| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 哺乳动物生物钟 | 第10-15页 |
| 1.1.1 哺乳动物生物钟分子机制 | 第11-12页 |
| 1.1.2 哺乳动物的核心时钟驱动器——SCN | 第12-13页 |
| 1.1.3 哺乳动物外周生物钟 | 第13-14页 |
| 1.1.4 SCN对外周生物钟的调控 | 第14-15页 |
| 1.2 细菌人工染色体 | 第15-16页 |
| 1.3 Cre-Loxp系统 | 第16-20页 |
| 第二章 实验材料及基本原理 | 第20-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 BAC克隆 | 第20页 |
| 2.1.2 pSC101-BAD-gbaA-tetra质粒 | 第20页 |
| 2.1.3 载体骨架 | 第20页 |
| 2.1.4 小鼠 | 第20-21页 |
| 2.1.5 大肠杆菌DH5α菌株 | 第21页 |
| 2.2 实验原理 | 第21-23页 |
| 2.2.1 载体构建的原理 | 第21页 |
| 2.2.2 Red/ET系统的重组原理 | 第21-23页 |
| 2.3 实验仪器与主要试剂 | 第23-26页 |
| 2.3.1 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.3.2 主要试剂 | 第24-26页 |
| 2.4 实验基本方法 | 第26-41页 |
| 2.4.1 目的载体等的构建 | 第26-31页 |
| 2.4.2 将表达Red/ET的质粒pSC101- BAD-gbaA转入含有BAC的大肠杆菌菌株中 | 第31-32页 |
| 2.4.3 利用Red/ET系统修饰BAC | 第32-34页 |
| 2.4.4 通过PCR和酶切分析验证被修饰的BAC | 第34-35页 |
| 2.4.5 修饰好的BAC注射受精卵雄原核 | 第35页 |
| 2.4.6 对获得的转基因小鼠进行基因型鉴定 | 第35-38页 |
| 2.4.7 对获得的转基因小鼠进行拷贝数鉴定 | 第38-40页 |
| 2.4.8 将获得的转基因Founder小鼠进行传递 | 第40-41页 |
| 第三章 实验步骤及结果分析 | 第41-54页 |
| 3.1 构建iCre-IRES-lacZ载体 | 第41-45页 |
| 3.1.1 iCre-IRES-lacZ载体的设计与构建 | 第41-43页 |
| 3.1.2 构建EM7-neo-PA片段以及EM7-Amp-PA片段 | 第43-44页 |
| 3.1.3 同源臂的添加 | 第44-45页 |
| 3.2 BAC的修饰—BAC载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.3 转基因小鼠的鉴定及表达 | 第46-51页 |
| 3.3.1 转基因小鼠基因型鉴定 | 第46-47页 |
| 3.3.2 转基因小鼠拷贝数鉴定 | 第47-50页 |
| 3.3.3 转基因小鼠iCre重组酶的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4 转基因小鼠节律行为分析 | 第51-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-58页 |
| 4.1 研究特异神经元在调控哺乳动物生物钟节律中的作用 | 第54-55页 |
| 4.2 研究不同神经元之间的交流网络 | 第55-56页 |
| 4.3 对双振荡器模型的探索 | 第56-58页 |
| 第五章 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录:中英文对照 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
