| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-27页 |
| 1.1 乌索烷型三萜皂苷和岗梅 | 第14-16页 |
| 1.1.1 三萜皂苷概述 | 第14页 |
| 1.1.2 岗梅及乌索烷型三萜皂苷 | 第14-16页 |
| 1.2 三萜皂苷的生物合成研究现状 | 第16-23页 |
| 1.2.1 三萜皂苷生物合成途径的上游环节 | 第17-19页 |
| 1.2.2 三萜皂苷生物合成途径的下游环节 | 第19-23页 |
| 1.3 转录组及其在植物次生代谢产物生物合成方面的应用 | 第23-25页 |
| 1.3.1 发掘三萜皂苷的生物合成途径的关键基因的方法 | 第23页 |
| 1.3.2 转录组及第二代测序平台 | 第23-24页 |
| 1.3.3 NGS在植物代谢合成基因方面的应用 | 第24-25页 |
| 1.4 本文的研究思路 | 第25-27页 |
| 1.4.1 总体思路 | 第25-26页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 材料和方法 | 第27-45页 |
| 2.1 材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 植物 | 第27页 |
| 2.1.2 菌株 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试剂及工具酶 | 第27页 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 | 第27-28页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-45页 |
| 2.2.1 总皂苷的含量测定 | 第29页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第29-32页 |
| 2.2.3 转录组测序及数据分析 | 第32-35页 |
| 2.2.4 基因克隆 | 第35-38页 |
| 2.2.6 RT-qPCR | 第38-39页 |
| 2.2.7 RACE | 第39-40页 |
| 2.2.8 GATEWAY克隆 | 第40-42页 |
| 2.2.9 蛋白表达及功能分析 | 第42-45页 |
| 第三章 实验结果 | 第45-89页 |
| 3.1 岗梅根的转录组测序 | 第45-53页 |
| 3.1.1 研究部位的筛选 | 第45-46页 |
| 3.1.2 岗梅根总RNA的提取 | 第46-48页 |
| 3.1.3 岗梅根的转录组测序结果 | 第48-49页 |
| 3.1.4 基因注释和分类 | 第49-51页 |
| 3.1.5 测序深度分析 | 第51-53页 |
| 3.2 三萜皂苷生物合成相关酶基因的挖掘 | 第53-62页 |
| 3.2.1 上游途径 | 第53-57页 |
| 3.2.2 下游途径 | 第57-62页 |
| 3.3 三萜皂苷生物合成途径下游基因的表达模式分析 | 第62-74页 |
| 3.3.1 总RNA质量及cDNA的合成 | 第63-64页 |
| 3.3.2 内参基因的筛选 | 第64-69页 |
| 3.3.3 目的基因的表达水平分析 | 第69-72页 |
| 3.3.4 基因表达模式与皂苷代谢的相关性探讨 | 第72-74页 |
| 3.4 Amyrin Synthases的克隆和功能分析 | 第74-89页 |
| 3.4.1 IaAS3079和IaAS481的表达载体构建 | 第74-79页 |
| 3.4.2 IaAS3079和IaAS481的功能分析 | 第79-84页 |
| 3.4.3 unigene1015的cDNA全长获取 | 第84-89页 |
| 第四章 总结和讨论 | 第89-98页 |
| 4.1 总结 | 第89-90页 |
| 4.2 讨论 | 第90-96页 |
| 4.3 展望 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-103页 |
| 附录 | 第103-115页 |
| 在校期间发表的论文 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 附件 | 第117页 |
