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球毛壳菌素A的合成调控及发酵条件优化

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第14-35页
    1.1 研究的目的和意义第14-15页
    1.2 国内外相关研究领域的研究综述第15-33页
        1.2.1 真菌源植物病原真菌抑制剂研究进展第15-19页
        1.2.2 毛壳菌及其代谢产物第19-27页
        1.2.3 丝状真菌聚酮类化合物合成及调控第27-33页
    1.3 相关研究中存在的问题第33页
    1.4 课题来源及主要研究内容第33-35页
        1.4.1 课题来源第33页
        1.4.2 主要研究内容第33-35页
第2章 实验材料与方法第35-48页
    2.1 实验材料第35-36页
        2.1.1 菌株和质粒第35页
        2.1.2 酶和试剂第35页
        2.1.3 培养基和溶液第35-36页
    2.2 实验方法第36-48页
        2.2.1 植物病原真菌的筛选及鉴定第36-37页
        2.2.2 球毛壳菌对拟枝孢镰刀菌抑制能力检测第37页
        2.2.3 自然培养条件下球毛壳菌抗植物病原真菌活性成分的确定第37-38页
        2.2.4 球毛壳菌素A原药稳定性测试第38-39页
        2.2.5 拟枝孢镰刀菌对球毛壳菌素A体外耐药性测定第39页
        2.2.6 球毛壳菌素A抗马铃薯干腐病能力测试第39-40页
        2.2.7 诱导培养条件下球毛壳菌抗植物病原真菌活性成分的确定第40-41页
        2.2.8 Cgglu17A抗拟枝孢镰刀菌能力测试第41页
        2.2.9 Cger基因过表达载体的构建第41-42页
        2.2.10 农杆菌介导的球毛壳菌转化第42-43页
        2.2.11 过表达效果测定第43页
        2.2.12 随机插入突变质粒的构建及转化及转化子的筛选第43页
        2.2.13 T-DNA插入位置的确定及基因功能分析第43-44页
        2.2.14 前体物质球毛壳菌素A诱导合成效果分析第44页
        2.2.15 球毛壳菌的秸秆发酵第44-45页
        2.2.16 球毛壳菌素A最适提取条件的确定第45页
        2.2.17 秸秆发酵粗提物的初步纯化第45-46页
        2.2.18 初步纯化产物抗拟枝孢镰刀菌活性测试第46页
        2.2.19 秸秆生产球毛壳菌素A发酵体系的优化第46-47页
        2.2.20 检测及统计学方法第47-48页
第3章 球毛壳菌抗植物病原真菌活性物质的确定第48-68页
    3.1 引言第48页
    3.2 球毛壳菌抗植物病原真菌效果检测第48-51页
        3.2.1 病原真菌筛选及鉴定第48-50页
        3.2.2 球毛壳菌对病原真菌抑制效果检测第50-51页
    3.3 自然培养条件下抗植物病原真菌化合物的确定第51-57页
        3.3.1 活性物质提取溶剂的确定第51-53页
        3.3.2 粗提物的分离及活性物质的确定第53-57页
    3.4 球毛壳菌素A性质测定第57-61页
        3.4.1 球毛壳菌素A原药稳定性测试第57页
        3.4.2 体外抗植物病原真菌活性测试第57-60页
        3.4.3 球毛壳菌素A抗马铃薯干腐病活性测试第60-61页
    3.5 诱导条件下球毛壳菌分泌的抗植物病原真菌活性成分第61-66页
        3.5.1 抗菌蛋白的确定第61-63页
        3.5.2 抗植物病原真菌能力测试第63-66页
    3.6 本章小结第66-68页
第4章 球毛壳菌素合成调控的相关基因功能解析第68-86页
    4.1 引言第68页
    4.2 球毛壳菌素A合成相关基因的过表达第68-75页
        4.2.1 Cger基因功能的分析第68-69页
        4.2.2 过表达质粒构建及农杆菌转化第69-70页
        4.2.3 农杆菌介导的球毛壳菌转化及转化子验证筛选第70-72页
        4.2.4 过表达效果测定第72-73页
        4.2.5 过表达Cger基因对球毛壳菌的影响第73-75页
    4.3 随机插入突变法寻找球毛壳菌素A合成调控基因第75-84页
        4.3.1 随机插入突变质粒的构建第75-78页
        4.3.2 随机插入突变质粒的转化及筛选鉴定第78-79页
        4.3.3 基因插入位置的确定第79-80页
        4.3.4 合成调节基因功能分析第80-83页
        4.3.5 随机突变转化子稳定性测试第83-84页
    4.4 本章小结第84-86页
第5章 球毛壳菌素A发酵生产条件的优化第86-107页
    5.1 引言第86页
    5.2 球毛壳菌素A合成诱导物的确定第86-89页
        5.2.1 球毛壳菌素A的结构分析第86-87页
        5.2.2 不同前体物质对球毛壳菌素A产量的影响第87-89页
    5.3 球毛壳菌素A秸秆发酵可行性分析第89-101页
        5.3.1 球毛壳菌的秸秆发酵第89-91页
        5.3.2 球毛壳菌素A的提取第91-93页
        5.3.3 提取温度的确定第93-94页
        5.3.4 酸碱稳定性第94-95页
        5.3.5 产物初步纯化第95-97页
        5.3.6 玉米秸秆发酵-纯化体系的建立第97-98页
        5.3.7 含球毛壳菌素A粗产品抑菌能力测试第98-101页
    5.4 球毛壳菌素A秸秆发酵体系的优化第101-106页
        5.4.1 二次回归模型的建立及分析第101-103页
        5.4.2 秸秆固体发酵的响应面分析与优化第103-106页
    5.5 本章小结第106-107页
结论第107-109页
参考文献第109-124页
附录第124-135页
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果第135-137页
致谢第137-138页
个人简历第138页

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