摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
·植物盐害及其耐盐性 | 第14-21页 |
·盐分胁迫对植物的伤害 | 第14-17页 |
·盐分不足对盐生植物的伤害 | 第17-18页 |
·离子平衡在植物耐盐中的作用 | 第18-21页 |
·本研究的目的意义和研究内容 | 第21-26页 |
·CAX 亚家族的研究进展 | 第21-24页 |
·CCXs 家族与CAXs 的关系 | 第24页 |
·研究内容 | 第24-26页 |
第二章 拟南芥AtCCX1 基因的克隆 | 第26-42页 |
·材料与方法 | 第26-32页 |
·试验材料与培养方法 | 第26-27页 |
·DNA 的提取 | 第27-28页 |
·引物设计、合成与PCR 反应条件 | 第28页 |
·PCR 产物纯化 | 第28-29页 |
·目的片段与克隆载体的连接 | 第29页 |
·重组质粒的转化及筛选 | 第29-32页 |
·测序鉴定 | 第32页 |
·多重序列比对分析和二级结构预测模型构建 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-40页 |
·AtCCX1 基因的克隆 | 第32-39页 |
·AtCCX1 基因的跨膜结构预测 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40页 |
·小结 | 第40-42页 |
第三章 AtCCX1 在拟南芥中的组织定位及 RT-PCR 表达分析 | 第42-49页 |
·材料与方法 | 第42-46页 |
·试验材料与培养方法 | 第42-43页 |
·RNA 的提取 | 第43-44页 |
·RNA 质量检测 | 第44页 |
·反转录反应 | 第44-45页 |
·引物 | 第45页 |
·PCR 反应 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-47页 |
·AtCCX1 在拟南芥各组织中的表达 | 第46页 |
·表达分析 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
第四章AtCCX1 在毕赤酵母中的异源表达、等离子耦合质谱分析以及转运底物鉴定 | 第49-58页 |
·材料与方法 | 第49-52页 |
·试验材料 | 第49页 |
·基因的PCR 扩增与质粒的提取 | 第49-50页 |
·PCR 产物和质粒的酶切及酶切产物纯化 | 第50页 |
·酶切产物的连接和转化 | 第50页 |
·重组质粒的线性化处理 | 第50-51页 |
·酵母感受态细胞的制备 | 第51页 |
·电转化 | 第51页 |
·分光光度法OD600 检测菌体浓度 | 第51页 |
·等离子耦合质谱分析 | 第51-52页 |
·结果与分析 | 第52-56页 |
·OD600 分析菌体生长情况 | 第52-55页 |
·ICP-MS 分析元素含量 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·小结 | 第57-58页 |
第五章 AtCCX1 在酵母中的胞内定位和离子转运分析 | 第58-70页 |
·材料与方法 | 第58-63页 |
·试验材料 | 第58页 |
·EGFP 序列的获取 | 第58-59页 |
·PCR 产物和质粒的酶切及酶切产物纯化 | 第59页 |
·重组质粒的筛选 | 第59页 |
·内参P51 序列的获取及P51-EGFP 重组质粒的构建 | 第59-60页 |
·拟南芥RNA 的提取、反转录反应、PCR | 第60页 |
·酶切PCR 产物和质粒DNA、片段连接 | 第60-61页 |
·转化与筛选 | 第61页 |
·酵母液泡膜囊的制备 | 第61-62页 |
·SBFⅠ和PBFⅠ的染色 | 第62-63页 |
·结果与分析 | 第63-67页 |
·AtCCX1 在酵母细胞内的定位 | 第63页 |
·AtCCX1 转运Na+和K+的关系研究 | 第63-66页 |
·SBFⅠ、PBFⅠ染色观察 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-68页 |
·小结 | 第68-70页 |
第六章 结论与展望 | 第70-72页 |
·结论 | 第70-71页 |
·研究展望 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-85页 |
附录一:仪器设备 | 第85-86页 |
附录二:网上程序执行网址 | 第86-87页 |
附录三:质粒图谱 | 第87-89页 |
缩略词 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
作者简介 | 第91页 |