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拟南芥AtCCX1基因的克隆、表达和功能鉴定

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-26页
   ·植物盐害及其耐盐性第14-21页
     ·盐分胁迫对植物的伤害第14-17页
     ·盐分不足对盐生植物的伤害第17-18页
     ·离子平衡在植物耐盐中的作用第18-21页
   ·本研究的目的意义和研究内容第21-26页
     ·CAX 亚家族的研究进展第21-24页
     ·CCXs 家族与CAXs 的关系第24页
     ·研究内容第24-26页
第二章 拟南芥AtCCX1 基因的克隆第26-42页
   ·材料与方法第26-32页
     ·试验材料与培养方法第26-27页
     ·DNA 的提取第27-28页
     ·引物设计、合成与PCR 反应条件第28页
     ·PCR 产物纯化第28-29页
     ·目的片段与克隆载体的连接第29页
     ·重组质粒的转化及筛选第29-32页
     ·测序鉴定第32页
     ·多重序列比对分析和二级结构预测模型构建第32页
   ·结果与分析第32-40页
     ·AtCCX1 基因的克隆第32-39页
     ·AtCCX1 基因的跨膜结构预测第39-40页
   ·讨论第40页
   ·小结第40-42页
第三章 AtCCX1 在拟南芥中的组织定位及 RT-PCR 表达分析第42-49页
   ·材料与方法第42-46页
     ·试验材料与培养方法第42-43页
     ·RNA 的提取第43-44页
     ·RNA 质量检测第44页
     ·反转录反应第44-45页
     ·引物第45页
     ·PCR 反应第45-46页
   ·结果与分析第46-47页
     ·AtCCX1 在拟南芥各组织中的表达第46页
     ·表达分析第46-47页
   ·讨论第47-48页
   ·小结第48-49页
第四章AtCCX1 在毕赤酵母中的异源表达、等离子耦合质谱分析以及转运底物鉴定第49-58页
   ·材料与方法第49-52页
     ·试验材料第49页
     ·基因的PCR 扩增与质粒的提取第49-50页
     ·PCR 产物和质粒的酶切及酶切产物纯化第50页
     ·酶切产物的连接和转化第50页
     ·重组质粒的线性化处理第50-51页
     ·酵母感受态细胞的制备第51页
     ·电转化第51页
     ·分光光度法OD600 检测菌体浓度第51页
     ·等离子耦合质谱分析第51-52页
   ·结果与分析第52-56页
     ·OD600 分析菌体生长情况第52-55页
     ·ICP-MS 分析元素含量第55-56页
   ·讨论第56-57页
   ·小结第57-58页
第五章 AtCCX1 在酵母中的胞内定位和离子转运分析第58-70页
   ·材料与方法第58-63页
     ·试验材料第58页
     ·EGFP 序列的获取第58-59页
     ·PCR 产物和质粒的酶切及酶切产物纯化第59页
     ·重组质粒的筛选第59页
     ·内参P51 序列的获取及P51-EGFP 重组质粒的构建第59-60页
     ·拟南芥RNA 的提取、反转录反应、PCR第60页
     ·酶切PCR 产物和质粒DNA、片段连接第60-61页
     ·转化与筛选第61页
     ·酵母液泡膜囊的制备第61-62页
     ·SBFⅠ和PBFⅠ的染色第62-63页
   ·结果与分析第63-67页
     ·AtCCX1 在酵母细胞内的定位第63页
     ·AtCCX1 转运Na+和K+的关系研究第63-66页
     ·SBFⅠ、PBFⅠ染色观察第66-67页
   ·讨论第67-68页
   ·小结第68-70页
第六章 结论与展望第70-72页
   ·结论第70-71页
   ·研究展望第71-72页
参考文献第72-85页
附录一:仪器设备第85-86页
附录二:网上程序执行网址第86-87页
附录三:质粒图谱第87-89页
缩略词第89-90页
致谢第90-91页
作者简介第91页

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