、TcGUK和TcBAG基因的表达模式 | 第55-56页 |
| 3 小结与讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 东莨菪内酯对朱砂叶螨作用靶标鉴定 | 第58-68页 |
| 第一节 朱砂叶螨GPCR、BAG和GUK基因表达量与东莨菪内酯杀螨效果关系分析 | 第58-63页 |
| 1 材料与方法 | 第58-60页 |
| 1.1 供试螨类 | 第58页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第58-59页 |
| 1.3 试验方法 | 第59-60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-61页 |
| 2.1 dsRNA沉默效率检测 | 第60-61页 |
| 2.2 生物测定 | 第61页 |
| 3 小结与讨论 | 第61-63页 |
| 第二节 朱砂叶螨GPCR受体的功能性表达 | 第63-68页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| 1.1 供试螨类 | 第63页 |
| 1.2 主要试剂和实验仪器 | 第63-64页 |
| 1.3 表达质粒构建 | 第64页 |
| 1.4 细胞培养及转染 | 第64页 |
| 1.5 钙离子流动测定 | 第64-65页 |
| 1.6 数据分析 | 第65页 |
| 2 结果与分析 | 第65-67页 |
| 2.1 功能分析 | 第65-67页 |
| 3 小结与讨论 | 第67-68页 |
| 第五章 结论与展望 | 第68-70页 |
| 参考文献(References) | 第70-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 在读期间发表论文 | 第84页 |
