| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 湖羊品种简介 | 第11页 |
| 2 毛囊简介 | 第11-14页 |
| 2.1 毛囊的结构特征 | 第11-12页 |
| 2.2 毛乳头细胞与毛囊的生长发育 | 第12-13页 |
| 2.3 TGF-β/Smads信号通路与毛囊的发生发育 | 第13-14页 |
| 3 miRNA调控毛囊发育的研究进展 | 第14-18页 |
| 3.1 miRNA的生物合成及作用机制 | 第14-16页 |
| 3.2 miRNAs在毛囊发生发育中的研究进展 | 第16-17页 |
| 3.3 miR-148a和miR-10a的研究进展 | 第17-18页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 湖羊毛乳头细胞的分离培养与鉴定 | 第20-30页 |
| 1 引言 | 第20页 |
| 2 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1 实验动物 | 第20页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.3 主要试剂材料 | 第20-21页 |
| 3 实验方法 | 第21-25页 |
| 3.1 毛乳头细胞培养基配方 | 第21页 |
| 3.2 湖羊毛乳头细胞分离与原代培养 | 第21-22页 |
| 3.3 湖羊毛乳头细胞的传代与纯化 | 第22-23页 |
| 3.4 湖羊毛乳头细胞的冻存与复苏 | 第23页 |
| 3.5 湖羊毛乳头细胞染色及鉴定 | 第23-25页 |
| 4 结果分析 | 第25-27页 |
| 4.1 湖羊毛乳头细胞的分离培养 | 第25-26页 |
| 4.2 湖羊毛乳头细胞的染色及免疫荧光鉴定 | 第26-27页 |
| 5 讨论 | 第27-30页 |
| 第三章 湖羊BMP7基因的靶向miRNAs预测及鉴定 | 第30-50页 |
| 1 引言 | 第30页 |
| 2 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1 实验样本 | 第30页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 2.3 主要试剂 | 第31页 |
| 2.4 统计及分析软件 | 第31页 |
| 3 实验方法 | 第31-42页 |
| 3.1 湖羊BMP7基因的靶向miRNAs的预测和筛选 | 第31页 |
| 3.2 靶基因BMP7 3'UTR荧光素酶报告基因构建 | 第31-33页 |
| 3.3 靶基因BMP7 3'UTR上miR-148a和miR-10a结合位点突变 | 第33-35页 |
| 3.4 miR-148a和miR-10a的模拟物和抑制物的转染效果验证 | 第35-37页 |
| 3.5 双荧光素酶报告基因检测 | 第37-38页 |
| 3.6 Western Blot蛋白检测 | 第38-40页 |
| 3.7 RT-qPCR检测 | 第40-42页 |
| 4 结果分析 | 第42-47页 |
| 4.1 湖羊BMP7基因的靶向miRNAs的预测 | 第42页 |
| 4.2 靶基因BMP7 3'UTR荧光素酶报告基因构建 | 第42-44页 |
| 4.3 miR-148a和miR-10a的模拟物和抑制物的转染效果验证 | 第44-45页 |
| 4.4 双荧光素酶报告基因检测 | 第45-46页 |
| 4.5 miR-148a和miR-10a在mRNA及蛋白水平调控BMP7表达 | 第46-47页 |
| 5 讨论 | 第47-50页 |
| 第四章 miR-148a和miR-10a对毛乳头细胞及TGF-β/Smads通路中相关基因影响的研究 | 第50-58页 |
| 1 引言 | 第50页 |
| 2 实验材料 | 第50-51页 |
| 2.1 实验样本 | 第50页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第50页 |
| 2.3 主要试剂 | 第50-51页 |
| 3 实验方法 | 第51-52页 |
| 3.1 细胞培养及转染 | 第51页 |
| 3.2 CCK-8检测 | 第51页 |
| 3.3 RT-qPCR | 第51-52页 |
| 4 结果分析 | 第52-55页 |
| 4.1 miR-148a和miR-10a对湖羊毛乳头细胞增殖的影响 | 第52-54页 |
| 4.2 miR-148a和miR-10a对TGF-β/Smads通路中相关基因的影响 | 第54-55页 |
| 5 讨论 | 第55-58页 |
| 结论 | 第58页 |
| 创新点 | 第58页 |
| 下一步研究计划 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及申请专利目录 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
