缩略词表 | 第3-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第9-16页 |
1.1 植物韧皮部卸载途径 | 第9-11页 |
1.1.1 植物共质体卸载 | 第9-10页 |
1.1.2 植物质外体卸载 | 第10页 |
1.1.3 植物共质体与质外体协同卸载 | 第10-11页 |
1.2 植物韧皮部卸载机理 | 第11-12页 |
1.2.1 植物共质体卸载机理 | 第11-12页 |
1.2.2 植物质外体卸载机理 | 第12页 |
1.3 研究植物韧皮部卸载途径的方法 | 第12-15页 |
1.3.1 关键酶的空间分布和活性变化 | 第13页 |
1.3.2 超微结构观察 | 第13页 |
1.3.3 使用抑制剂或其他抑制方法 | 第13-14页 |
1.3.4 使用荧光染料或荧光蛋白等进行示踪 | 第14-15页 |
1.4 本课题研究意义 | 第15-16页 |
第二章 果实不同部位可溶性糖含量、α-半乳糖苷酶基因表达水平和活性的研究 | 第16-39页 |
2.1 黄瓜果实不同部位可溶性糖含量、α-半乳糖苷酶基因表达水平和活性的研究 | 第16-34页 |
2.1.1 材料与方法 | 第16-23页 |
2.1.1.1 材料 | 第16-17页 |
2.1.1.2 方法 | 第17-23页 |
2.1.2 结果与分析 | 第23-34页 |
2.1.2.1 5种可溶性糖鉴定和标准曲线的绘制 | 第23-24页 |
2.1.2.2 黄瓜果柄、果实前端不同部位组织中糖含量的研究 | 第24-26页 |
2.1.2.3 黄瓜果柄、果实不同部位、不同时间内汁液中糖含量的研究 | 第26-29页 |
2.1.2.4 黄瓜总RNA的提取及完整性检验 | 第29页 |
2.1.2.5 黄瓜6种α-半乳糖苷酶基因及内参基因的扩增 | 第29-30页 |
2.1.2.6 黄瓜α-半乳糖苷酶基因定量片段熔点曲线分析 | 第30-31页 |
2.1.2.7 黄瓜6种小半乳糖苷酶基因定量引物扩增标准曲线 | 第31-32页 |
2.1.2.8 黄瓜果柄、果实前端不同部位6种α-半乳糖苷酶表达水平的研究 | 第32-33页 |
2.1.2.9 黄瓜果柄、果实前端不同部位碱、酸性α-半乳糖苷酶活性的研究 | 第33-34页 |
2.2 甜瓜果柄不同部位韧皮部汁液可溶性糖含量的研究 | 第34-36页 |
2.2.1 材料与方法 | 第34-35页 |
2.2.1.1 材料 | 第34页 |
2.2.1.2 方法 | 第34-35页 |
2.2.2 结果与分析 | 第35-36页 |
2.3 讨论 | 第36-39页 |
第三章 去除黄瓜第二果实对第一果实果柄可溶性糖含量、α-半乳糖苷酶基因表达水平和活性影响的研究 | 第39-47页 |
3.1 材料与方法 | 第39-40页 |
3.1.1 材料 | 第39页 |
3.1.2 方法 | 第39-40页 |
3.1.2.1 黄瓜果柄取样方法 | 第39页 |
3.1.2.2 黄瓜果柄汁液取样方法 | 第39-40页 |
3.1.2.3 试验方法 | 第40页 |
3.2 结果与分析 | 第40-45页 |
3.2.1 去除第二果实对第一果实果柄组织中糖含量的影响 | 第40-41页 |
3.2.2 去除第二果实对第一果实黄瓜果柄中汁液糖含量的影响 | 第41-43页 |
3.2.3 去除第二果实对第一果实果柄中6种α-半乳糖苷酶表达水平的研究 | 第43-44页 |
3.2.4 去除第二果实对第一果实果柄中碱、酸性α-半乳糖苷酶活性的研究 | 第44-45页 |
3.3 讨论 | 第45-47页 |
第四章 黄瓜两种碱性α-半乳糖苷酶RNAi载体的构建 | 第47-62页 |
4.1 材料与方法 | 第47-53页 |
4.1.1 材料 | 第47页 |
4.1.2 方法 | 第47-53页 |
4.1.2.1 pX6/pX7载体的选择和RNAi载体构建思路 | 第47-49页 |
4.1.2.2 RNA提取和反转录 | 第49-50页 |
4.1.2.4 目的片段cDNA片段的回收、酶切、连接和转化 | 第50-51页 |
4.1.2.5 重组质粒的提取、验证和测序 | 第51-52页 |
4.1.2.6 RT-PCR法获得两种碱性α半乳糖苷酶基因反向片段 | 第52页 |
4.1.2.7 反向片段目的片段cDNA片段的回收、酶切、连接和转化 | 第52页 |
4.1.2.8 RNAi片段连入pX6载体 | 第52页 |
4.1.2.9 将RNAi载体转入农杆菌 | 第52-53页 |
4.2 结果与分析 | 第53-60页 |
4.2.1 碱性α-半乳糖苷酶Ⅰ RNAi载体的构建 | 第53-56页 |
4.2.1.1 RNA的完整性 | 第53页 |
4.2.1.2 碱性α-半乳糖苷酶Ⅰ正向片段扩增结果 | 第53-54页 |
4.2.1.3 碱性α-半乳糖苷酶Ⅰ正向片段连接结果 | 第54页 |
4.2.1.4 碱性α-半乳糖苷酶Ⅰ反向片段扩增结果 | 第54-55页 |
4.2.1.5 碱性α-半乳糖苷酶Ⅰ RNAi片段测序检测 | 第55-56页 |
4.2.2 碱性α-半乳糖苷酶Ⅱ RNAi载体的构建 | 第56-60页 |
4.2.2.1 碱性α-半乳糖苷酶Ⅱ正向片段扩增结果 | 第56-57页 |
4.2.2.2 碱性α-半乳糖苷酶Ⅱ正向片段连接结果 | 第57页 |
4.2.2.3 碱性α-半乳糖苷酶Ⅱ反向片段扩增结果 | 第57-58页 |
4.2.2.4 碱性α-半乳糖苷酶ⅡRNAi片段测序检测 | 第58-60页 |
4.3 讨论 | 第60-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
致谢 | 第70-71页 |