摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第1章 引言 | 第13-19页 |
1.1 类风湿性关节炎的发病机理 | 第13页 |
1.2 类风湿性关节炎的治疗 | 第13-14页 |
1.3 血管生成在类风湿性关节炎病程中的作用 | 第14-15页 |
1.4 染料木素 | 第15-16页 |
1.5 染料木素对血管生成的影响 | 第16-17页 |
1.6 IL-6/JAK/STAT3/VEGF通路在RA血管生成中的重要意义 | 第17-18页 |
1.7 总结 | 第18-19页 |
第2章 实验材料、试剂与仪器 | 第19-23页 |
2.1 实验材料 | 第19页 |
2.2 实验试剂 | 第19页 |
2.3 细胞来源 | 第19页 |
2.4 实验仪器 | 第19-20页 |
2.5 试剂配制 | 第20-23页 |
2.5.1 MH7A细胞培养液 | 第20页 |
2.5.2 EA.hy926细胞培养液 | 第20页 |
2.5.3 EA.hy926细胞培养液(无血清) | 第20页 |
2.5.4 细胞冻存液 | 第20页 |
2.5.5 染料木素溶液 | 第20页 |
2.5.6 重组蛋白TNF-α溶液 | 第20页 |
2.5.7 重组蛋白IL-6溶液 | 第20页 |
2.5.8 AG490溶液 | 第20-23页 |
第3章 细胞培养及细胞存活率测定 | 第23-27页 |
3.1 实验方法 | 第23-25页 |
3.1.1 MH7A与EA.hy926细胞复苏 | 第23页 |
3.1.2 细胞传代 | 第23-24页 |
3.1.3 细胞冻存 | 第24页 |
3.1.4 CCK-8确定染料木素安全实验浓度 | 第24-25页 |
3.1.5 数据处理 | 第25页 |
3.2 实验结果 | 第25-26页 |
3.3 本章小结 | 第26-27页 |
第4章 染料木素抑制炎症环境中IL-6与VEGF的表达 | 第27-35页 |
4.1 实验方法 | 第27-32页 |
4.1.1 细胞处理 | 第27页 |
4.1.2 ELISA检测VEGF蛋白含量 | 第27-28页 |
4.1.3 ELISA检测IL-6蛋白含量 | 第28-29页 |
4.1.4 RNA提取 | 第29-30页 |
4.1.5 RNA逆转录 | 第30页 |
4.1.6 荧光定量PCR | 第30-32页 |
4.1.7 数据处理 | 第32页 |
4.2 实验结果 | 第32-34页 |
4.2.1 染料木素可在蛋白水平抑制IL-6及VEGF的表达 | 第32-33页 |
4.2.2 染料木素可在mRNA水平抑制IL-6及VEGF的表达 | 第33-34页 |
4.3 本章小结 | 第34-35页 |
第5章 体外验证染料木素对血管生成的抑制作用 | 第35-41页 |
5.1 实验方法 | 第35-37页 |
5.1.1 Transwell | 第35-36页 |
5.1.2 划痕实验 | 第36页 |
5.1.3 基质胶成血管 | 第36-37页 |
5.1.4 数据处理 | 第37页 |
5.2 实验结果 | 第37-40页 |
5.2.1 染料木素抑制EA.hy926细胞迁移 | 第37-38页 |
5.2.2 染料木素抑制EA.hy926细胞划痕愈合 | 第38-39页 |
5.2.3 染料木素抑制EA.hy926细胞成管 | 第39-40页 |
5.3 本章小结 | 第40-41页 |
第6章 MH7A细胞与EA.hy926细胞的共培养实验 | 第41-45页 |
6.1 实验方法 | 第41-42页 |
6.1.1 MH7A细胞的培养与处理 | 第41页 |
6.1.2 MH7A细胞与EA.hy926细胞的共培养 | 第41-42页 |
6.1.3 数据处理 | 第42页 |
6.2 实验结果 | 第42-43页 |
6.3 本章小结 | 第43-45页 |
第7章 探究染料木素在RA炎症环境下抑制血管生成的分子机制.. | 第45-53页 |
7.1 实验方法 | 第45-47页 |
7.1.1 细胞处理 | 第45页 |
7.1.2 ELISA检测VEGF蛋白含量 | 第45-46页 |
7.1.3 RNA提取 | 第46页 |
7.1.4 RNA逆转录 | 第46页 |
7.1.5 引物合成 | 第46页 |
7.1.6 荧光定量PCR | 第46页 |
7.1.7 细胞免疫荧光 | 第46-47页 |
7.1.8 数据处理 | 第47页 |
7.2 实验结果 | 第47-51页 |
7.2.1 AG490抑制MH7A细胞中VEGF的表达 | 第47-49页 |
7.2.2 染料木素抑制 MH7A 细胞中 JAK2 和 STAT3 的表达 | 第49-50页 |
7.2.3 染料木素抑制p-STAT3的核转位 | 第50-51页 |
7.3 本章小结 | 第51-53页 |
第8章 结论与展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
英文缩略词表 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-63页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第63页 |