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小分子化合物对猪胚胎体外发育的影响及iPS嵌合胚胎的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
文献综述第14-44页
 第一章 体细胞重编程研究进展第14-24页
   ·哺乳动物体细胞核移植研究概述第14-19页
     ·卵母细胞体外成熟培养第14-15页
     ·供核体细胞培养与处理第15-16页
     ·核移植去核方法第16-18页
     ·体细胞核移植技术目前的应用进展第18-19页
   ·猪诱导多能干细胞研究进展第19-24页
     ·国外iPS 研究第19-20页
     ·国内iPS 细胞的研究第20-21页
     ·猪iPS 细胞嵌合体的研究第21-22页
     ·iPS 细胞的应用前景第22-24页
 第二章 小分子化合物对胚胎体外发育影响的研究进展第24-44页
   ·组蛋白去乙酰化相关试剂与胚胎早期发育第24-30页
     ·组蛋白乙酰化对胚胎早期发育的影响第26-27页
     ·曲古抑菌素A(TSA)对胚胎体外发育的影响第27-28页
     ·其它去乙酰化抑制剂对于胚胎体外发育的影响第28-30页
   ·DNA 甲基化与胚胎发育第30-34页
     ·DNA 甲基化研究概况第30-31页
     ·DNA 甲基化对胚胎早期发育的影响第31-33页
     ·甲基化有关小分子化合物对胚胎早期发育的影响第33-34页
   ·抗氧化小分子化合物与胚胎早期发育第34-39页
     ·p66Shc 研究进展第34-37页
     ·不同维生素对胚胎发育的影响第37-38页
     ·褪黑素对胚胎发育的影响第38-39页
   ·小分子化合物优化卵母细胞成熟的研究第39-44页
     ·亮甲酚蓝筛选卵母细胞的研究第40-41页
     ·小分子化合物对卵母细胞成熟抑制的影响第41-42页
     ·ITS 对卵母细胞成熟的影响第42-44页
试验研究第44-81页
 第三章 ITS 对猪卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响第44-54页
   ·材料和方法第44-47页
     ·试剂与用品第44-45页
     ·猪卵巢的采集及运输第45页
     ·卵母细胞的采集与体外成熟培养第45页
     ·卵母细胞孤雌激活及胚胎培养第45-46页
     ·皮质颗粒免疫荧光染色第46页
     ·实验设计第46页
     ·统计学分析第46-47页
   ·结果第47-52页
     ·激素添加不同时间对于卵母细胞成熟的影响第47-48页
     ·ITS 提高猪卵母细胞体外培养核成熟率第48-49页
     ·ITS 提高猪卵母细胞体外培养胞质成熟率第49-51页
     ·ITS 添加对猪胚胎体外发育的影响第51-52页
   ·讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
 第四章 Vc 对猪胚胎体外发育的影响研究第54-67页
  前言第54-55页
   ·材料与方法第55-58页
     ·试剂与仪器第55-56页
     ·卵母细胞收集及体外成熟培养第56页
     ·卵母细胞孤雌激活及胚胎培养第56页
     ·活性氧水平水平的测定第56-57页
     ·半定量RT-PCR 检测氧化相关基因的mRNA 表达第57页
     ·TUNEL 方法检测胚胎内细胞凋亡第57页
     ·荧光定量PCR 反应检测胚胎中Nanog 基因的表达第57页
     ·实验设计第57-58页
     ·统计学分析第58页
   ·结果第58-64页
     ·不同浓度Vc 对猪胚胎中ROS 水平的影响第58-60页
     ·不同浓度Vc 对于猪胚胎体外发育的影响第60-61页
     ·不同浓度Vc 对胚胎中Bcl-xl 和 Bax 基因表达的影响第61-62页
     ·不同浓度Vc 对囊胚内细胞凋亡的影响第62-64页
     ·不同浓度Vc 对猪胚胎多能性基因Nanog 表达的影响第64页
   ·讨论第64-66页
   ·小结第66-67页
 第五章 陕北八眉猪超数排卵的初步研究第67-71页
   ·材料与方法第67-68页
     ·材料第67-68页
     ·猪的处理及发情观察第68页
     ·试验设计与统计学分析第68页
   ·结果第68-70页
   ·讨论第70页
   ·小结第70-71页
 第六章 猪iPS 细胞嵌合胚胎的研究第71-81页
   ·材料与方法第71-73页
     ·试剂和用品第71页
     ·猪卵母细胞采集与体外成熟第71页
     ·iPS 供核细胞第71-72页
     ·iPS 细胞重构胚胎的构建第72页
     ·胚胎激活与培养第72页
     ·iPS 胚胎嵌合和受体移植第72页
     ·试验设计第72-73页
     ·统计学分析第73页
   ·结果第73-79页
     ·不同iPS 细胞对于重构胚胎体外发育的影响第73-74页
     ·iPS-3 细胞嵌合胚胎体外发育的研究第74-75页
     ·不同冲胚时间对冲胚效果的影响第75-76页
     ·不同冲胚方法对冲胚效果的影响第76页
     ·iPS 细胞嵌合胚胎受体猪移植第76-79页
   ·讨论第79-80页
   ·小结第80-81页
结论第81-82页
论文创新点及进一步研究课题第82-83页
参考文献第83-100页
致谢第100-101页
作者简介第101页

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