| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1 细胞内蛋白质的合成终止和肽链释放因子 | 第13-15页 |
| ·蛋白质合成机制 | 第13页 |
| ·肽链释放因子和肽链的释放 | 第13-15页 |
| 2 密码子使用的通用性和特殊性 | 第15-16页 |
| ·密码子的特点 | 第15页 |
| ·密码子识别机制的进化 | 第15-16页 |
| 3 蓝氏贾第鞭毛虫及本课题的研究意义 | 第16-21页 |
| ·蓝氏贾第鞭毛虫 | 第16-17页 |
| ·蓝氏贾第鞭毛虫在转录中的特点 | 第17页 |
| ·Diplomonads和遗传密码的进化 | 第17-19页 |
| ·研究蓝氏贾第鞭毛虫识别终止密码子的意义 | 第19-21页 |
| 第二章 贾第虫两类肽链释放因子的相互作用 | 第21-28页 |
| 1 引言 | 第21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-24页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·主要实验设备 | 第21-22页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·寡聚核苷酸 | 第22页 |
| ·主要酶及生化试剂 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·酵母双杂交重组质粒pGBKT7-GeRF3和pGADT7-GeRF1的构建 | 第22-24页 |
| ·酵母双杂交重组质粒的共转化 | 第24页 |
| ·β-半乳糖营酶活性分析 | 第24页 |
| 3.结果 | 第24-26页 |
| ·酵母双杂交重组质粒的构建 | 第24-25页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性分析 | 第25-26页 |
| 4 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 贾第虫GeRF1N及其突变体识别终止密码子的性质 | 第28-41页 |
| 1 前言 | 第28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-35页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·主要实验设备 | 第28页 |
| ·菌株和质粒 | 第28-29页 |
| ·寡聚核苷酸 | 第29页 |
| ·主要的工具酶及生化试剂 | 第29-30页 |
| ·主要试剂的配制 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·含有重组基因G1/Sc eRF1 pBF011的构建 | 第30-33页 |
| ·pBF012质粒的转化及鉴定 | 第33页 |
| ·pBF012突变体的构建 | 第33-34页 |
| ·Gl/Sc eRF1及其突变体识别终止密码子的性质 | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-40页 |
| ·pBF012重组质粒的构建 | 第35-37页 |
| ·重组质粒pMD18T-GeRF1N的构建 | 第35页 |
| ·重组质粒pMD18T-GeRF1N-ScMC的构建 | 第35-36页 |
| ·重组质粒pBF011的构建 | 第36页 |
| ·含有HA标签重组质粒pBF012的构建 | 第36-37页 |
| ·Gl/Sc eRF1 pDB012突变体的构建 | 第37-40页 |
| ·点突变位点的选取 | 第37页 |
| ·构建Gl/Sc eRF1突变体 | 第37-38页 |
| ·Gl/Sc eRF1及其突变体识别终止密码子的性质 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 贾第虫GeRF1及其突变体识别终止密码子的活性 | 第41-50页 |
| 1 前言 | 第41页 |
| 2 材料和方法 | 第41-44页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·主要实验设备 | 第41-42页 |
| ·菌株和质粒 | 第42页 |
| ·主要的工具酶及生化试剂 | 第42页 |
| ·主要试剂的配制 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·用糖源转化的方法测定Gl/Sc eRF1及其突变体的通读活性 | 第42-43页 |
| ·双荧光素酶通读活性实验 | 第43-44页 |
| 3 实验结果 | 第44-46页 |
| ·Gl/Sc eRF1识别终止密码子的活性 | 第44页 |
| ·Gl/Sc eRF1突变体识别终止密码子的活性 | 第44-46页 |
| ·Gl/Sc eRF1在酵母细胞中表达量的检测 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 总结与展望 | 第57-59页 |
| 附录 | 第59-62页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 个人简介及联系方式 | 第64-66页 |
