| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 GH/IGF轴在鱼类生长中的作用 | 第12-13页 |
| 1.2 IGF的研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.1 IGF的种类和结构 | 第13页 |
| 1.2.2 IGF的作用机制 | 第13-14页 |
| 1.2.3 E_2对IGF的调控机制 | 第14-17页 |
| 1.3 雌激素受体拮抗剂在雌激素受体实验中的应用 | 第17-19页 |
| 1.4 金钱鱼的研究现状 | 第19-20页 |
| 1.5 本论文的研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 金钱鱼IGF基因的cDNA克隆及表达分析 | 第21-45页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 克隆用质粒和菌株 | 第21-22页 |
| 2.2 方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第23页 |
| 2.2.2 金钱鱼肝脏总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.3 两种IGF基因cDNA模板的制备 | 第24页 |
| 2.2.4 金钱鱼IGF ORF的克隆 | 第24页 |
| 2.2.5 PCR产物的分离、回收和纯化 | 第24-25页 |
| 2.2.6 连接反应 | 第25页 |
| 2.2.7 目的DNA片段的转化和筛选 | 第25页 |
| 2.2.8 序列分析与进化树的构建 | 第25-27页 |
| 2.3 结果 | 第27-41页 |
| 2.3.1 金钱鱼肝脏组织总RNA的提取 | 第27页 |
| 2.3.2 金钱鱼IGF-1 ORF的克隆及其序列分析 | 第27-29页 |
| 2.3.3 金钱鱼IGF-2 cDNA的克隆及其序列分析 | 第29-31页 |
| 2.3.4 多重序列比对分析 | 第31-33页 |
| 2.3.5 进化树分析 | 第33-34页 |
| 2.3.6 IGF基因的组织表达 | 第34-35页 |
| 2.3.7 IGFs mRNA在金钱鱼胚胎发育过程中的表达 | 第35-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-45页 |
| 3 雌二醇对金钱鱼GH及IGFs mRNA表达的影响 | 第45-49页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 3.1.1 材料 | 第45页 |
| 3.1.2 方法 | 第45-46页 |
| 3.2 实验结果 | 第46-47页 |
| 3.2.1 腹腔注射E_2对金钱鱼GH表达的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.2 腹腔注射E_2对金钱鱼IGFs表达的影响 | 第47页 |
| 3.3 讨论 | 第47-49页 |
| 4 雌二醇及雌激素受体拮抗剂对肝脏IGFs表达的影响 | 第49-65页 |
| 4.1 材料与方法 | 第49-51页 |
| 4.1.1 材料 | 第49页 |
| 4.1.2 方法 | 第49-51页 |
| 4.2 实验结果 | 第51-62页 |
| 4.2.1 E2对金钱鱼IGFs、ERs和GHRsmRNA表达的影响 | 第51-53页 |
| 4.2.2 广谱型雌激素受体拮抗剂Fulvestren对金钱鱼IGFs、ERs和GHRsmRNA表达的影响 | 第53-56页 |
| 4.2.3 α型雌激素受体拮抗剂MPP对金钱鱼IGFs、ERs和GHRsmRNA表达的影响 | 第56-59页 |
| 4.2.4 β型雌激素受体拮抗剂PHTPP对金钱鱼IGFs、ERs和GHRsmRNA表达的影响 | 第59-62页 |
| 4.3 讨论 | 第62-64页 |
| 4.3.1 E_2对金钱鱼IGFs、ERs和GHRsmRNA表达的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.2 三种雌激素受体拮抗剂对金钱鱼IGFs、ERs和GHRsmRNA表达的影响 | 第63-64页 |
| 4.4 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 导师简介 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
