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体外组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)过表达诱导乳腺癌细胞化疗耐药的实验研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
缩略语第12-13页
前言第13-17页
    研究现状、成果第13-16页
    研究目的、方法第16-17页
一、HDAC1过表达重组慢病毒载体的构建及鉴定第17-42页
    1.1 实验材料第17-27页
        1.1.1 质粒第17-19页
        1.1.2 菌株和细胞第19-20页
        1.1.3 实验仪器第20页
        1.1.4 实验耗材与器材第20-21页
        1.1.5 药品与试剂第21-23页
        1.1.6 主要溶液的配制第23-27页
    1.2 实验方法第27-38页
        1.2.1 实验流程第27-29页
        1.2.2 MCF-7细胞的培养第29页
        1.2.3 HDAC1基因的扩增第29-32页
        1.2.4 质粒pSIMPLE-18 T-HDAC 1的构建第32页
        1.2.5 大肠杆菌DH5α的制备第32-34页
        1.2.6 重组质粒pCDH-CMV-MCS-HDAC 1-EF1-Puro的构建第34-35页
        1.2.7 慢病毒颗粒包装第35-36页
        1.2.8 慢病毒转染乳腺癌细胞构建HDAC 1稳定过表达细胞系第36-37页
        1.2.9 Western Blot检测HDAC 1蛋白的表达第37-38页
        1.2.10 数据处理第38页
    1.3 结果第38-41页
        1.3.1 HDACD 1 PCR产物的回收第38-39页
        1.3.2 pSIMPLE-18 T-HDAC 1酶切鉴定第39-40页
        1.3.3 pCDH-CMV-MCS-HDAC 1-EF1-Puro的酶切鉴定第40页
        1.3.4 pCDH-CMV-MCS-HDAC 1-EF1-Puro的测序第40-41页
        1.3.5 Western Blot检测HDAC 1蛋白的表达第41页
    1.4 小结第41-42页
二、HDAC1过表达对乳腺癌细胞系化疗药物耐药程度的影响第42-64页
    2.1 实验材料第42-43页
        2.1.1 细胞第42页
        2.1.2 实验仪器第42页
        2.1.3 实验耗材与器材第42页
        2.1.4 药品与试剂第42-43页
        2.1.5 主要溶液的配制第43页
    2.2 实验方法第43-45页
        2.2.1 实验分组及给药方案第43-44页
        2.2.2 MTT法检验MCF-7细胞耐药性的改变第44页
        2.2.3 Hoechst 33258/PI双染色第44页
        2.2.4 流式检测细胞凋亡第44-45页
        2.2.5 Western Blot检测第45页
        2.2.6 数据处理第45页
    2.3 结果第45-63页
        2.3.1 MCF-7细胞耐药程度的改变第45-49页
        2.3.2 Hoechst 33258/PI双染色结果第49-54页
        2.3.3 流式检测细胞凋亡第54-58页
        2.3.4 Western Blot检测凋亡相关蛋白表达第58-63页
    2.4 小结第63-64页
讨论第64-72页
结论第72-73页
参考文献第73-80页
发表论文和参加科研情况说明第80-81页
综述 组蛋白去乙酰化酶1在衰老、退化及肿瘤中的多重作用第81-91页
    综述参考文献第85-91页
致谢第91页

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