| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 英文缩略词表 | 第7-8页 |
| 前言 | 第8-12页 |
| 技术路线 | 第12-13页 |
| 第一部分 半枝莲对人结直肠肿瘤干细胞自我更新和分化作用的研究 | 第13-24页 |
| 1 实验材料 | 第13-14页 |
| 1.1 实验细胞 | 第13页 |
| 1.2 实验药品 | 第13页 |
| 1.3 实验试剂及仪器 | 第13-14页 |
| 2 实验方法及结果 | 第14-24页 |
| 2.1 HT29-CSC的筛选 | 第14-15页 |
| 2.2 半枝莲对HT-29CSC自我更新的影响 | 第15-22页 |
| 2.2.1 半枝莲对HT-29CSC增殖的影响 | 第15-16页 |
| 2.2.2 半枝莲对HT-29CSC成球能力的影响 | 第16-18页 |
| 2.2.3 半枝莲对 3D培养的HT-29CSC生长形态的影响 | 第18-19页 |
| 2.2.4 半枝莲对 3D培养的HT-29CSC ATP的影响 | 第19-20页 |
| 2.2.5 半枝莲对HT-29CSC生长转化的影响 | 第20-22页 |
| 2.3 半枝莲对HT-29CSC分化的影响 | 第22-24页 |
| 第二部分 半枝莲调控人结肠肿瘤干细胞的Hedgehog信号通路的分子机制 | 第24-46页 |
| 1 实验材料 | 第24-26页 |
| 1.1 实验细胞 | 第24页 |
| 1.2 实验药品 | 第24页 |
| 1.3 实验试剂 | 第24-25页 |
| 1.4 实验仪器 | 第25-26页 |
| 1.5 实验场地 | 第26页 |
| 2 实验方法及结果 | 第26-46页 |
| 2.1 半枝莲对与Hedgehog信号通路相关基因的m RNA表达水平的影响（实时荧光定量PCR） | 第26-41页 |
| 2.1.1 实验样品的制备 | 第26页 |
| 2.1.2 Axy Prep Mutisource Total RNA Miniprep Kit提取细胞总RNA | 第26-27页 |
| 2.1.3 RNA的鉴定 | 第27-29页 |
| 2.1.4 RNA逆转录合成c DNA | 第29页 |
| 2.1.5 实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time PCR） | 第29-38页 |
| 2.1.5.1 引物设计 | 第29-31页 |
| 2.1.5.2 Real-Time PCR | 第31-38页 |
| 2.1.6 实验数据的处理 | 第38-41页 |
| 2.2 半枝莲对HT-29CSC标记物Lgr5以及Hedgehog信号通路中Gli1、c-Myc蛋白表达的影响(Western-blot) | 第41-46页 |
| 2.2.1 实验样品的制备 | 第41页 |
| 2.2.2 Western Blot法测定试验所需溶液配制 | 第41-42页 |
| 2.2.3 蛋白上样和电泳 | 第42-43页 |
| 2.2.4 转膜（湿转法） | 第43页 |
| 2.2.5 蛋白的封闭 | 第43页 |
| 2.2.6 抗体孵育 | 第43-44页 |
| 2.2.7 显色 | 第44页 |
| 2.2.8 实验数据的处理 | 第44-46页 |
| 讨论 | 第46-54页 |
| 1 肿瘤干细胞的概述 | 第46-47页 |
| 2 阳性药GANT61的选取依据 | 第47-48页 |
| 3.考察半枝莲对HT-29CSC自我更新的影响 | 第48-51页 |
| 4 半枝莲对HT-29CSC分化的影响 | 第51页 |
| 5 半枝莲基于Hedgehog信号通路抗人结肠癌HT-29CSC的分子机制 | 第51-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 1.半枝莲有效抑制体外抗结直肠肿瘤干细胞的自我更新与分化 | 第54页 |
| 2.半枝莲体外抗肿瘤干细胞作用与调控Hedgehog信号通路有关 | 第54-55页 |
| 问题与展望 | 第55-56页 |
| 1.结直肠肿瘤干细胞的筛选有待改进 | 第55页 |
| 2.半枝莲醇提物抗肿瘤干细胞的分子机制有待进一步研究 | 第55页 |
| 3.半枝莲体外抗肿瘤干细胞作用的物质基础不明确 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 文献综述 | 第62-71页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第72-73页 |
