中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语 | 第12-13页 |
前言 | 第13-17页 |
研究现状、成果 | 第13-16页 |
研究目的、方法 | 第16-17页 |
一、HDAC1过表达重组慢病毒载体的构建及鉴定 | 第17-42页 |
1.1 实验材料 | 第17-27页 |
1.1.1 质粒 | 第17-19页 |
1.1.2 菌株和细胞 | 第19-20页 |
1.1.3 实验仪器 | 第20页 |
1.1.4 实验耗材与器材 | 第20-21页 |
1.1.5 药品与试剂 | 第21-23页 |
1.1.6 主要溶液的配制 | 第23-27页 |
1.2 实验方法 | 第27-38页 |
1.2.1 实验流程 | 第27-29页 |
1.2.2 MCF-7细胞的培养 | 第29页 |
1.2.3 HDAC1基因的扩增 | 第29-32页 |
1.2.4 质粒pSIMPLE-18 T-HDAC 1的构建 | 第32页 |
1.2.5 大肠杆菌DH5α的制备 | 第32-34页 |
1.2.6 重组质粒pCDH-CMV-MCS-HDAC 1-EF1-Puro的构建 | 第34-35页 |
1.2.7 慢病毒颗粒包装 | 第35-36页 |
1.2.8 慢病毒转染乳腺癌细胞构建HDAC 1稳定过表达细胞系 | 第36-37页 |
1.2.9 Western Blot检测HDAC 1蛋白的表达 | 第37-38页 |
1.2.10 数据处理 | 第38页 |
1.3 结果 | 第38-41页 |
1.3.1 HDACD 1 PCR产物的回收 | 第38-39页 |
1.3.2 pSIMPLE-18 T-HDAC 1酶切鉴定 | 第39-40页 |
1.3.3 pCDH-CMV-MCS-HDAC 1-EF1-Puro的酶切鉴定 | 第40页 |
1.3.4 pCDH-CMV-MCS-HDAC 1-EF1-Puro的测序 | 第40-41页 |
1.3.5 Western Blot检测HDAC 1蛋白的表达 | 第41页 |
1.4 小结 | 第41-42页 |
二、HDAC1过表达对乳腺癌细胞系化疗药物耐药程度的影响 | 第42-64页 |
2.1 实验材料 | 第42-43页 |
2.1.1 细胞 | 第42页 |
2.1.2 实验仪器 | 第42页 |
2.1.3 实验耗材与器材 | 第42页 |
2.1.4 药品与试剂 | 第42-43页 |
2.1.5 主要溶液的配制 | 第43页 |
2.2 实验方法 | 第43-45页 |
2.2.1 实验分组及给药方案 | 第43-44页 |
2.2.2 MTT法检验MCF-7细胞耐药性的改变 | 第44页 |
2.2.3 Hoechst 33258/PI双染色 | 第44页 |
2.2.4 流式检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
2.2.5 Western Blot检测 | 第45页 |
2.2.6 数据处理 | 第45页 |
2.3 结果 | 第45-63页 |
2.3.1 MCF-7细胞耐药程度的改变 | 第45-49页 |
2.3.2 Hoechst 33258/PI双染色结果 | 第49-54页 |
2.3.3 流式检测细胞凋亡 | 第54-58页 |
2.3.4 Western Blot检测凋亡相关蛋白表达 | 第58-63页 |
2.4 小结 | 第63-64页 |
讨论 | 第64-72页 |
结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-80页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第80-81页 |
综述 组蛋白去乙酰化酶1在衰老、退化及肿瘤中的多重作用 | 第81-91页 |
综述参考文献 | 第85-91页 |
致谢 | 第91页 |