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岗梅转录组及三萜皂苷生物合成相关酶基因的挖掘

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
引言第13-14页
第一章 文献综述第14-27页
    1.1 乌索烷型三萜皂苷和岗梅第14-16页
        1.1.1 三萜皂苷概述第14页
        1.1.2 岗梅及乌索烷型三萜皂苷第14-16页
    1.2 三萜皂苷的生物合成研究现状第16-23页
        1.2.1 三萜皂苷生物合成途径的上游环节第17-19页
        1.2.2 三萜皂苷生物合成途径的下游环节第19-23页
    1.3 转录组及其在植物次生代谢产物生物合成方面的应用第23-25页
        1.3.1 发掘三萜皂苷的生物合成途径的关键基因的方法第23页
        1.3.2 转录组及第二代测序平台第23-24页
        1.3.3 NGS在植物代谢合成基因方面的应用第24-25页
    1.4 本文的研究思路第25-27页
        1.4.1 总体思路第25-26页
        1.4.2 技术路线第26-27页
第二章 材料和方法第27-45页
    2.1 材料第27-29页
        2.1.1 植物第27页
        2.1.2 菌株第27页
        2.1.3 主要试剂及工具酶第27页
        2.1.4 主要溶液的配制第27-28页
        2.1.5 主要仪器设备第28-29页
    2.2 方法第29-45页
        2.2.1 总皂苷的含量测定第29页
        2.2.2 总RNA的提取第29-32页
        2.2.3 转录组测序及数据分析第32-35页
        2.2.4 基因克隆第35-38页
        2.2.6 RT-qPCR第38-39页
        2.2.7 RACE第39-40页
        2.2.8 GATEWAY克隆第40-42页
        2.2.9 蛋白表达及功能分析第42-45页
第三章 实验结果第45-89页
    3.1 岗梅根的转录组测序第45-53页
        3.1.1 研究部位的筛选第45-46页
        3.1.2 岗梅根总RNA的提取第46-48页
        3.1.3 岗梅根的转录组测序结果第48-49页
        3.1.4 基因注释和分类第49-51页
        3.1.5 测序深度分析第51-53页
    3.2 三萜皂苷生物合成相关酶基因的挖掘第53-62页
        3.2.1 上游途径第53-57页
        3.2.2 下游途径第57-62页
    3.3 三萜皂苷生物合成途径下游基因的表达模式分析第62-74页
        3.3.1 总RNA质量及cDNA的合成第63-64页
        3.3.2 内参基因的筛选第64-69页
        3.3.3 目的基因的表达水平分析第69-72页
        3.3.4 基因表达模式与皂苷代谢的相关性探讨第72-74页
    3.4 Amyrin Synthases的克隆和功能分析第74-89页
        3.4.1 IaAS3079和IaAS481的表达载体构建第74-79页
        3.4.2 IaAS3079和IaAS481的功能分析第79-84页
        3.4.3 unigene1015的cDNA全长获取第84-89页
第四章 总结和讨论第89-98页
    4.1 总结第89-90页
    4.2 讨论第90-96页
    4.3 展望第96-98页
参考文献第98-103页
附录第103-115页
在校期间发表的论文第115-116页
致谢第116-117页
附件第117页

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