摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第14-35页 |
1.1 研究的目的和意义 | 第14-15页 |
1.2 国内外相关研究领域的研究综述 | 第15-33页 |
1.2.1 真菌源植物病原真菌抑制剂研究进展 | 第15-19页 |
1.2.2 毛壳菌及其代谢产物 | 第19-27页 |
1.2.3 丝状真菌聚酮类化合物合成及调控 | 第27-33页 |
1.3 相关研究中存在的问题 | 第33页 |
1.4 课题来源及主要研究内容 | 第33-35页 |
1.4.1 课题来源 | 第33页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第33-35页 |
第2章 实验材料与方法 | 第35-48页 |
2.1 实验材料 | 第35-36页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第35页 |
2.1.2 酶和试剂 | 第35页 |
2.1.3 培养基和溶液 | 第35-36页 |
2.2 实验方法 | 第36-48页 |
2.2.1 植物病原真菌的筛选及鉴定 | 第36-37页 |
2.2.2 球毛壳菌对拟枝孢镰刀菌抑制能力检测 | 第37页 |
2.2.3 自然培养条件下球毛壳菌抗植物病原真菌活性成分的确定 | 第37-38页 |
2.2.4 球毛壳菌素A原药稳定性测试 | 第38-39页 |
2.2.5 拟枝孢镰刀菌对球毛壳菌素A体外耐药性测定 | 第39页 |
2.2.6 球毛壳菌素A抗马铃薯干腐病能力测试 | 第39-40页 |
2.2.7 诱导培养条件下球毛壳菌抗植物病原真菌活性成分的确定 | 第40-41页 |
2.2.8 Cgglu17A抗拟枝孢镰刀菌能力测试 | 第41页 |
2.2.9 Cger基因过表达载体的构建 | 第41-42页 |
2.2.10 农杆菌介导的球毛壳菌转化 | 第42-43页 |
2.2.11 过表达效果测定 | 第43页 |
2.2.12 随机插入突变质粒的构建及转化及转化子的筛选 | 第43页 |
2.2.13 T-DNA插入位置的确定及基因功能分析 | 第43-44页 |
2.2.14 前体物质球毛壳菌素A诱导合成效果分析 | 第44页 |
2.2.15 球毛壳菌的秸秆发酵 | 第44-45页 |
2.2.16 球毛壳菌素A最适提取条件的确定 | 第45页 |
2.2.17 秸秆发酵粗提物的初步纯化 | 第45-46页 |
2.2.18 初步纯化产物抗拟枝孢镰刀菌活性测试 | 第46页 |
2.2.19 秸秆生产球毛壳菌素A发酵体系的优化 | 第46-47页 |
2.2.20 检测及统计学方法 | 第47-48页 |
第3章 球毛壳菌抗植物病原真菌活性物质的确定 | 第48-68页 |
3.1 引言 | 第48页 |
3.2 球毛壳菌抗植物病原真菌效果检测 | 第48-51页 |
3.2.1 病原真菌筛选及鉴定 | 第48-50页 |
3.2.2 球毛壳菌对病原真菌抑制效果检测 | 第50-51页 |
3.3 自然培养条件下抗植物病原真菌化合物的确定 | 第51-57页 |
3.3.1 活性物质提取溶剂的确定 | 第51-53页 |
3.3.2 粗提物的分离及活性物质的确定 | 第53-57页 |
3.4 球毛壳菌素A性质测定 | 第57-61页 |
3.4.1 球毛壳菌素A原药稳定性测试 | 第57页 |
3.4.2 体外抗植物病原真菌活性测试 | 第57-60页 |
3.4.3 球毛壳菌素A抗马铃薯干腐病活性测试 | 第60-61页 |
3.5 诱导条件下球毛壳菌分泌的抗植物病原真菌活性成分 | 第61-66页 |
3.5.1 抗菌蛋白的确定 | 第61-63页 |
3.5.2 抗植物病原真菌能力测试 | 第63-66页 |
3.6 本章小结 | 第66-68页 |
第4章 球毛壳菌素合成调控的相关基因功能解析 | 第68-86页 |
4.1 引言 | 第68页 |
4.2 球毛壳菌素A合成相关基因的过表达 | 第68-75页 |
4.2.1 Cger基因功能的分析 | 第68-69页 |
4.2.2 过表达质粒构建及农杆菌转化 | 第69-70页 |
4.2.3 农杆菌介导的球毛壳菌转化及转化子验证筛选 | 第70-72页 |
4.2.4 过表达效果测定 | 第72-73页 |
4.2.5 过表达Cger基因对球毛壳菌的影响 | 第73-75页 |
4.3 随机插入突变法寻找球毛壳菌素A合成调控基因 | 第75-84页 |
4.3.1 随机插入突变质粒的构建 | 第75-78页 |
4.3.2 随机插入突变质粒的转化及筛选鉴定 | 第78-79页 |
4.3.3 基因插入位置的确定 | 第79-80页 |
4.3.4 合成调节基因功能分析 | 第80-83页 |
4.3.5 随机突变转化子稳定性测试 | 第83-84页 |
4.4 本章小结 | 第84-86页 |
第5章 球毛壳菌素A发酵生产条件的优化 | 第86-107页 |
5.1 引言 | 第86页 |
5.2 球毛壳菌素A合成诱导物的确定 | 第86-89页 |
5.2.1 球毛壳菌素A的结构分析 | 第86-87页 |
5.2.2 不同前体物质对球毛壳菌素A产量的影响 | 第87-89页 |
5.3 球毛壳菌素A秸秆发酵可行性分析 | 第89-101页 |
5.3.1 球毛壳菌的秸秆发酵 | 第89-91页 |
5.3.2 球毛壳菌素A的提取 | 第91-93页 |
5.3.3 提取温度的确定 | 第93-94页 |
5.3.4 酸碱稳定性 | 第94-95页 |
5.3.5 产物初步纯化 | 第95-97页 |
5.3.6 玉米秸秆发酵-纯化体系的建立 | 第97-98页 |
5.3.7 含球毛壳菌素A粗产品抑菌能力测试 | 第98-101页 |
5.4 球毛壳菌素A秸秆发酵体系的优化 | 第101-106页 |
5.4.1 二次回归模型的建立及分析 | 第101-103页 |
5.4.2 秸秆固体发酵的响应面分析与优化 | 第103-106页 |
5.5 本章小结 | 第106-107页 |
结论 | 第107-109页 |
参考文献 | 第109-124页 |
附录 | 第124-135页 |
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第135-137页 |
致谢 | 第137-138页 |
个人简历 | 第138页 |